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猪蓝耳病的诊断和防治 被引量:15
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作者 马健 陈永刚 +1 位作者 李珊倩 孙世铎 《畜牧兽医杂志》 2017年第1期140-142,共3页
猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引发的高急性、高度接触性、高致死传染性疾病,也被称为猪... 猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引发的高急性、高度接触性、高致死传染性疾病,也被称为猪蓝耳病。临床上表现为发烧、咳嗽、耳朵发紫、呼吸困难等症状,会导致母猪繁殖性障碍、流产、死胎,仔猪呼吸系统疾病,生产实践中死亡率极高。目前尚无有效的特异性药物能对其治疗,本文从蓝耳病的发病原因、传播途径、临床症状、病理变化、实验室诊断、综合防治措施进行阐述,以期能为蓝耳病的诊断和防治提供帮助。 展开更多
关键词 蓝耳病 病毒 诊断 预防
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PRRSV缺失变异毒株HB-2(sh)/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位 被引量:8
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作者 匡宇 郭鑫 +3 位作者 滕可导 杨汉春 陈艳红 查振林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第3期8-10,共3页
用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HB-2(sh)/2002滴鼻感染30日龄健康仔猪,分别于3、7、14、28、42天宰杀,用免疫组化法对呼吸道,泌尿道,生殖道和消化道的主要器官以及脑和主要淋巴器官中的病毒抗原进行了定位分析。结果表明,在各个时间段... 用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HB-2(sh)/2002滴鼻感染30日龄健康仔猪,分别于3、7、14、28、42天宰杀,用免疫组化法对呼吸道,泌尿道,生殖道和消化道的主要器官以及脑和主要淋巴器官中的病毒抗原进行了定位分析。结果表明,在各个时间段,病毒抗原阳性率最高的器官为呼吸道、消化道沿途的淋巴结,组织中的阳性细胞多数为巨噬细胞和树突细胞,从个别猪的脑、心肌、肝和呼吸道上皮的细胞检测到阳性信号,同时发现该毒株主要在巨噬细胞和呼吸道腺上皮细胞复制。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 实验感染 分布与定位 免疫组织化学染色法
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一例猪链球菌与蓝耳病病毒混合感染的实验室诊断 被引量:4
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作者 陶巍夫 李超 +2 位作者 王浩先 黄培鑫 倪宏波 《现代畜牧兽医》 2018年第10期32-36,共5页
安达市某猪场仔猪大批发病,病猪出现精神萎靡、呼吸困难、采食量下降、体温升高。为对该场病猪进行确诊,运用临床诊断和病理解剖等手段,初步诊断是猪链球菌和蓝耳病病毒的混合感染,病猪感染本病早产和死胎率达30%、死亡率可达80%。通过... 安达市某猪场仔猪大批发病,病猪出现精神萎靡、呼吸困难、采食量下降、体温升高。为对该场病猪进行确诊,运用临床诊断和病理解剖等手段,初步诊断是猪链球菌和蓝耳病病毒的混合感染,病猪感染本病早产和死胎率达30%、死亡率可达80%。通过细菌学和PCR技术对放线杆菌、链球菌、猪瘟病毒、猪圆环病毒及蓝耳病病毒进行检测。发现血液琼脂培养基中出现针尖大小菌落,镜检为革兰氏阳性球菌,PCR检测蓝耳病病毒与链球菌为阳性,最终确诊为链球菌和蓝耳病病毒混合感染。通过对分离细菌进行药敏试验,结果显示,硫酸头孢喹肟、土霉素高度敏感。 展开更多
关键词 混合感染 蓝耳病病毒 PCR检测技术 猪链球菌
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应用原位杂交技术研究母源抗体对PRRS病毒在体内增殖的影响 被引量:1
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作者 任慧英 李文立 杨汉春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期372-374,共3页
挑选母源抗体阳性及母源抗体阴性仔猪各 2头 ,人工感染PRRSV ,感染后不同时间采集扁桃体、胸腺、脑、肺脏、肩前淋巴结、脾脏、肝脏等组织做成多聚甲醛固定、石蜡包埋的组织切片。应用针对PRRS病毒 (PRRSV)基因ORF6片段的特异性探针进... 挑选母源抗体阳性及母源抗体阴性仔猪各 2头 ,人工感染PRRSV ,感染后不同时间采集扁桃体、胸腺、脑、肺脏、肩前淋巴结、脾脏、肝脏等组织做成多聚甲醛固定、石蜡包埋的组织切片。应用针对PRRS病毒 (PRRSV)基因ORF6片段的特异性探针进行原位杂交检测 ,结果表明 ,2头母源抗体阴性猪的组织中均可检出病毒阳性信号 ,而 2头母源抗体阳性猪仅可在少数组织中检出病毒阳性信号。以上结果表明 。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征 母源抗体 人工感染 病毒增殖 原位杂交
