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Functional protein microarray: an ideal platform for investigating protein binding property 被引量:1
1
作者 Shu-Min ZHOU 《Frontiers in Biology》 CAS CSCD 2012年第4期336-349,共14页
Functional protein microarray is an important tool for high-throughput and large-scale systems biology studies. Besides the progresses that have been made for protein microarray fabrication, significant advancements h... Functional protein microarray is an important tool for high-throughput and large-scale systems biology studies. Besides the progresses that have been made for protein microarray fabrication, significant advancements have also been achieved for applying protein microarrays on determining a variety of protein biochemical activities. Among these applications, detection of protein binding properties, such as protein-protein interactions (PPIs), protein-DNA interactions (PDIs), protein-RNA interactions, and antigen-antibody interactions, are straightforward and have substantial impacts on many research fields. In this review, we will focus on the recent progresses in protein-protein, protein-DNA, protein-RNA, protein-small molecule, protein-lipid, protein-glycan, and antigen-antibody interactions. We will also discuss the challenges and future directions of protein microarray technologies. We strongly believe that protein microarrays will soon become an indispensible tool for both basic research and clinical applications. 展开更多
关键词 lectin microarray protein microarray protein-cell interaction protein-DNA interaction (PDI) protein-proteininteraction (PPI)
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国内英文科技期刊发展现状分析——以Protein & Cell为例 被引量:2
2
作者 郝宁 罗丽丰 张晓雪 《传播与版权》 2020年第10期11-15,共5页
文章以Protein&Cell期刊2010年—2018年度论文为例,对Web of Science数据库中的下载数据进行统计分析,从载文量、文献类型、国家/地区和机构、资金资助、期刊影响因子与期刊分区、引文量、高引用论文、引文国家/地区、引文机构、引... 文章以Protein&Cell期刊2010年—2018年度论文为例,对Web of Science数据库中的下载数据进行统计分析,从载文量、文献类型、国家/地区和机构、资金资助、期刊影响因子与期刊分区、引文量、高引用论文、引文国家/地区、引文机构、引文来源出版物和引文研究方向等方面开展文献计量统计分析。通过研究发现,Protein&Cell期刊近9年来的文章被引频次、影响因子、期刊排序和期刊分区呈现递增趋势,尤其影响因子在近3年呈现稳步上涨态势。我们从Protein&Cell期刊发文和引文的国别与机构等数据可以看出该刊的国际化程度较低。Protein&Cell需要进一步提升国际影响力,这也是目前国内大部分英文科技期刊亟须解决的问题。 展开更多
关键词 protein&cell Web of Science 文献计量分析 引文分析
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以学术期刊为桥弘扬学科历史与学术文化
3
作者 张晓雪 《传播力研究》 2018年第16期21-22,共2页
