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基于生物信息学的HERV研究现状与发展趋势 被引量:1
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作者 韩九强 吕红强 +1 位作者 刘俊 张善新 《生物信息学》 2014年第2期117-122,共6页
近年来研究证实,人内源性逆转录病毒(HERV)中长末端重复序列(LTR)和囊膜蛋白基因(env)与基因异常表达关系密切。本文阐述了HERV国内外研究现状与发展动态。从生物信息学角度对LTR中启动子、多聚腺苷化(PolyA)信号和增强子等顺式作用元... 近年来研究证实,人内源性逆转录病毒(HERV)中长末端重复序列(LTR)和囊膜蛋白基因(env)与基因异常表达关系密切。本文阐述了HERV国内外研究现状与发展动态。从生物信息学角度对LTR中启动子、多聚腺苷化(PolyA)信号和增强子等顺式作用元件以及env中的免疫抑制区(ISD)进行了重点分析。指出上述元件和潜在功能区在基因的异常表达和囊膜蛋白的免疫抑制中起关键作用,必将成为HERV与基因异常表达关系研究的热点与趋势。通过此类研究,以期为癌症疾病的早期诊断和治疗靶位点的选择奠定理论基础。 展开更多
关键词 人内源性逆转录病毒 长末端重复序列 启动子 多聚腺苷化信号 免疫抑制区
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人胃癌细胞Caveolin-1基因的表达与DNA甲基化修饰之间的关系研究 被引量:1
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作者 毛立祺 戴春艳 +4 位作者 金威洋 傅宇斐 陈喆 吕宾 王曦 《浙江中医药大学学报》 CAS 2021年第9期939-944,共6页
[目的]观察胃癌细胞系中小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)基因不同亚型的表达水平,探讨影响其基因转录调控的甲基化修饰途径。[方法]选择Cav-1基因表达水平不同的胃癌细胞系,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polyme... [目的]观察胃癌细胞系中小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)基因不同亚型的表达水平,探讨影响其基因转录调控的甲基化修饰途径。[方法]选择Cav-1基因表达水平不同的胃癌细胞系,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测不同胃癌细胞系中Cav-1基因的两个亚型α和β的mRNA水平,之后利用磷酸胞苷酰(基)鸟苷(cytidylyl phosphate guanosine,Cp G)岛在线预测软件对其启动子区和第一外显子区CpG岛分布情况进行分析,最后应用甲基化qPCR对其甲基化水平进行检测。[结果]Real-time q PCR结果显示,人胃癌细胞MGC-803中Cav-1以及Cav-1α的表达分别是人正常胃黏膜上皮细胞GES1的(1.782±0.489)倍和(2.604±0.945)倍,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);人胃癌细胞AGS中的Cav-1以及Cav-1α的表达则仅是GES1细胞的(0.017±0.002)倍和(0.0005±0.00003)倍,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001)。相对于GES1细胞,MGC-803细胞和AGS细胞中Cav-1β的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。利用CpG岛在线预测软件分析结果表明,人Cav-1α基因的启动子区存在一个174bp大小的CpG岛,该岛位于相对于转录起始位点(transcription start stecte,TSS)+1的-250~-77区域内,包含了17个CG位点。甲基化qPCR检测发现,Cav-1α基因启动子区-158~-77区域处于去甲基化状态,则Cav-1α的m RNA表达水平较高,相反,该区域处于高度甲基化状态,则其mRNA表达较低。[结论]人胃癌细胞中Cav-1的表达主要与其α亚型的表达相关,与β亚型无关;并且其启动子区CpG岛内-158~-77区域的甲基化修饰程度与其m RNA转录调控水平密切相关。 展开更多
关键词 小窝蛋白-1 亚型 胃癌 甲基化 启动子区 CPG岛 转录调控 基因表达
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橡胶树HbFCA启动子在转基因烟草中的功能缺失分析
3
作者 李季 戴雪梅 +3 位作者 孙芳 黄天带 华玉伟 黄华孙 《热带农业科学》 2017年第7期62-66,74,共6页
利用5′缺失设计一系列引物,扩增HbFCA启动子质粒,获得5个启动子缺失片段,用这些片段分别替换PBI121载体中的CaMV35S启动子,得到5个HbFCA的5′缺失表达载体,即pA、pB、pC、pD和pE。利用农杆菌介导叶盘法进行烟草遗传转化,对组培瓶内生... 利用5′缺失设计一系列引物,扩增HbFCA启动子质粒,获得5个启动子缺失片段,用这些片段分别替换PBI121载体中的CaMV35S启动子,得到5个HbFCA的5′缺失表达载体,即pA、pB、pC、pD和pE。利用农杆菌介导叶盘法进行烟草遗传转化,对组培瓶内生根较好的烟草叶片GUS染色,结果发现,长度为最小片段的276 bp的pE可以较好地实现HbFCA启动子的功能。对橡胶树体细胞胚瞬时表达检测发现,pE片段也能启动表达,有较好的GUS活性,可以实现HbFCA启动子的功能。 展开更多
关键词 橡胶树 HbFCA 启动子 5′端缺失分析法 核心结构域
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黄瓜苋科凝集素基因的表达分析与逆境调控
4
作者 赵菲 党刘毅 +3 位作者 魏敏惠 刘春莹 冷伟 尚琛晶 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期183-190,共8页