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仔猪蓝耳病病毒与链球菌混合感染的诊断 被引量:3
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作者 李晓月 倪宏波 《现代畜牧兽医》 2017年第9期30-34,共5页
大庆某猪场仔猪突然发生呼吸困难、食欲减退或废绝、渐进性消瘦等临床症状,甚至引起仔猪死亡。其猪场仔猪发病率为70%,死亡率达30%以上,给猪场造成了一定的经济损失。本研究根据病畜临床症状观察及剖检和实验室技术,通过PCR检测,结果显... 大庆某猪场仔猪突然发生呼吸困难、食欲减退或废绝、渐进性消瘦等临床症状,甚至引起仔猪死亡。其猪场仔猪发病率为70%,死亡率达30%以上,给猪场造成了一定的经济损失。本研究根据病畜临床症状观察及剖检和实验室技术,通过PCR检测,结果显示为蓝耳病毒为核酸阳性条带;革兰氏染色、生化试验,及对小鼠致病性进行研究,结果显示为链球菌感染。最终确诊为猪普通蓝耳病毒与链球菌混合感染。 展开更多
关键词 蓝耳病毒 链球菌 混合感染 诊断
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Glycyrrhizic Acid-Loaded Poly-ɛ-Caprolactone Nanoparticles Decrease PRRSV Infection in MARC-145 Cells
6
作者 Samantha Jardon Oscar Escalona +4 位作者 Carlos Gerardo García David Quintanar Carlos Ignacio Soto María Zaida Urbán Susana Elisa Mendoza 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2023年第12期221-236,共16页
Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is an economically devastating disease with worldwide distribution caused by Betaarterivirus suid (PRRSV). The virion has great genetic and antigenic variability wi... Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is an economically devastating disease with worldwide distribution caused by Betaarterivirus suid (PRRSV). The virion has great genetic and antigenic variability with a marked increase in virulence. Vaccines tested to date have been of little use in controlling the problems caused by PRRSV, so the present study was conceived to evaluate the antiviral effect of polymeric nanoparticles (PNPs) made with glycyrrhizic acid (GA). Recent work has proven that this nanoparticle system is stable. These nanoparticles have good GA carrying capacity, a size < 250 nm, a spherical morphology, and a wide safety range. The integrity of cell morphology can be maintained for up to 72 h. The antiviral effect of this nanoparticle system was tested in cultures of MARC-145 cells in pre- and coinfection assays with PRRSV to evaluate changes in cell morphology and effects on cell viability. The use of PNPsGA with the real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) decreased viral infection by 38% in 3 amplification cycles. These results suggest that this system has an antiviral effect against PRRSV under the study conditions established. 展开更多