长久以来,学术期刊都是以传播、交流、积累学术成果为核心使命。由高等教育出版社联合主办的期刊Protein&Cell大胆尝试了以学术期刊为桥,向当代科研工作人员弘扬我国生命科学的历史,向全世界展示中国生命科学的学科文化,取得了较好... 长久以来,学术期刊都是以传播、交流、积累学术成果为核心使命。由高等教育出版社联合主办的期刊Protein&Cell大胆尝试了以学术期刊为桥,向当代科研工作人员弘扬我国生命科学的历史,向全世界展示中国生命科学的学科文化,取得了较好的社会效益。 展开更多
关键词 学术期刊 protein&cell RECOLLECTION 学科历史 学术文化
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周围型肺癌CT征象与p53蛋白及增殖细胞核抗原表达间关系的研究 被引量:30
4
作者 陈江浩 张洪新 +3 位作者 黄学胜 王执民 刘锟 白建军 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期361-364,共4页
目的研究周围型肺癌CT征象与p53蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)表达间的关系。方法运用SP免疫组化法,检测32例经病理证实的周围型肺癌组织中p53蛋白及PCNA的表达,并回顾性分析其与术前CT征象间的关系。结果p5... 目的研究周围型肺癌CT征象与p53蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)表达间的关系。方法运用SP免疫组化法,检测32例经病理证实的周围型肺癌组织中p53蛋白及PCNA的表达,并回顾性分析其与术前CT征象间的关系。结果p53蛋白、PCNA表达与瘤体大小、深分叶征、空洞、胸膜凹陷征、纵隔淋巴结转移有关,与毛刺征无关。结论周围型肺癌CT征象中,瘤体直径>3cm,或出现深分叶征、空洞、胸膜凹陷征、纵隔淋巴结转移者,具有相对更高的恶性程度,肿瘤细胞的增殖更为活跃。 展开更多
关键词 肺肿瘤 病理学 CT P53蛋白 增殖细胞核抗原
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香菇C_(91-3)菌丝发酵液蛋白抑制小鼠宫颈癌细胞株U14生长及诱导凋亡的实验研究 被引量:21
5
作者 戴兵 黄敏 +1 位作者 宁安红 高鹏 《浙江医学》 CAS 2004年第9期656-658,共3页
目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白LFP91-3对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用。方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法LFP91-3浓度5、10、15μgml和流式... 目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白LFP91-3对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用。方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法LFP91-3浓度5、10、15μgml和流式细胞仪对经LFP91-3作用的U14进行观察和检测。结果LFP91-3能明显延长U14所致荷瘤小鼠的生存期。对体外培养的U14有直接杀伤作用,抑制率随LFP91-3浓度的增加和作用时间的延长而升高。流式细胞仪检测结果显示LFP91-3阻滞U14于细胞周期的分裂中期。结论LFP91-3能抑制小鼠宫颈癌细胞株的生长并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 香菇C91-3菌丝发酵液蛋白 小鼠 宫颈癌 肿瘤细胞 U14细胞 细胞生长 细胞凋亡
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补肾中药对雄激素致不孕大鼠卵巢核仁组成区蛋白的影响 被引量:12
6
作者 魏美娟 俞瑾 《上海医科大学学报》 CSCD 1996年第6期451-453,共3页
观察补肾中药对雄激素致不孕大鼠卵巢核仁组成区蛋白的影响。用SD雌性大鼠幼仔,出生9d龄注射丙酸睾丸酮,制成雄激素致不孕大鼠(ASR)模型。80d龄灌服补肾中药水溶液两周。100d龄心脏灌注处死。以核仁组成区蛋白嗜银染... 观察补肾中药对雄激素致不孕大鼠卵巢核仁组成区蛋白的影响。用SD雌性大鼠幼仔,出生9d龄注射丙酸睾丸酮,制成雄激素致不孕大鼠(ASR)模型。80d龄灌服补肾中药水溶液两周。100d龄心脏灌注处死。以核仁组成区蛋白嗜银染色(AgNOR)和增殖细胞核杭原(PcNA)为指标,观察卵巢颗粒细胞、间质腺细胞的形态学变化。结果:补肾中药能够使ASR卵巢颗粒细胞增殖、卵泡发育。治疗组的AgNOR和PcNA计数明显高于模型组,而与对照组之间无显著差异。结论:补肾中药的这种作用可能是通过调节了下丘脑-垂体-卵巢性腺功能的结果,从而促使卵巢颗粒细胞发育、卵泡成熟。 展开更多
关键词 中药 补肾中药 女性不育症 卵巢 AGNOR染色
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SARS病毒M蛋白的二级结构和B细胞表位预测 被引量:6