凝集素是一类具有特异性糖结合活性的蛋白质,通常具有1个或多个非催化的糖结合结构域。凝集素在植物对病原菌的防御反应中发挥重要作用。由于其抗细菌、真菌、病毒和昆虫等的活性,凝集素在农业和生物医药领域都具有很大的应用潜力。作... 凝集素是一类具有特异性糖结合活性的蛋白质,通常具有1个或多个非催化的糖结合结构域。凝集素在植物对病原菌的防御反应中发挥重要作用。由于其抗细菌、真菌、病毒和昆虫等的活性,凝集素在农业和生物医药领域都具有很大的应用潜力。作为最小的凝集素家族之一,苋科凝集素的研究较少。该文通过对重要经济作物黄瓜(Cucumissativus)的基因组进行分析,对16种苋科凝集素基因在黄瓜基因组中的分布和位置进行研究,并分析相关基因的外显子/内含子组成。进一步通过启动子分析,阐明了苋科凝集素基因对非生物胁迫的响应情况。最后,通过实时荧光定量PCR,检测了黄瓜中4种苋科凝集素基因对低温、高盐、干旱和ABA处理的响应情况。研究结果可为揭示苋科凝集素的生理功能及其在植物胁迫响应中的作用提供参考。 展开更多
关键词 非生物胁迫 苋科凝集素 启动子 蛋白结构域
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Genome-wide analysis and molecular dissection of the SPL gene family in Salvia miltiorrhiza 被引量:13
5
作者 Linsu Zhang Bin Wu +3 位作者 Degang Zhao Caili Li Fenjuan Shao Shanfa Lu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期38-50,共13页
SQUAMOSA promoter binding protein-likes (SPLs) are plant-specific transcription factors playing vital regulatory roles in plant growth and development. There is no information about SPLs in Salvia miltiorrhiza (Dan... SQUAMOSA promoter binding protein-likes (SPLs) are plant-specific transcription factors playing vital regulatory roles in plant growth and development. There is no information about SPLs in Salvia miltiorrhiza (Danshen), a significant medicinal plant widely used in Traditional Chinese medicine (TCM) for&gt;1,700 years and an emerging model plant for TCM studies. Through genome-wide identification and subsequent molecular cloning, we identified a total 15 SmSPLs with divergent sequence features, gene structures, and motifs. Comparative analysis showed sequence conservation between SmSPLs and their Arabidopsis counterparts. A phylogenetic tree clusters SmSPLs into six groups. Many of the motifs identified commonly exist in a group/subgroup, implying their functional redundancy. Eight SmSPLs were predicted and experimental y validated to be targets of miR156/157. SmSPLs were differen-tial y expressed in various tissues of S. milltiorrhiza. The expression of miR156/157-targeted SmSPLs was increased with&amp;nbsp;the maturation of S. miltiorrhiza, whereas the expression of miR156/157 was decreased, confirming the regulatory roles of miR156/157 in SmSPLs and suggesting the functions of SmSPLs in S. miltiorrhiza development. The expression of miR156/157 was negatively correlated with miR172 during the maturation of S. miltiorrhiza. The results indicate the significance and complexity of SmSPL-, miR156-, and miR172-mediated regula-tion of developmental timing in S. miltiorrhiza. 展开更多
关键词 miR156 miR172 Salvia miltiorrhiza SQUAMOSA promoterbinding protein domain SQUAMOSA promoter binding protein-likes
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Isolation and analysis of a TIR-specific promoter from poplar 被引量:12
6
作者 Zheng Hui-quan Lin Shan-zhi Zhang Qian Zhang Zhen-zhen Zhang Zhi-yi Lei Yang Hou Lu 《Forestry Studies in China》 CAS 2007年第2期95-106,共12页