关键词 CYTOTOXICITY Glycyrrhizic Acid Cell Morphology Polymeric Nanoparticles prrs virus
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猪细环病毒1型感染与猪繁殖与呼吸综合征的相关性分析 被引量:2
7
作者 陈天慧 单晶晶 +3 位作者 王立娇 王俊 于红欣 周双海 《北京农学院学报》 2016年第3期63-66,共4页
【目的】分析猪细环病毒1型(TTSuV1)感染与猪繁殖与呼吸综合征(PPRS)的发生是否存在相关性。【方法】采集40头临床疑似PRRS病猪血清和40头同群健康猪血清,确认PRRS病猪与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)亚临床感染猪,用荧光定量PCR方法检... 【目的】分析猪细环病毒1型(TTSuV1)感染与猪繁殖与呼吸综合征(PPRS)的发生是否存在相关性。【方法】采集40头临床疑似PRRS病猪血清和40头同群健康猪血清,确认PRRS病猪与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)亚临床感染猪,用荧光定量PCR方法检测TTSuV1和PRRSV载量,进行差异比较和相关性分析。【结果】常规PCR结合荧光定量PCR检测确认有31头PRRS病猪和27头PPRSV亚临床感染猪,前者PRRSV载量极显著(P<0.01)高于后者;虽然PRRS病猪的TTSuV1载量高于PRRSV亚临床感染猪,但其差异不显著。PRRSV感染猪的血清中的TTSuV1载量与PRRSV载量之间无显著(P>0.05)相关性。【结论】TTSuV1感染与PRRS发生之间可能没有相关性。 展开更多
关键词 猪细环病毒1型 猪繁殖与呼吸综合征 荧光定量PCR 病毒载量 相关性
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第一章 PRRS病毒的历史简介 被引量:1
8
作者 郭传凤 J Zimmerman 《国外畜牧学(猪与禽)》 2012年第6期6-9,共4页
20世纪80年代末,美国报导了一起从未见过的猪病,1990年欧洲也出现类似的报导。 导致爆发该病的多种可能原因都得到了研究,包括脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCv)、古典猪瘟、猪细小病毒、肾脏钩端螺旋体bratislava... 20世纪80年代末,美国报导了一起从未见过的猪病,1990年欧洲也出现类似的报导。 导致爆发该病的多种可能原因都得到了研究,包括脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCv)、古典猪瘟、猪细小病毒、肾脏钩端螺旋体bratislava血清变型以及霉菌毒素。 展开更多
关键词 prrs病毒 简历 历史 脑心肌炎病毒 virus 猪细小病毒 钩端螺旋体 古典猪瘟
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表达PRRSVE基因重组质粒在小鼠诱导的体液免疫应答
9
作者 高云 杨汉春 +4 位作者 刘平黄 陈声 郭鑫 韩军 黄芳芳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第11期6-8,共3页
利用 PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株的 E基因进行修饰和改造 ,在 E基因上游加入 Kozak序列 ,扩增并克隆 E基因。将 E基因 c DNA亚克隆至真核表达载体 pc DNA3.1(+)中 ,构建了真核重组表达质粒 pc DNA- E。用pc DNA- ... 利用 PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株的 E基因进行修饰和改造 ,在 E基因上游加入 Kozak序列 ,扩增并克隆 E基因。将 E基因 c DNA亚克隆至真核表达载体 pc DNA3.1(+)中 ,构建了真核重组表达质粒 pc DNA- E。用pc DNA- E免疫小鼠 ,经免疫荧光抗体试验检测结果表明 ,重组质粒 pc DNA- E经 3次免疫后 ,所有小鼠血清抗体均为阳性 ,说明pc DNA- E在小鼠体内可诱导特异性的体液免疫应答反应。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 E基因 重组质粒 体液免疫应答 表达
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河南省某规模化猪场高致病性蓝耳病的诊断与防制 被引量:1
10
作者 甘忠琴 邱骏 夏宗军 《畜禽业》 2015年第9期4-7,共4页