7
作者 吕燕波 万瑛 吴玉章 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第6期41-45,共5页
以SARS病毒基因组序列为基础 ,采用Garnier Robson方法、Chou Fasman方法和Karplus Schulz方法预测蛋白质的二级结构 ;按Kyte Doolittle方案、Emini方案和Jameson Wolf方案预测SARS病毒M蛋白的B细胞表位。预测结果表明 ,在SARS病毒M蛋... 以SARS病毒基因组序列为基础 ,采用Garnier Robson方法、Chou Fasman方法和Karplus Schulz方法预测蛋白质的二级结构 ;按Kyte Doolittle方案、Emini方案和Jameson Wolf方案预测SARS病毒M蛋白的B细胞表位。预测结果表明 ,在SARS病毒M蛋白N 端第 1 1~ 2 0、2 7~ 36区段和第 1 33~ 1 41区段可能是α 螺旋中心 ;M蛋白分子N 端第 2 0~ 2 7、34~ 37,44~ 5 6,61~ 64,70~ 76,79~ 97,1 1 7~ 1 32 ,1 42~ 1 47,1 65~ 1 76区段和第 2 1 6~ 2 2 1区段可能是β 折叠中心。在M蛋白N 端第 5~ 6、40~ 44、1 0 5~ 1 0 7、1 1 2~ 1 1 6、1 89~ 1 90、2 0 2~ 2 0 3区段和第 2 1 0~ 2 1 5区段具有较柔软的结构 ,有可能进行一定幅度的摆动或折叠而形成较复杂的三级结构。SARS病毒M蛋白N 端第 1~ 1 5、37~ 47、99~ 1 2 0、1 81~ 1 92区段和第 1 96~ 2 1 5区段内或附近很可能是B细胞表位优势区域。以蛋白质的二级结构预测作为辅助手段 ,用抗原指数 ,亲水性参数和可及性参数预测SARS冠状病毒M蛋白的B细胞表位 。 展开更多
关键词 SARS病毒 M蛋白 二级结构 B细胞表位
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重组人骨形成蛋白2诱导的骨膜细胞构建组织工程骨的实验研究 被引量:9
8
作者 张超 胡蕴玉 +3 位作者 熊卓 张曙明 颜永年 崔福斋 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期100-104,共5页
目的 通过组织工程技术方法 ,研究细胞 -材料复合体体内骨再生的能力。 方法 采用材料学自组装技术的原理 ,以 I型胶原蛋白为分子模板 ,引导钙磷盐在液相中的矿化 ,制备具有天然骨基质层状结构的羟基磷灰石 /胶原复合材料 ,并以热致... 目的 通过组织工程技术方法 ,研究细胞 -材料复合体体内骨再生的能力。 方法 采用材料学自组装技术的原理 ,以 I型胶原蛋白为分子模板 ,引导钙磷盐在液相中的矿化 ,制备具有天然骨基质层状结构的羟基磷灰石 /胶原复合材料 ,并以热致分相法制备羟基磷灰石 /胶原 -聚乳酸 [hydroxyapatite/collagen- poly- (L- lactic acid) ,HAC-PL A]复合三维多孔框架 ,与重组人骨形成蛋白 2 (recombinant human bone morphogenetic protein2 ,rh BMP- 2 )诱导分化后的兔骨膜细胞构建组织工程骨 ,进行体外电镜及组织学观察。将 3月龄裸鼠 18只 ,分为 3组 ,每组 6只。A组皮下注射经 rh BMP- 2处理后的骨膜细胞悬液 ,B组植入未复合细胞的 HAC- PL A,C组植入 rh BMP- 2处理后的细胞 -材料复合体。术后 8周取材行组织学观察 ,C组与 B组及 A组进行比较。 结果 三维多孔 HAC- PL A框架材料孔隙率大于 90 % ,孔径为 5 0~ 30 0 μm。骨膜细胞经 5 0 0 ng/ml的 rh BMP- 2处理后 ,与改善亲水性后的 HAC- PL A三维多孔框架复合 ,构建组织工程骨。电镜显示接种的细胞能在此组织工程骨内部生长增殖 ,术后 8周 C组有新骨形成 ,A组注射部位表面平整 ,无新生物 ,B组为纤维组织 ,无骨及软骨形成。 结论 所构建的组织工程骨有望成? 展开更多
关键词 组织工程骨 骨膜细胞 rhBMP-2 HAC 重组人骨形成蛋白2 植入 电镜 软骨形成 构建 自组装技术
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丝蛋白纤维生物材料与组织工程 被引量:5
9
作者 黄建坤 李敏 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第2期127-130,共4页
目的 介绍并综合分析丝蛋白纤维生物材料的研究进展及其在组织工程中的应用。 方法 广泛查阅国外近期关于丝蛋白纤维生物材料的研究文献 ,着重分析丝蛋白纤维生物材料的特性及可能的应用。 结果 丝蛋白纤维不仅与天然胶原一样起支... 目的 介绍并综合分析丝蛋白纤维生物材料的研究进展及其在组织工程中的应用。 方法 广泛查阅国外近期关于丝蛋白纤维生物材料的研究文献 ,着重分析丝蛋白纤维生物材料的特性及可能的应用。 结果 丝蛋白纤维不仅与天然胶原一样起支持细胞黏附、分化和生长的作用 ,而且是生物相容性良好的、具有独特机械特性并能在较长时间内缓慢降解的一类新型生物材料。 结论 丝蛋白纤维生物材料可以作为体外细胞培养的合适基质 ,并在组织工程中有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 丝蛋白纤维 生物材料 组织工程 细胞黏附 细胞生长