A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(... A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(Populus tomentosa × P. bolleana) × P. tomentosa]. Sequencing results and alignment analysis show that the obtained TIR-specific promoter (named as PtTIRp01) was 1,732 bp in length; moreover 3' region of the PtTIRp01 contains a responds to the 5' composition of TIR-NBS type gene PtDRG02, of 747 bp long 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 and its 398 bp complete TIR-encoding sequence, which significantly corindicating that the obtained TIR-specific promoter region consists upstream region of promoter (985 bp). It was found that the 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 was characterized in the downstream region of the transcriptional start, named as 5'-untranslated region (5' UTR), consisting of one 93 bp 5'-untranslation exon, one 213 bp intron and one 441 bp TIR-encoding open reading frame (ORF). In addition, several putative cis-acting motifs were present in the obtained TIR-specific promoter of PtDRG02, including one TATA box, one GC-rich, one AT-rich, one P-box, one 3-AF1 binding site, two CAAT boxes, two GT-1 motifs, three typical W-boxes, four I-boxes, and one multi-cis-acting fragment (MCF). The latter contains five types of regulatory elements (E4, G-box, ABRE motif, box 1 and HVA 1 s), most of which were homologous to the cis-acting regulatory elements involved in the activation of defense genes in plants. Thus, it can be suggested that TIR-specific promoter might be a pathogen-inducible promoter and be necessary for the inducible expression of defense-related genes. Key words Toll/interleukin- 1 receptor domain, promoter, Cis-acting element, poplar 展开更多
关键词 Toll/interleukin- 1 receptor domain promoter Cis-acting element POPLAR
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TFAP2A对肾小球硬化相关基因ADCK4转录调控机制的研究
7
作者 张小田 任献国 《天津医药》 CAS 2024年第5期449-453,共5页
目的探索细胞中TFAP2A对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)相关基因含aarF结构域的激酶4(ADCK4)的转录调控机制及TFAP2A与ADCK4是否存在特定的结合区域。方法生物信息学分析肾小球硬化基因火山图,ADCK4及TFAP2A表达水平的关系。JASPAR数据库预... 目的探索细胞中TFAP2A对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)相关基因含aarF结构域的激酶4(ADCK4)的转录调控机制及TFAP2A与ADCK4是否存在特定的结合区域。方法生物信息学分析肾小球硬化基因火山图,ADCK4及TFAP2A表达水平的关系。JASPAR数据库预测ADCK4基因转录起始位点-464 bp/+206 bp区域包含TFAP2A转录因子结合位点;TFAP2A siRNA浓度分别为5、10、15µmol/L,TFAP2A过表达质粒质量浓度分别为50、100、300µg/L,通过双萤光素酶报告基因实验验证TFAP2A对ADCK4基因启动子水平的调控作用。TFAP2A siRNA及TFAP2A过表达质粒转染细胞,实时荧光定量PCR检测TFAP2A、ADCK4 mRNA表达,蛋白免疫印迹实验检测TFAP2A、ADCK4蛋白表达。染色质免疫沉淀试验验证TFAP2A与ADCK4启动子的特定区域结合。结果生物信息学分析显示FSGS肾组织中RNA-Seq RNA表达上调的基因273个,表达下调的基因219个;ADCK4与TFAP2A表达水平呈正相关(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验证明TFAP2A siRNA浓度为10、15µmol/L的ADCK4启动子相对萤光素酶活性增强,TFAP2A过表达质粒质量浓度为100、300µg/L的ADCK4启动子萤光素酶活性降低(P<0.05)。与对照组相比,实验组ADCK4 mRNA和蛋白表达水平升高;过表达实验中,与对照组比较,实验组ADCK4 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。染色质免疫沉淀试验发现TFAP2A能与ADCK4启动子的特定区域结合。结论转录因子TFAP2A负向调控ADCK4基因表达,增加了调控足细胞重要基因的转录因子成员。 展开更多