通过临床症状、大体病理变化,流行调查及病毒分离和鉴定以及血清学检测,确定河南焦作某猪场发生的疫情为高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS),通过加强管理,提高环境温度并减小昼夜温差,提高营养水平;采取中西药结合的综合性治疗技术措施使育肥... 通过临床症状、大体病理变化,流行调查及病毒分离和鉴定以及血清学检测,确定河南焦作某猪场发生的疫情为高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS),通过加强管理,提高环境温度并减小昼夜温差,提高营养水平;采取中西药结合的综合性治疗技术措施使育肥猪成活率达到93.35%,保育猪成活率达到100%,取得显著的治疗效果。由此说明猪发病后及时诊断,尽快采取有效的防控措施是减少死亡的重要保证。 展开更多
关键词 高致病性猪蓝耳病 病毒 成活率
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猪蓝耳病阴性猪场野毒感染后处理的经济学思考
11
作者 饶明章 王连想 +2 位作者 邓素军 晁行周 陈燕珊 《广东畜牧兽医科技》 2023年第4期42-47,71,共7页
猪蓝耳病病毒变异快,且多种毒株并存,疫苗保护效果差。当前越来越多的种猪场完成了猪蓝耳病的净化工作,但净化后维持难度较大。该文报道猪蓝耳病阴性种猪场在日常监测中发现感染猪蓝耳病JXA1-like野毒株,通过采用紧急返饲的方法,并强化... 猪蓝耳病病毒变异快,且多种毒株并存,疫苗保护效果差。当前越来越多的种猪场完成了猪蓝耳病的净化工作,但净化后维持难度较大。该文报道猪蓝耳病阴性种猪场在日常监测中发现感染猪蓝耳病JXA1-like野毒株,通过采用紧急返饲的方法,并强化猪场生物安全、加强猪群中西药保健、提升猪群健康度等措施,能快速将本次发病控制下来。当猪蓝耳病阴性场转阳后如何处置,兽医需从经济学的角度去做防控和净化的决策。采用未来收益折算为净现值评估的方法,得出本次投入收益比为1∶3.3,说明本次通过返饲的处理方法是经济可行的。 展开更多
关键词 猪蓝耳病 野毒感染 返饲 经济学
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猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4ORF6基因的克隆与序列分析
12
作者 陈声 杨汉春 +2 位作者 郭鑫 高云 查振林 《动物医学进展》 CSCD 2001年第3期55-58,共4页
将猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)病毒 BJ- 4株在 HS.2 H细胞上增殖 ,经超速离心浓缩病毒。用 TRIZOL LS试剂提取病毒基因组 RNA后 ,用 RT- PCR方法特异性扩增 PRRS病毒 BJ- 4的 ORF6基因片段 ;经Sma 酶切鉴定正确后 ,将 PCR产物克隆到p GE... 将猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)病毒 BJ- 4株在 HS.2 H细胞上增殖 ,经超速离心浓缩病毒。用 TRIZOL LS试剂提取病毒基因组 RNA后 ,用 RT- PCR方法特异性扩增 PRRS病毒 BJ- 4的 ORF6基因片段 ;经Sma 酶切鉴定正确后 ,将 PCR产物克隆到p GEM- Teasy载体上 ,经 Amp/IPTG/X- Gal平板筛选、酶切鉴定和质粒 PCR鉴定 ,初步获得含 ORF6基因的阳性重组质粒 p GEM-T- ORF6。对重组质粒进行序列测定 ,并同美洲代表株 VR2 332和欧洲代表株 L V进行比较 ,结果表明 ,BJ- 4 ORF6与 VR2 332的ORF6差异较小 ,核苷酸和氨基酸同源性均为 99.43% ;而与 L V株的差异性较大 ,核苷酸同源性为 70 .6 % ,氨基酸同源性为 77.4% 展开更多
关键词 繁殖呼吸综合征病毒 ORF6基因 克隆 序列分析
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驴抗猪繁殖与呼吸综合征病毒IgG注射液的制备工艺及质量监控
13
作者 押宗保 李六金 +5 位作者 李明涛 朱秋侠 马国际 田宏雄 李勇 刘学通 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期127-129,共3页
用繁殖与呼吸障碍综合征病毒灭活抗原加佐剂接种关中驴 ,采用基础免疫和强化免疫程序 ,于接种后 9~ 1 1d采集其血浆 ,从中分离 ,提纯免疫球蛋白IgG。制备出抗PRRSV特异性的IgG注射液。对制备出的五批IgG注射液产品进行了血清中和试验 ... 用繁殖与呼吸障碍综合征病毒灭活抗原加佐剂接种关中驴 ,采用基础免疫和强化免疫程序 ,于接种后 9~ 1 1d采集其血浆 ,从中分离 ,提纯免疫球蛋白IgG。制备出抗PRRSV特异性的IgG注射液。对制备出的五批IgG注射液产品进行了血清中和试验 ,结果显示IgG抗体效价均达 1∶32 0以上 ,表明该法可以成功制备抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒免疫球蛋白IgG注射液 ,并对其制备工艺及质量监控进行了多次试验 ,结果显示该生物制剂制造的工艺流程重复性好 ,IgG获得率较理想 。 展开更多
关键词 繁殖与呼吸综合征病毒 IgG注射液 制备工艺 质量监控