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吉兰-巴雷综合征 被引量:4
10
作者 郭军红 庞效敏 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期924-931,共8页
吉兰-巴雷综合征(GBS)是一种相对少见,但可危及患者性命的累及周围神经和神经根的免疫介导性疾病,常由感染诱发。其临床特征为急性起病的对称性迟缓性瘫痪,部分患者可出现呼吸衰竭,很多伴有自主神经功能损害。通常可根据临床症状作出诊... 吉兰-巴雷综合征(GBS)是一种相对少见,但可危及患者性命的累及周围神经和神经根的免疫介导性疾病,常由感染诱发。其临床特征为急性起病的对称性迟缓性瘫痪,部分患者可出现呼吸衰竭,很多伴有自主神经功能损害。通常可根据临床症状作出诊断,腰椎穿刺和电生理检查可协助诊断,并帮助进行亚型分类。目前较公认的关于GBS的发病机制为分子模拟学说,即病原微生物诱导产生针对神经节苷脂的交叉抗体。GBS的治疗方案为静脉注射免疫球蛋白或血浆置换以及一般的临床治疗。多数患者预后良好,数周至数月基本恢复,少数患者遗留持久神经功能障碍甚至死亡。 展开更多
关键词 吉兰-巴雷综合征 周围神经病 神经节苷脂 蛋白-细胞分离
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对格林-巴利综合征的再认识 被引量:6
11
作者 李杨 郭虎 郑帼 《中华全科医学》 2015年第2期199-201,共3页
目的格林-巴利综合征是儿童时期较常见的周围神经系统疾病之一,早期诊断与治疗有助于疾病恢复,现回顾分析病例与文献,提高对格林-巴利综合征诊断与治疗的认识,以便早期诊断与合理治疗。方法回顾分析2006年1月—2012年6月46例格林-巴利... 目的格林-巴利综合征是儿童时期较常见的周围神经系统疾病之一,早期诊断与治疗有助于疾病恢复,现回顾分析病例与文献,提高对格林-巴利综合征诊断与治疗的认识,以便早期诊断与合理治疗。方法回顾分析2006年1月—2012年6月46例格林-巴利综合征的临床资料、实验室检查、预后资料,根据起病时的主要表现,分为4组,分别为双下肢无力组、共济失调组、外展神经麻痹组、感觉异常组,其中双下肢无力组37例均予以丙种球蛋白治疗[400 mg/(kg·d),5 d为1疗程],共济失调组6例中3例予以丙种球蛋白治疗[400 mg/(kg·d),5 d为1疗程]、3例予以地塞米松治疗[0.25 mg/(kg·d),治疗10 d],外展神经麻痹组2例均予以地塞米松治疗(0.25 mg/(kg·d),治疗10 d],感觉异常组1例予以甲钴胺0.5 mg/(kg·d)和神经节苷脂20 mg/(kg·d)治疗2周,观察治疗效果,并结合国内外报道,探讨对格林-巴利综合征的再认识。结果双下肢无力组以双下肢乏力起病37例,其中35例伴有脑脊液蛋白-细胞分离;共济失调组以共济失调起病6例,指鼻不准、行走不稳,膝腱反射消失;外展神经麻痹组以孤立眼球外展受限起病2例,膝腱反射正常,四肢电生理正常,脑脊液正常;感觉异常组以感觉异常起病1例,双下肢麻木,膝腱反射减弱,电生理示感觉神经损害。结论格林-巴利综合征多以双下肢乏力起病,少数以共济失调、眼球外展受限、感觉异常起病,多伴有脑脊液蛋白-细胞分离、电生理周围神经损害表现,少数脑脊液细胞蛋白正常、电生理检查正常,孤立外展神经麻痹是格林-巴利综合征局部变异型。 展开更多
关键词 格林-巴利综合征 共济失调 肌肉麻痹 脑脊液蛋白-细胞分离
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Effect of senescence marker protein 30 on the proliferation and apoptosis of human lens epithelial cells SRA01/04 被引量:4
12
作者 Xi Chen Song-Man Li +2 位作者 Yan-Wei Li Zi-Hao Han Hao Liang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2018年第4期553-558,共6页
AIM: To study the effect of senescence marker protein 30(SMP30) on the proliferation and apoptosis of human lens epithelial cell(HLEC) SRA01/04.METHODS: SMP30 overexpression(OE) and knock down(KD) type cell ... AIM: To study the effect of senescence marker protein 30(SMP30) on the proliferation and apoptosis of human lens epithelial cell(HLEC) SRA01/04.METHODS: SMP30 overexpression(OE) and knock