关键词 肾小球硬化症 局灶节段性 转录因子AP-2 启动区 遗传 转录调控 含aarF结构域的激酶4
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Immediate–Early(IE) gene regulation of cytomegalovirus:IE1-and pp71-mediated viral strategies against cellular defenses 被引量:2
8
作者 Lilith Torres Qiyi Tang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第6期343-352,共10页
Three crucial hurdles hinder studies on human cytomegalovirus(HCMV): strict species specificity, differences between in vivo and in vitro infection, and the complexity of gene regulation. Ever since the sequencing of ... Three crucial hurdles hinder studies on human cytomegalovirus(HCMV): strict species specificity, differences between in vivo and in vitro infection, and the complexity of gene regulation. Ever since the sequencing of the whole genome was first accomplished, functional studies on individual genes have been the mainstream in the CMV field. Gene regulation has therefore been elucidated in a more detailed fashion. However, viral gene regulation is largely controlled by both cellular and viral components. In other words, viral gene expression is determined by the virus–host interaction. Generally, cells respond to viral infection in a defensive pattern; at the same time, viruses try to counteract the cellular defense or else hide in the host(latency). Viruses evolve effective strategies against cellular defense in order to achieve replicative success. Whether or not they are successful, cellular defenses remain in the whole viral replication cycle: entry, immediate–early(IE) gene expression, early gene expression, DNA replication, late gene expression, and viral egress. Many viral strategies against cellular defense, and which occur in the immediate–early time of viral infection, have been documented. In this review, we will summarize the documented biological functions of IE1 and pp71 proteins, especially with regard to how they counteract cellular intrinsic defenses. 展开更多
关键词 cytomegalovirus(CMV) major IMMEDIATE EARLY promoter(MIEP) IE1 pp71 nuclear domain 10(ND10) intrinsic CELLULAR defense enhancer virus-host interaction
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P53结合位点对人NOD8基因的调控 被引量:2
9
作者 曾琪 张芸 +3 位作者 田莉 唐清亮 胡巢凤 柏志全 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2362-2367,共6页
