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结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c蛋白融合表达与血清学评价
被引量：
4
1
作者
胡永亮
孙卫国
+1 位作者
张灵霞
梁晓博
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期1-4,10,共5页
目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表...
目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表达载体pET-24b中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化,通过ELISA检测100份确诊结核病人、20例非结核呼吸疾病患者、100份健康人血清,评价融合蛋白进行临床血清学诊断的可行性。结果 Rv3425-Rv1168c融合蛋白在原核系统内获得高表达,纯化的融合蛋白经ELISA方法测定,在血清学实验中敏感性为54%,特异性为95%。结论 Rv3425-Rv1168c融合蛋白具有较高的抗原特异性和免疫原性,在结核病血清学诊断方面具有很大的应用价值。
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关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
rv
1168c蛋白
血清学诊断
下载PDF
职称材料
结核分枝杆菌Rv3425蛋白原核可溶性表达
被引量：
3
2
作者
孙卫国
张灵霞
+2 位作者
熊志红
杨秉芬
程小星
《实用预防医学》
CAS
2014年第12期1409-1411,共3页
目的在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体p ET-Dsb C中,然后进行融合蛋白Dsb CRv3425表达并实现亲和纯化,用W...
目的在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体p ET-Dsb C中,然后进行融合蛋白Dsb CRv3425表达并实现亲和纯化,用Western-blot分析其抗原性和特异性。结果 Rv3425基因在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和纯化的Dsb C-Rv3425蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论Dsb C-Rv3425蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达形式存在,具有较好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。
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关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
表达
原文传递
结核分枝杆菌Rv3425蛋白的原核表达纯化及其血清学诊断价值
被引量：
1
3
作者
孙卫国
李邦印
+3 位作者
刘艳华
张灵霞
熊志红
程小星
《生物技术通讯》
CAS
2013年第5期659-661,共3页
目的:用原核系统表达结核分枝杆菌Rv3425蛋白并纯化,评价该重组蛋白在结核病血清学诊断方面的价值。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板,PCR扩增得到Rv3425基因序列,克隆至表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达...
目的:用原核系统表达结核分枝杆菌Rv3425蛋白并纯化,评价该重组蛋白在结核病血清学诊断方面的价值。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板,PCR扩增得到Rv3425基因序列,克隆至表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达后纯化,用Western印迹和ELISA法进行抗原性初步评价。结果:在原核系统内经IPTG诱导表达后,Rv3425蛋白主要以包涵体形式存在,经复性和镍柱层析纯化后,纯度达95%以上;Western印迹和ELISA结果证明重组Rv3425具有较强的抗原活性;用纯化的Rv3425蛋白做抗原,临床诊断结核病人血清,阳性率达50%。结论:高纯度的Rv3425蛋白在结核病诊断方面具有很高的应用价值,可作为结核病诊断的备选抗原。
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关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
原核表达
血清学诊断
下载PDF
职称材料
题名
结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c蛋白融合表达与血清学评价
被引量：
4
1
作者
胡永亮
孙卫国
张灵霞
梁晓博
机构
中国人民解放军第
解放军第
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期1-4,10,共5页
基金
国家科技重大专项(No.2013ZX10003006)
解放军第309医院面上课题(No.2016MS-001)~~
文摘
目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表达载体pET-24b中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化,通过ELISA检测100份确诊结核病人、20例非结核呼吸疾病患者、100份健康人血清,评价融合蛋白进行临床血清学诊断的可行性。结果 Rv3425-Rv1168c融合蛋白在原核系统内获得高表达,纯化的融合蛋白经ELISA方法测定,在血清学实验中敏感性为54%,特异性为95%。结论 Rv3425-Rv1168c融合蛋白具有较高的抗原特异性和免疫原性,在结核病血清学诊断方面具有很大的应用价值。
关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
rv
1168c蛋白
血清学诊断
Keywords
Mycobacterium
tuberculosis
protein
rv
3425
protein
rv
1168c
serological
diagnosis
分类号
R183 [医药卫生—流行病学]
下载PDF
职称材料
题名
结核分枝杆菌Rv3425蛋白原核可溶性表达
被引量：
3
2
作者
孙卫国
张灵霞
熊志红
杨秉芬
程小星
机构
中国人民解放军第
出处
《实用预防医学》
CAS
2014年第12期1409-1411,共3页
基金
国家传染病重大项目(2013ZX-10003-006)
文摘
目的在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体p ET-Dsb C中,然后进行融合蛋白Dsb CRv3425表达并实现亲和纯化,用Western-blot分析其抗原性和特异性。结果 Rv3425基因在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和纯化的Dsb C-Rv3425蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论Dsb C-Rv3425蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达形式存在,具有较好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。
关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
表达
Keywords
Mycobacterium
tuberculosis
protein
rv
3425
Expression
分类号
R183 [医药卫生—流行病学]
原文传递
题名
结核分枝杆菌Rv3425蛋白的原核表达纯化及其血清学诊断价值
被引量：
1
3
作者
孙卫国
李邦印
刘艳华
张灵霞
熊志红
程小星
机构
解放军第
出处
《生物技术通讯》
CAS
2013年第5期659-661,共3页
基金
国家传染病防治重大项目(2008ZX-10003-012)
文摘
目的:用原核系统表达结核分枝杆菌Rv3425蛋白并纯化,评价该重组蛋白在结核病血清学诊断方面的价值。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板,PCR扩增得到Rv3425基因序列,克隆至表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达后纯化,用Western印迹和ELISA法进行抗原性初步评价。结果:在原核系统内经IPTG诱导表达后,Rv3425蛋白主要以包涵体形式存在,经复性和镍柱层析纯化后,纯度达95%以上;Western印迹和ELISA结果证明重组Rv3425具有较强的抗原活性;用纯化的Rv3425蛋白做抗原,临床诊断结核病人血清,阳性率达50%。结论:高纯度的Rv3425蛋白在结核病诊断方面具有很高的应用价值,可作为结核病诊断的备选抗原。
关键词
结核分枝杆菌
rv
3425
蛋白
原核表达
血清学诊断
Keywords
Mycobacterium
tuberculosis
protein
rv
3425
prokaryotie
expression
serodiagnosis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c蛋白融合表达与血清学评价
胡永亮
孙卫国
张灵霞
梁晓博
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌Rv3425蛋白原核可溶性表达
孙卫国
张灵霞
熊志红
杨秉芬
程小星
《实用预防医学》
CAS
2014
3
原文传递
3
结核分枝杆菌Rv3425蛋白的原核表达纯化及其血清学诊断价值
孙卫国
李邦印
刘艳华
张灵霞
熊志红
程小星
《生物技术通讯》
CAS
2013
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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