down(KD) type cell lines were cultivated by using two groups regucalcin(RGN; SMP30) lentiviral vectors(LVRGN, LV-RGN-RNAi) and the respective negative control virus infect SRA01/04 cells. Western blot and real-time quantitative polymerase chain reaction(q-PCR) analysis were used to determine RGN overexpression and knock down efficiency. We use cell counting kit-8(CCK8) assay to measure cell viability and 5-bromodeoxyuridine(Brd U) assay to test cell proliferation. Cell cycle was measured by PI FACS assay and cell apoptosis was tested by Annexin V-APC assay through flow cytometry. We use Western blot to measure the content of caspase-3 in SRA01/04.RESULTS: We used PCR and Western blot techniques to determine the successful transfection of SMP30 OE and KD SRA01/04 cell lines. By CCK8, Brdu and PI FACS cell cycle assay, it was found that the SMP30 OE group promoted cell proliferation(P〈0.05) compared with the control group, and the KD group inhibited cell proliferation(P〈0.05). The results of Annexin V-APC signal staining detection indicated that compared with respective control group, the cell apoptosis rate was higher in KD group(P〈0.05) but lower in OE group(P〈0.01). The expression of caspase-3 was down-regulated in OE group through Western blot assay and up-regulated in KD group compared with respective control group. CONCLUSION: Proliferation of SRA01/04 was promoted by SMP30 OE and apoptosis was suppressed. Increasing the expression of SMP30 may protect HLEC SRA01/04 against apoptosis in cataract. 展开更多
关键词 senescence marker protein 30 cell proliferation apoptosis human lens epithelial cell SRA01/04
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口腔鳞癌和癌前病变中微小染色体维持蛋白7和细胞分裂周期蛋白6的表达研究 被引量:5
13
作者 李蕙君 路晓薇 +3 位作者 李春阳 赖英荣 冯崇锦 廖贵清 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2010年第3期9-12,共4页
目的探讨微小染色体维持蛋白7(Mcm7)和细胞分裂周期蛋白6(Cdc6)在口腔鳞癌(OSCC)和癌前病变中的表达及临床意义。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化方法分别检测47例冰冻标本、98例石蜡标本中Mcm7和Cdc6的mRNA及蛋白表达水... 目的探讨微小染色体维持蛋白7(Mcm7)和细胞分裂周期蛋白6(Cdc6)在口腔鳞癌(OSCC)和癌前病变中的表达及临床意义。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化方法分别检测47例冰冻标本、98例石蜡标本中Mcm7和Cdc6的mRNA及蛋白表达水平,分析其表达与病理分级、临床分期及淋巴结转移等因素之间的相关性。结果 RT-PCR结果显示Mcm7 mRNA在口腔正常黏膜、癌前病变以及OSCC组织中均有阳性表达,各组之间相对表达量差异有统计学意义(P<0.01)。Cdc6 mRNA在正常黏膜中鲜有表达,癌前病变组与OSCC组均有阳性表达,各组之间相对表达量差异亦有统计学意义(P<0.01)。