目的:探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用。方法:利用生物信息学方法,我们发现人与黑猩猩的NOD8基因核心启动子区域相似位置含有P53结合位点;以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因序列,构建含有/缺失人P53结合位点的NOD8基因... 目的:探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用。方法:利用生物信息学方法,我们发现人与黑猩猩的NOD8基因核心启动子区域相似位置含有P53结合位点;以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因序列,构建含有/缺失人P53结合位点的NOD8基因启动子驱动的、表达绿色荧光蛋白-NOD8融合蛋白的质粒pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8和mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8;将构建的重组质粒经阳离子聚合物JetPeiTM介导瞬时转染HEK293细胞中,并加入不同浓度的P53抑制剂pifithrin alpha(PFT-α)处理HEK293细胞,用RT-PCR和Westren blotting方法检测NOD8 mRNA和蛋白的表达;此外,用pNOD8(760 bp)-EGFP质粒转染HEK293细胞,利用染色质免疫共沉淀法(ChIP)观察P53是否与NOD8启动子结合。结果:经酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功。ChIP实验证实P53能与NOD8启动子结合。pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组中NOD8 mRNA的表达显著高于pEGFP-C2转染组(P<0.05),并且NOD8 mRNA在缺失人P53结合位点的mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8转染组中的表达明显降低(P<0.01);同时发现加入PFT-α的pNOD8(760bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8 mRNA的表达显著下降,并呈剂量依赖关系,其中90μmol/L PFT-α对NOD8mRNA表达的抑制作用最为显著(P<0.01)。与mRNA检测结果一致的是pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8蛋白的表达量显著高于对照组pEGFP-C2;而mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8蛋白的表达量明显低于pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组和加入PFT-α的pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组(P<0.01)。结论:P53结合位点在NOD8基因调控中起着重要的作用,并且P53结合位点与NOD8基因之间可能存在正反馈调节。 展开更多
关键词 启动子 基因 NOD8 P53结合位点 核苷酸结合寡聚结构域样受体
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猪NLRC5基因启动子克隆及生物信息学分析
10
作者 刘翔 尹灵丹 +6 位作者 薛美 李亮 赵立媛 蒋成凡 王文哲 冯力 刘平黄 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第13期1-5,143,共6页
为了构建猪NLR家族含CARD结构域5(NOD-like receptor family caspase recruitment domain family domain-containing 5,NLRC5)基因启动子双荧光素酶报告质粒,确认其活性,进而探索其转录调控机制,试验采用PCR方法从猪睾丸细胞(swine test... 为了构建猪NLR家族含CARD结构域5(NOD-like receptor family caspase recruitment domain family domain-containing 5,NLRC5)基因启动子双荧光素酶报告质粒,确认其活性,进而探索其转录调控机制,试验采用PCR方法从猪睾丸细胞(swine testicular cell,ST细胞)中扩增出猪NLRC5基因启动子,将其与pGL3-Basic载体连接,测序正确后将猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒转染至ST细胞中,通过双荧光素酶报告检测试剂盒检测荧光素酶的表达活性,并使用生物信息学软件预测该基因启动子区域的CpG岛、调控元件及转录因子结合位点。结果表明:试验成功构建猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒,该质粒的相对荧光素酶活性极显著高于pGL3-Basic载体(P<0.01)。NLRC5基因启动子区域中存在2个CpG岛,TATA box、CCAAT box和GC box等多种调控元件,以及IRF1、IRF3、STAT1、STAT3、STAT4和NF-κB转录因子结合位点。说明猪NLRC5基因的表达可能受甲基化的影响,同时也可能受顺式作用元件以及干扰素和NF-κB相关转录因子的调控。 展开更多
关键词 启动子质粒 双荧光素酶 NLR家族含CARD结构域5(NLRC5)基因 启动子调控元件 转录因子结合位点 生物信息学
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5HRE联合CEAp靶向调控RASSF1A基因对SGC7901胃癌细胞株抑制作用的研究 被引量:1
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作者 周培华 孙学军 +8 位作者 郑见宝 王炜 王孝珑 陈南征 魏光兵 范渊 李孝彬 王训凯 禄韶英 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2015年第10期1201-1208,共8页
