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MALDI-TOF-MS鉴定生物脱氮细菌的方法研究 被引量：4
1
作者 徐昕荣 朱斌 +2 位作者 马瑜璐 向弘 陈丽凤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期148-150,161,共4页
采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法... 采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法的重现性进行了研究。建立了一种快速的细菌蛋白质质量指纹图谱鉴定方法。结果显示:该方法灵敏度高,且分析过程简单快速,具有广泛的开发和应用意义。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离质谱 蛋白质质量指纹图谱 细菌 鉴定
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MALDI-TOF-MS鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌的方法研究 被引量：3
2
作者 黄迎波 周慧平 +4 位作者 莫瑾 谭建锡 彭梓 朱金国 唐连飞 《植物检疫》 北大核心 2014年第6期54-58,共5页
利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌(Pseudomonas fuscovaginae)标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析,将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较,... 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌(Pseudomonas fuscovaginae)标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析,将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较,筛选出最佳实验方法,收集20张参考图谱与水稻常见病原细菌质谱峰进行比较,建立该病菌的蛋白质指纹图谱。结果显示用金氏B培养基分离纯化后经提取处理法进行MALDI-TOF-MS分析为最佳的实验方法。该方法对检测与鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌具有较高的灵敏度和重复性,且分析过程简单快速,有一定的应用价值。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 蛋白质指纹图谱 水稻细菌性叶鞘褐腐病菌 鉴定
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红细胞生长刺激蛋白二硫键定位连接方式的测定
3
作者 桑志红 薛燕 +5 位作者 赵永强 刘炳玉 王鸿丽 李萍 杨松成 何昆 《生物技术通讯》 CAS 2011年第5期700-704,共5页
目的:建立红细胞生长刺激蛋白(ESP)的二硫键连接方式的测定方法。方法:先将红细胞生长刺激蛋白的糖链用糖苷酶切除,再分别对ESP和还原烷基化后ESP用胰蛋白酶进行酶切,然后用MALDI-TOF测得该蛋白质的肽质量指纹图谱,通过比较还原烷基化... 目的:建立红细胞生长刺激蛋白(ESP)的二硫键连接方式的测定方法。方法:先将红细胞生长刺激蛋白的糖链用糖苷酶切除,再分别对ESP和还原烷基化后ESP用胰蛋白酶进行酶切,然后用MALDI-TOF测得该蛋白质的肽质量指纹图谱,通过比较还原烷基化前后各肽质量指纹图谱,找到差异肽段的分子离子峰[M+H]+,通过比对该蛋白理论酶切肽的[M+H]+,确定二硫键的连接方式。结果:ESP有4个半胱氨酸,通过比较还原烷基化前后的肽质量指纹图谱定位二硫键的位置为Cys7-Cys161和Cys29-Cys33,与理论上的二硫键连接相符。结论:建立了酶切结合质谱法测定蛋白质二硫键定位的方法,为今后生物技术产品的二硫键连接方式的质量控制提供了有效的方法。 展开更多
关键词 红细胞生长刺激蛋白 基质辅助激光解吸附电离质谱 肽质量指纹图谱 二硫键
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大炎肽在胰腺中相互作用蛋白的纯化鉴定
4
作者 赵燕英 陈正望 陆婕 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期568-571,共4页
为研究大炎肽影响胰腺β细胞的机制,将大炎肽偶联到CNBr活化的Sepharose 4B亲和层析介质上,利用亲和纯化的方法垂钓其在胰腺组织中的相互作用蛋白,并对纯化蛋白进行胰蛋白酶水解,测定水解片段的分子质量和其中2个片段的氨基酸序列,在MAS... 为研究大炎肽影响胰腺β细胞的机制,将大炎肽偶联到CNBr活化的Sepharose 4B亲和层析介质上,利用亲和纯化的方法垂钓其在胰腺组织中的相互作用蛋白,并对纯化蛋白进行胰蛋白酶水解,测定水解片段的分子质量和其中2个片段的氨基酸序列,在MASCOT数据库中检索,鉴定此蛋白为胱硫醚β-合成酶,结果提示大炎肽可能通过结合胱硫醚β-合成酶,调节其活性,造成同型半胱氨酸积累。 展开更多
关键词 大炎肽 胱硫醚Β-合成酶 结合蛋白 同型半胱氨酸 胰腺 胰蛋白酶 肽指纹图谱
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