免疫组化结果显示Mcm7蛋白在口腔正常黏膜、癌前病变以及OSCC组织中均有阳性表达,其阳性标记指数分别为3.6%、22.3%和45.9%,各组之间阳性标记指数差异有统计学意义(P<0.01)。OSCC组Mcm7蛋白表达阳性指数高于癌前病变组(P<0.01)。Cdc6蛋白在以上标本中的阳性表达总体较Mcm7低,在正常口腔黏膜中鲜有表达,癌前病变以及OSCC组织中均有阳性表达。各组之间阳性标记指数差异有统计学意义(P<0.01)。Mcm7和Cdc6在有淋巴结转移组其阳性标记指数高于无转移组(P<0.01)。结论 Mcm7和Cdc6的高表达与口腔癌发生及转移有相关性。检测OSCC组织中Mcm7和Cdc6的表达有望成为其早期诊断与判断预后的分子指标之一。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 癌前病变 微小染色体维持蛋白7 细胞分裂周期蛋白6 反转录聚合酶链反应 免疫组织化学
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过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后血清嗜酸性细胞阳离子蛋白浓度的变化 被引量:5
14
作者 刘文艳 汪杏巧 《医学理论与实践》 1999年第12期702-704,共3页
分别测定发作期及缓解期过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后血清嗜酸性粒细胞(EOS)计数、血清嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、免疫球蛋白(IgE、IgA、IgM、IgG)含量及肺功能的变化。结果发现:发作期过敏性哮喘患者血EOS、ECP、IgG均明显高... 分别测定发作期及缓解期过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后血清嗜酸性粒细胞(EOS)计数、血清嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、免疫球蛋白(IgE、IgA、IgM、IgG)含量及肺功能的变化。结果发现:发作期过敏性哮喘患者血EOS、ECP、IgG均明显高于缓解期过敏性哮喘患者和正常健康者(均为P<0.01),发作期及缓解期过敏性哮喘患者治疗前后血EOS、ECP和肺功能(FEV_1、PEFR)均有显著或非常显著性(P<0.05或P<0.01),缓解期过敏性哮喘患者IgA、IgG和IgM浓度较正常健康人明显下降。结论:血清EOS数量与气道高反应性有密切关系,并可作为气道炎症监测及治疗指标。 展开更多
关键词 哮喘 新型免疫疗法 嗜酸性粒细胞 ECP 治疗
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鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫细胞/杆状病毒系统中的表达 被引量:2
15
作者 韩宗玺 刘胜旺 +1 位作者 孔宪刚 冉多良 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第4期59-62,共4页
将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正... 将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正确克隆到载体的预期位点。将纯化的pMelBacBChIL 1 8质粒与杆状病毒DNA(Bac N BlueTM DNA)共转染sf9昆虫细胞 ,经四轮蓝斑筛选纯化 ,获得了重组杆状病毒 ,命名为rBaculovirusChIL 1 8。提取病毒染色体DNA ,经ChIL 1 8特异引物和重组杆状病毒特异引物PCR鉴定 ,证明获得了纯化的重组杆状病毒。用该重组病毒接种sf9昆虫细胞 ,收获接种后不同时间的细胞进行SDS PAGE电泳。结果表明ChIL 1 8基因在昆虫细胞中获得了表达 ,表达的重组蛋白分子量约为 2 3kDa。应用在大肠杆菌原核表达系统中表达的重组蛋白制备的兔抗ChIL 1 8多克隆抗体进行Westernblot分析 ,表明本研究真核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白和前期原核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白均具有生物学活性。 展开更多
关键词 ChIL-18 鸡白细胞介素18 成熟蛋白 昆虫细胞/杆状病毒系统 表达 生物学活性
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接触室内煤烟污染的肺癌患者血清中细胞生长调控蛋白的研究 被引量:4
16
作者 李健学 李学明 +4 位作者 全笑江 邢辉 刘鸿君 方清明 徐坤 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期92-94,共3页