目的探讨人5拷贝低氧反应元件(5HRE)联合癌胚抗原启动子(CEAp)调控元件的靶向性及调控RAS相关区域家族1A(RASSF1A)抑癌基因的慢病毒载体对SGC7901胃癌细胞的抑制作用。方法 1分别采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学SP染色及West... 目的探讨人5拷贝低氧反应元件(5HRE)联合癌胚抗原启动子(CEAp)调控元件的靶向性及调控RAS相关区域家族1A(RASSF1A)抑癌基因的慢病毒载体对SGC7901胃癌细胞的抑制作用。方法 1分别采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学SP染色及Western blot法检测SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株中癌胚抗原(CEA)mRNA及其蛋白,以及RASSF1A蛋白的表达水平,以确定实验细胞和阴性对照细胞。2构建p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体以转染SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株,将各细胞株分为2组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较各细胞株中缺氧组和常氧组细胞的启动活性。3将重组慢病毒载体(p LV-5HRE-CEAp-RASSF1A)及相应空病毒载体包装成病毒颗粒LV-5HC-RASSF1A(感染组)和LV-NC(阴性对照组),感染SGC7901细胞。以未感染任何病毒的SGC7901细胞作为空白对照组,将该3组细胞再分为2个亚组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较缺氧组和常氧组细胞中RASSF1A蛋白的表达水平和细胞增殖抑制率。结果 1 q RT-PCR结果显示:SGC7901细胞株中CEA m RNA的表达水平高于MKN28及MCF-10A细胞株(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示:CEA的表达水平在SGC7901、MKN28及MCF-10A细胞株中依次递减,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:在SGC7901及MKN28细胞株中未检测到RASSF1A蛋白的电泳条带,而在MCF-10A细胞株中可检测到。据此确定SGC7901细胞株为实验细胞,MKN28细胞株为阴性对照细胞。2转染p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体后,在SGC7901及MKN28细胞株中,同种细胞株内与常氧组比较,缺氧组细胞的活性倍数均升高(P<0.01);而在MCF-10A细胞株中,常氧组和缺氧组细胞的活性倍数比较差异无统计学意义(P>0.05)。在不加入CoCl2条件和加入CoCl2条件下,同等条件下与SGC7901细胞株比较,MKN28及MCF-10A细胞株的活性倍数均较低(P<0.05);与MKN28细胞株比较,MCF-10A细胞株的活性倍数� 展开更多
关键词 5拷贝低氧反应元件 癌胚抗原启动子 RAS相关区域家族1A基因 胃癌 基因治疗
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我国国家公园体制推广对象的范畴浅析
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作者 黄萌 《福建农业科技》 2018年第1期54-58,共5页
借鉴世界自然保护联盟与国外先进国家的优秀经验,立足于本国国情,明确我国国家公园体制推广对象确定的原则,即以世界自然保护联盟(IUCN)管理分类最后一类为最低标准,以文化资源为主的和自然资源等级低的国家保护地都暂不列入的原则,确... 借鉴世界自然保护联盟与国外先进国家的优秀经验,立足于本国国情,明确我国国家公园体制推广对象确定的原则,即以世界自然保护联盟(IUCN)管理分类最后一类为最低标准,以文化资源为主的和自然资源等级低的国家保护地都暂不列入的原则,确定我国国家公园体制的推广对象。 展开更多
关键词 国家公园 体制 体系 推广对象 范畴
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国内阅读推广研究的知识图谱分析 被引量:6
13
作者 王旻霞 《科技管理研究》 CSSCI 北大核心 2013年第18期159-162,174,共5页
运用文献资料调研、知识可视化、词频分析等方法,对我国2005-2011年间发表的143篇阅读推广相关学术文献进行分析。结果表明,我国阅读推广研究刚刚起步,发文量呈快速增长趋势;学术团体规模不断扩大但不稳定;期刊、机构及地域分布不均衡... 运用文献资料调研、知识可视化、词频分析等方法,对我国2005-2011年间发表的143篇阅读推广相关学术文献进行分析。结果表明,我国阅读推广研究刚刚起步,发文量呈快速增长趋势;学术团体规模不断扩大但不稳定;期刊、机构及地域分布不均衡。主要研究领域包括阅读推广的意义、图书馆阅读推广、青少年儿童阅读推广和阅读推广策略等。 展开更多
关键词 阅读 阅读推广 知识图谱 词频分析
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基于文献计量的阅读推广研究分析 被引量:3
14
作者 龚舒野 《图书馆研究》 2015年第4期124-128,共5页
运用文献资料调研、知识可视化、词频分析等方法,利用CNKI的统计功能对其数据库中关于我国阅读推广的相关文献进行计量分析。结果表明,我国阅读推广研究刚刚起步,发文量快速增长。学术团体的规模大但不稳定,期刊、发文机构、地区分布不... 运用文献资料调研、知识可视化、词频分析等方法,利用CNKI的统计功能对其数据库中关于我国阅读推广的相关文献进行计量分析。结果表明,我国阅读推广研究刚刚起步,发文量快速增长。学术团体的规模大但不稳定,期刊、发文机构、地区分布不均。目前的研究领域包括阅读推广内涵研究、图书馆阅读推广研究、全民阅读研究、青少年儿童阅读推广研究。 展开更多
关键词 阅读推广 词频分析 知识图谱
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国内经典阅读推广研究的文献计量和知识图谱分析 被引量:2
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作者 杜叶龙 王伟丽 《合肥工业大学学报(社会科学版)》 2019年第1期69-77,共9页
