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鸡IL-2全基因和去信号肽基因的原核表达
被引量：
12
1
作者
龚婷
杨孝朴
+3 位作者
李银聚
张春杰
吴庭才
程相朝
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期11-14,40,共5页
根据已发表的鸡白介素-2(ChIL-2)cDNA编码基因序列设计3条引物,利用RT-PCR技术从经诱导的卢氏鸡胚脾淋巴细胞中扩增出429 bp的ChIL-2全长基因cDNA和363 bp去除信号肽的ChIL-2基因cDNA.将ChIL-2全长和去信号肽的基因cDNA分别克隆到原核...
根据已发表的鸡白介素-2(ChIL-2)cDNA编码基因序列设计3条引物,利用RT-PCR技术从经诱导的卢氏鸡胚脾淋巴细胞中扩增出429 bp的ChIL-2全长基因cDNA和363 bp去除信号肽的ChIL-2基因cDNA.将ChIL-2全长和去信号肽的基因cDNA分别克隆到原核表达载体pET28a(+),构建原核重组表达质粒pET28a-IL-2和pET28a-△SIL-2,并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE检测,在22 ku和18 ku处有2条清晰的蛋白带,相同条件下pET28a-△SIL-2表达量较高.RNAstructure软件分析表明,pET28a-IL-2的mRNA5′端序列形成了复杂且较为稳定的二级结构,不利于翻译的起始,证明信号肽序列的存在对ChIL-2基因在原核细胞中的表达有一定的影响.
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关键词
鸡
细胞白介素
IL-2基因
信号肽
原核表达
MRNA二级结构
下载PDF
职称材料
鸡白细胞介素2原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
5
2
作者
于涟
谢荣辉
+2 位作者
卢觅佳
黄耀伟
李建荣
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期10-13,共4页
鸡白细胞介素2(IL-2)是一种在机体免疫调节中具有多种功能的细胞因子。本研究将萧山鸡白细胞介素2基因克隆入原核表达载体pET-28b,获得了重组表达载体pET-28b-IL-2,将此重组表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达萧山鸡IL-2。SDS-PAG...
鸡白细胞介素2(IL-2)是一种在机体免疫调节中具有多种功能的细胞因子。本研究将萧山鸡白细胞介素2基因克隆入原核表达载体pET-28b,获得了重组表达载体pET-28b-IL-2,将此重组表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达萧山鸡IL-2。SDS-PAGE结果表明,萧山鸡IL-2在大肠杆菌中得到了表达,以此表达产物制成油乳剂苗免疫家兔,用ELISA和Westernblotting检测兔血中的多克隆抗体,结果均为阳性。因而为进一步开展鸡IL-2的结构和功能研究奠定了基础。
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关键词
制备
白细胞介素2
原核表达
鸡
多克隆抗体
免疫增强剂
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职称材料
题名
鸡IL-2全基因和去信号肽基因的原核表达
被引量：
12
1
作者
龚婷
杨孝朴
李银聚
张春杰
吴庭才
程相朝
机构
甘肃农业大学动物医学院。甘肃兰州
河南科技大学动物科技学院
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期11-14,40,共5页
基金
河南省科技攻关项目(0424050010)
文摘
根据已发表的鸡白介素-2(ChIL-2)cDNA编码基因序列设计3条引物,利用RT-PCR技术从经诱导的卢氏鸡胚脾淋巴细胞中扩增出429 bp的ChIL-2全长基因cDNA和363 bp去除信号肽的ChIL-2基因cDNA.将ChIL-2全长和去信号肽的基因cDNA分别克隆到原核表达载体pET28a(+),构建原核重组表达质粒pET28a-IL-2和pET28a-△SIL-2,并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE检测,在22 ku和18 ku处有2条清晰的蛋白带,相同条件下pET28a-△SIL-2表达量较高.RNAstructure软件分析表明,pET28a-IL-2的mRNA5′端序列形成了复杂且较为稳定的二级结构,不利于翻译的起始,证明信号肽序列的存在对ChIL-2基因在原核细胞中的表达有一定的影响.
关键词
鸡
细胞白介素
IL-2基因
信号肽
原核表达
MRNA二级结构
Keywords
chicken
interleukin-2
IL-2
gene
signal
peptide
prokaryon
express
mRNA
secondary
struc-ture
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S831 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
鸡白细胞介素2原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
5
2
作者
于涟
谢荣辉
卢觅佳
黄耀伟
李建荣
机构
浙江大学动物预防医学研究所
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期10-13,共4页
基金
浙江省重点科技资助项目(011102465)
文摘
鸡白细胞介素2(IL-2)是一种在机体免疫调节中具有多种功能的细胞因子。本研究将萧山鸡白细胞介素2基因克隆入原核表达载体pET-28b,获得了重组表达载体pET-28b-IL-2,将此重组表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达萧山鸡IL-2。SDS-PAGE结果表明,萧山鸡IL-2在大肠杆菌中得到了表达,以此表达产物制成油乳剂苗免疫家兔,用ELISA和Westernblotting检测兔血中的多克隆抗体,结果均为阳性。因而为进一步开展鸡IL-2的结构和功能研究奠定了基础。
关键词
制备
白细胞介素2
原核表达
鸡
多克隆抗体
免疫增强剂
Keywords
interleukin-2
prokaryon
express
chicken
polyclone
antibody
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡IL-2全基因和去信号肽基因的原核表达
龚婷
杨孝朴
李银聚
张春杰
吴庭才
程相朝
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
12
下载PDF
职称材料
2
鸡白细胞介素2原核表达及多克隆抗体的制备
于涟
谢荣辉
卢觅佳
黄耀伟
李建荣
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003
5
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职称材料
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