为了研究接触室内煤烟污染的肺癌患者的发病机制,我们采用酶连免疫斑点法检测了接触室内煤烟的19例肺癌患者(A组)、22例未患肺癌者(B组)和19例不接触煤烟的未患肺癌者(C组)血清中7种细胞生长调控基因编码的蛋白。结果... 为了研究接触室内煤烟污染的肺癌患者的发病机制,我们采用酶连免疫斑点法检测了接触室内煤烟的19例肺癌患者(A组)、22例未患肺癌者(B组)和19例不接触煤烟的未患肺癌者(C组)血清中7种细胞生长调控基因编码的蛋白。结果表明,A组ras、p53和neu蛋白含量明显高于B、C组,差异有显著性(P<0.05)或极显著性(P<0.01);A组的阳性样品数为ras蛋白6例(其中2例为强阳性,p53、neu和jun蛋白各3例,p16蛋白1例;B组的阳性样品数为ras蛋白2例,p16蛋白1例。提示血清中细胞生长调控蛋白可作为环境相关肺癌的生物标志。 展开更多
关键词 空气污染 肺肿瘤 细胞生长 调控基因 编码蛋白
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bcl-2蛋白对T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用 被引量:2
17
作者 陈协群 王文亮 +1 位作者 黄高升 王成济 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第10期538-540,共3页
为探讨bcl-2蛋白对足叶乙甙触发T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用,采用脂质体Lipofectin法,将bcl-2基因逆转录病毒载体转入人T淋巴细胞白血病细胞株CEM中,并使其稳定、高效地表达。结果,... 为探讨bcl-2蛋白对足叶乙甙触发T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用,采用脂质体Lipofectin法,将bcl-2基因逆转录病毒载体转入人T淋巴细胞白血病细胞株CEM中,并使其稳定、高效地表达。结果,经足叶乙甙处理后,高表达bcl-2蛋白的CEM细胞产生梯状DNA的量低于对照(P<0.05)。这表明高水平bcl-2蛋白对白血病细胞程序性死亡过程可能具有较强的抑制效应。 展开更多
关键词 BCL-2蛋白 白血病 细胞株 T淋巴细胞
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Human DNA oncogenic viruses and their transforming protein interactions with cell cycle control proteins 被引量:2
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作者 程越 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期4+6+8-9,5+7,共6页
Purpose Both oncogenic viruses and cell cycle control proteins are fast growth research areas. More and more evidence indicates that virus infection and replication are often associated with apoptosis and interfer... Purpose Both oncogenic viruses and cell cycle control proteins are fast growth research areas. More and more evidence indicates that virus infection and replication are often associated with apoptosis and interfere with cell cycle pathways. To understand the mechanisms by which viral proteins regulate apoptosis and target the cellular pathways may lead to the development of new remedies for some cancers.Data sources English literature searched by MEDLINE from January 1995 to August 1998.Study selection and data extraction More than one hundred research papers published in these areas over the past three years. Only new and important breakthroughs in these papers are selected. The review focuses on DNA viruses associated with the development of human cancers.Results and conclusions Some DNA viruses contain oncogenic proteins which transform normal cells in vitro and induce tumors in animals. These viral proteins target the cellular pathways and block apoptosis induced by receptors or in response to signal transduction. Viral interference with host cell apoptosis leads to enhanced viral replication and may promote carcinogenesis. Oncogenes and tumor suppressor genes, such as Retinoblastoma (RB) and p53, play important roles in regulation of these interactions. 展开更多