在倡导"全民阅读"的大环境下,经典阅读推广成为近年来国内的一大研究热点。文章以CSSCI为来源文献,对国内经典阅读推广研究2003-2017年的1 457篇文献运用CiteSpace软件进行研究主体和关键词共现知识图谱分析,结果显示国内经... 在倡导"全民阅读"的大环境下,经典阅读推广成为近年来国内的一大研究热点。文章以CSSCI为来源文献,对国内经典阅读推广研究2003-2017年的1 457篇文献运用CiteSpace软件进行研究主体和关键词共现知识图谱分析,结果显示国内经典阅读推广相关研究的主要研究机构为综合类高校院系、理工类或无信息管理专业方向的高校图书馆和公共图书馆三大类,且以第一类为主,后两者为辅;高产作者以独著为主,团队合作相对较弱;当前和未来主要的研究热点是全民阅读推广、少儿阅读推广和大学生经典阅读推广。 展开更多
关键词 阅读推广 经典阅读 文献计量 知识图谱 CITESPACE
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复苏促进因子研究进展 被引量:2
16
作者 李伦 许崇波 李元 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期703-705,共3页
复苏促进因子是一类广泛存在于结核分枝杆菌等革兰阳性菌中的蛋白质,能促进休眠菌复苏。复苏促进因子的作用机制目前仍然是未知的,然而对此类蛋白的结构域预测及核磁共振分析显示其保守区具有溶菌酶样折叠。我们简要综述了国外对此类蛋... 复苏促进因子是一类广泛存在于结核分枝杆菌等革兰阳性菌中的蛋白质,能促进休眠菌复苏。复苏促进因子的作用机制目前仍然是未知的,然而对此类蛋白的结构域预测及核磁共振分析显示其保守区具有溶菌酶样折叠。我们简要综述了国外对此类蛋白作用机制的研究进展。 展开更多
关键词 复苏促进因子 结构域 生物学活性 作用机制
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抗结核分枝杆菌RpfB结构域单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 樊爱琳 马越云 +2 位作者 郑善銮 杨麦贵 郝晓柯 《生物技术通讯》 CAS 2014年第6期804-808,共5页
目的:制备抗结核分枝杆菌Rpf B结构域单克隆抗体。方法:将p PRO-EXHT-Rpf B domain原核表达载体接种于大肠杆菌DH5中,用IPTG诱导表达Rpf B结构域蛋白,以纯化的Rpf B结构域蛋白作为免疫原,皮下包埋免疫小鼠3次,每次间隔2周;分离小鼠的脾... 目的:制备抗结核分枝杆菌Rpf B结构域单克隆抗体。方法:将p PRO-EXHT-Rpf B domain原核表达载体接种于大肠杆菌DH5中,用IPTG诱导表达Rpf B结构域蛋白,以纯化的Rpf B结构域蛋白作为免疫原,皮下包埋免疫小鼠3次,每次间隔2周;分离小鼠的脾细胞,与Sp2/0细胞融合,克隆化制备抗Rpf B结构域单抗,ELISA检测其效价,鉴定其特异性和相对亲和力,观察制备的抗Rpf B结构域单抗对Rpf家族其他蛋白的识别能力及其对结核分枝杆菌和藤黄微球菌的生长抑制作用。结果:制备了3株抗Rpf B结构域单抗,特异性高,亲和力较强,均能特异性识别Rpf B结构域。经小鼠腹腔注射制备腹水并纯化,获得了较高纯度的单抗,所制备的抗Rpf B结构域多肽的单克隆抗体可以识别多种Rpf样蛋白及其结构域蛋白。在抗体滴度为1∶1000时可有效抑制Rpf B结构域对结核分枝杆菌H37Ra和藤黄微球菌的生长促进作用,提示抗Rpf B结构域单抗可能会抑制进入机体内生长停滞或潜伏感染的结核分枝杆菌的再次激活,可能具有预防隐性感染复发的作用。结论:抗Rpf B结构域单抗的制备为进一步研究Rpf B结构域的生物学和免疫特性提供了实验工具。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 复苏促进因子 RpfB结构域 单克隆抗体
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藤黄微球菌Rpf及其结构域蛋白对结核分枝杆菌生长的影响
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作者 樊爱琳 简文 +6 位作者 郑善銮 师长宏 马越云 杨麦贵 柏银兰 徐志凯 郝晓柯 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期503-506,共4页
目的表达纯化藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复活促进因子(Rpf)及结构域(domain)蛋白,研究其对结核分枝杆菌生长的影响。方法诱导表达含有藤黄微球菌Rpf及其结构域基因的融合表达载体pPro-EXHT—Rpf和pPro—EXHT-Rpf domain,... 目的表达纯化藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复活促进因子(Rpf)及结构域(domain)蛋白,研究其对结核分枝杆菌生长的影响。方法诱导表达含有藤黄微球菌Rpf及其结构域基因的融合表达载体pPro-EXHT—Rpf和pPro—EXHT-Rpf domain,在变性条件下对目的蛋白进行纯化。用不同浓度的纯化蛋白刺激不可培养状态结核分枝杆菌的生长。结果获得藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白的纯度分别为95%和93%,相对分子质量(Mr)大小分别为30×10^3和12×10^3,蛋白质含量分别为471mg/L和337ms/L。Western blot证实,获得的蛋白为我们所需要的目的蛋白。所获得的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白能够促进不可培养状态的结核分枝杆菌的生长,而抗藤黄微球菌Rpf结构域的单克隆抗体可以明显抑制结核分枝杆菌的生长。结论表达的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白可以促进结核分枝杆菌的生长,而且藤黄微球菌Rpf蛋白与Rpf结构域蛋白具有一致的生物活性。 展开更多
关键词 藤黄微球菌 结核分枝杆菌 复活促进因子 结构域
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