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NMHC-ⅡA在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用
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作者 李红 刘成倩 +2 位作者 孙凤萍 高骏 易建中 《上海农业学报》 CSCD 2018年第2期71-75,共5页
借用PRRSV结构蛋白GP5的抗独特型抗体Mab2-5G2,提取并纯化非肌肉肌球蛋白重链IIA(NMHC-ⅡA);通过激光共聚焦技术定位NMHC-ⅡA在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的分布;并采用免疫共沉淀技术研究其与PRRSV受体CD163的相互作用。结果表明:NM... 借用PRRSV结构蛋白GP5的抗独特型抗体Mab2-5G2,提取并纯化非肌肉肌球蛋白重链IIA(NMHC-ⅡA);通过激光共聚焦技术定位NMHC-ⅡA在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的分布;并采用免疫共沉淀技术研究其与PRRSV受体CD163的相互作用。结果表明:NMHC-ⅡA在Marc-145细胞内的表达量随着细胞被病毒感染时间的延长而增加,当PRRSV完全进入细胞后,NMHC-ⅡA的表达量有所降低;NMHC-ⅡA与PRRS病毒受体CD163存在相互作用,作用位点在M1(20—259 aa)和M3(714—1 040 aa)上。试验证明,NMHC-ⅡA在PRRSV感染过程中可能起协同作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 非肌肉肌球蛋白重链ⅡA CD163 病毒
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猪繁殖和呼吸综合征病毒分离与鉴定 被引量:19
15
作者 姜平 简中友 +2 位作者 马志永 蔡家利 蔡宝祥 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期82-86,共5页
在对国内某地区7个患病猪群流行病学调查的基础上,用Marc145细胞培养从4个猪群流产胎儿分离到3株导致细胞病变的病毒———J1、J2和J3株。它们对氯仿和热(56℃,1h)、甲醛、酸、碱均敏感。病毒粒子呈球状,直... 在对国内某地区7个患病猪群流行病学调查的基础上,用Marc145细胞培养从4个猪群流产胎儿分离到3株导致细胞病变的病毒———J1、J2和J3株。它们对氯仿和热(56℃,1h)、甲醛、酸、碱均敏感。病毒粒子呈球状,直径30~80nm,负染后病毒粒子大小80~100nm,在Marc145细胞质内增殖,5溴2′脱氧尿核苷(BUDR)对其无抑制作用。结合血清学试验,鉴定3个毒株均为猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV),可能为美洲型PRRSV。 展开更多
关键词 猪病 分离 鉴定 prrs
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猪繁殖与呼吸综合征综合防控技术与应用 被引量:28
16
作者 周磊 杨汉春 +2 位作者 姜平 童光志 闫恒普 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期62-67,共6页
猪繁殖与呼吸综合征是严重影响生猪产业的经济性疫病之一,控制该病对于保障养猪生产稳定发展意义重大。本文概述了猪繁殖与呼吸综合征的控制技术,总结了近年来国家生猪产业技术体系在猪繁殖与呼吸综合征综合防控技术应用方面的工作成效。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 猪繁殖与呼吸综合征病毒 综合防控
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猪生殖-呼吸综合征病毒蛋白的结构与功能 被引量:11
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作者 仇华吉 周彦君 童光志 《动物医学进展》 CSCD 2000年第2期23-26,共4页
猪生殖 -呼吸道综合征 ( PRRS)病毒是新发现的 RNA病毒。其基因组有 8个开放阅读框架 ( ORF) ,ORF1编码病毒的RNA聚合酶 ,ORF2~ 7分别编码糖蛋白GP2~ 5、M蛋白和 N蛋白。本文概括了近几年来国际上对其病毒蛋白的研究成果 ,对这些病毒... 猪生殖 -呼吸道综合征 ( PRRS)病毒是新发现的 RNA病毒。其基因组有 8个开放阅读框架 ( ORF) ,ORF1编码病毒的RNA聚合酶 ,ORF2~ 7分别编码糖蛋白GP2~ 5、M蛋白和 N蛋白。本文概括了近几年来国际上对其病毒蛋白的研究成果 ,对这些病毒蛋白的结构。 展开更多
关键词 prrsV 病毒蛋白 结构 功能 ORF5基因
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PRRS病毒感染对猪细胞因子IL-2、IL-4和IL-10mRNA转录的影响 被引量:16
18
作者 郑洁 郭鑫 +3 位作者 杨汉春 王彬 陈艳红 查振林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期483-489,共7页