关键词 DNA oncogenic viruses transforming protein cell cycle control
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丙型肝炎病毒H株包膜蛋白在昆虫细胞中的表达及意义 被引量:2
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作者 汤丽霞 徐志凯 +3 位作者 付莉 李光玉 任君萍 尹文 《华西医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期179-182,共4页
目的 获得丙型肝炎病毒 (HCV) H株包膜糖蛋白的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2 ,并初步应用于丙型肝炎患者血清抗体的检测。方法 用 PCR方法自 HCV H株扩增出包膜蛋白 E基因 ,构建重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞... 目的 获得丙型肝炎病毒 (HCV) H株包膜糖蛋白的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2 ,并初步应用于丙型肝炎患者血清抗体的检测。方法 用 PCR方法自 HCV H株扩增出包膜蛋白 E基因 ,构建重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2。免疫荧光及 Western blot方法鉴定表达产物。用表达的 E1和 E2蛋白与 35例丙型肝炎患者血清反应。结果 昆虫细胞中表达的 E蛋白呈现 3种分子大小 ,E1的相对分子量为 2 1× 10 3和 33× 10 3 ,E2的相对分子量为 6 0× 10 3。在 35份感染者血清中 ,有 4例 E1抗体阳性 ,其中 1例检出 E2抗体。在 9例 PCR检测 HCV RNA阳性而抗 HCV检测阴性的血清中 ,有 3例血清与表达的 E蛋白反应。结论  HCV E蛋白基因可在昆虫细胞中稳定表达 ,表达的 E1和 E2蛋白可用于 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 结构基因 昆虫细胞 HCV疫苗 H株包膜蛋白
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人血清白蛋白与促红细胞生成素融合蛋白的构建及表达 被引量:3
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作者 黄迎春 苟兴华 +3 位作者 韩蕾 李德华 赵兰英 吴洽庆 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期317-321,共5页
目的构建重组人血清白蛋白促红细胞生成素融合蛋白(HSA-EPO)表达载体,用CHO细胞表达该重组蛋白。方法 PCR扩增出人血清白蛋白基因(HSA)和促红细胞生成素基因(EPO);合成编码多肽GS(GGGGS)3的DNA片段作为接头(Linker),采用重叠PCR的方法将... 目的构建重组人血清白蛋白促红细胞生成素融合蛋白(HSA-EPO)表达载体,用CHO细胞表达该重组蛋白。方法 PCR扩增出人血清白蛋白基因(HSA)和促红细胞生成素基因(EPO);合成编码多肽GS(GGGGS)3的DNA片段作为接头(Linker),采用重叠PCR的方法将Linker与EPO基因拼接成LEPO基因。HSA与LEPO基因通过BamHⅠ酶切位点相连成HSA-EPO融合基因;将该融合基因插入表达载体pCI-neo构建为表达质粒pCI-HLE。脂质体转染CHO细胞,以G418抗性筛选转染细胞。用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞,以ELISA方法检测被转染CHO细胞表达情况。结果酶切及测序结果证实pCI-HLE构建成功。PCR检测表明融合基因已转入CHO细胞;Western blot结果表明融合基因成功表达,并具有EPO免疫原性。ELISA测活显示融合蛋白体外活性在86~637 IU/(mL.106.72 h)之间。结论 pCI-HLE真核表达载体可以在CHO细胞中成功表达具有EPO免疫原性的HSA-EPO融合蛋白,为开发长效EPO奠定基础。 展开更多
关键词 血清白蛋白 促红细胞生成素 融合蛋白 CHO细胞
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