通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10m... 通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10mRNA转录的影响。结果表明猪Th1型细胞因子IL 2的mRNA转录水平分别在PRRS病毒感染后1d、28d和56d出现3个mRNA转录高峰;而Th2型细胞因子IL 4的mRNA转录水平在病毒感染后56d内,一直处于低水平,而后才逐渐升高;IL 10的mRNA转录水平在病毒感染后6d内,一直处于低水平状态,第6d后才逐渐上升,至42d到达高峰,而后下降,恢复正常。结果显示PRRS病毒感染可导致Th2型细胞因子IL 4和IL 10基因转录的抑制。 展开更多
关键词 prrs病毒感染 细胞因子 IL-2 IL-4 IL-10mRNA转录 影响因素 PCR技术 繁殖器官 呼吸道
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应用杆状病毒系统高效表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因 被引量:6
19
作者 周艳君 仇华吉 +5 位作者 王云峰 钱平 蔡雪晖 柴文君 翁长江 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期278-281,共4页
将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_la株囊膜糖蛋白 (GP5 )基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中 ,与杆状病毒线性DNA(Bac_N_BlueTMDNA)共转染昆虫细胞sf9,经过三轮蚀斑纯化后 ,获得重组杆状病毒rBac_GP5。用该重组病毒感染sf9细胞... 将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_la株囊膜糖蛋白 (GP5 )基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中 ,与杆状病毒线性DNA(Bac_N_BlueTMDNA)共转染昆虫细胞sf9,经过三轮蚀斑纯化后 ,获得重组杆状病毒rBac_GP5。用该重组病毒感染sf9细胞后 ,应用间接免疫荧光试验、SDS_PAGE和Westernblot检测表明 ,GP5基因在杆状病毒系统中获得了高效表达 ,表达产物因糖基化程度差异 ,表观分子量有 2 2、2 5和 30kDa三种总计约占细胞蛋白总量的 2 6 .4%。 展开更多
关键词 杆状病毒表达系统 GP5基因 prrs 重组疫苗
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南方三省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查研究 被引量:15
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作者 黄伟坚 卢桂娟 +5 位作者 陈樱 罗廷荣 刘芳 温荣辉 陆芹章 廖素环 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期150-154,共5页
根据VR2332和CH-1aE基因序列设计一对特异性引物,对广西、广东、海南三省15个猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株E基因进行RT-PCR扩增,将扩增出的668bp片段插入pMD18-T载体中,进行序列测定。结果显示,15个毒株的E基因核苷酸序列之间的相似性为8... 根据VR2332和CH-1aE基因序列设计一对特异性引物,对广西、广东、海南三省15个猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株E基因进行RT-PCR扩增,将扩增出的668bp片段插入pMD18-T载体中,进行序列测定。结果显示,15个毒株的E基因核苷酸序列之间的相似性为84.1%~100%,推导编码的氨基酸序列之间的相似性为81.1%~100%;与VR2332、CH-1a、LV株核苷酸之间的相似性分别为85.4%~98.5%、87.1%~96.2%、62.5%~63.8%,与VR2332、CH-1a、LV株氨基酸之间的相似性分别为83.1%~95.5%、86.1%~95.0%、51.7%~57.2%,表明15个毒株的E基因区域变异较大,均属美洲型。将15个流行毒株与国内外已发表的37株猪繁殖与呼吸综合征病毒相应序列进行比较,建立的遗传进化树表明这15个毒株分别属于3个亚群。推导编码氨基酸的比较结果表明,分别属于不同亚群的不同地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株在E基因编码蛋白的潜在糖基化位点数目、抗原表位区域和与毒力相关的氨基酸等均存在变异。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分子流行病学 变异
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