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Cloning and Expression of a Profilin Gene from Rapeseed 被引量:4
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作者 叶秋 李旭锋 +3 位作者 徐莺 王劲 林娟 陈放 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第7期727-730,共4页
Profilin has recently been identified as an actin-binding protein in higher plants. A cDNA clone (designated Repro) encoding profilin gene was isolated from rapeseed ( Brassica napus L. cv. canadian Tween) using RT-PC... Profilin has recently been identified as an actin-binding protein in higher plants. A cDNA clone (designated Repro) encoding profilin gene was isolated from rapeseed ( Brassica napus L. cv. canadian Tween) using RT-PCR technique. Sequence analysis showed 82% similarity to Zea mays L. ZmPro3, 85% to Arabidopsis AthPRF1, 82% to Nicotiana tabacum L. NTPRO, 81% to Oryza sativa L. profilin A. A new full-length cDNA was obtained by 5'-RACE and 3'-RACE techniques. Sequence analysis showed that the size of full-length cDNA is 672 bp which contains a major open reading frame of 134 amino, acids, 5' and 3' untranslated regions and a long Poly (A) tail. Northern blot analysis showed that the profilin gene is a pollen and anther specific gene. 展开更多
关键词 profilin gene 3 '-RACE 5 '-RACE rapeseed pollen RT-PCR
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水稻花粉Profilin基因启动子的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 袁烁 徐莺 +2 位作者 颜纺 叶秋 陈放 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期755-757,共3页
作者使用两次染色体步移 (Genomewalking)法 ,从籼稻 (Oryzasativasubsp .indica)IR36中克隆到长度为 5 6 9bp的花粉 proiflin基因的启动子片段 ,并进行了全序列测定和分析 .结果表明 :在该段序列中含有 3个TATAbox ,3个CAATbox和 2个G ... 作者使用两次染色体步移 (Genomewalking)法 ,从籼稻 (Oryzasativasubsp .indica)IR36中克隆到长度为 5 6 9bp的花粉 proiflin基因的启动子片段 ,并进行了全序列测定和分析 .结果表明 :在该段序列中含有 3个TATAbox ,3个CAATbox和 2个G box .通过EPD(TheEukaryoticPromoterDatabase)的比较发现 ,序列的 + 2~ - 71区域与番茄 (Lycopersiconescu lentum)花粉特异基因LAT5 2 ,向日葵 (Helianthusannuus)花药特异基因SF2启动子关键序列的同源性为 5 0 展开更多
关键词 序列分析 水稻 花粉profilin基因 启动子 染色体步移法 基因克隆 植物雄性不育系
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弓形虫profilin蛋白基因的克隆表达及序列分析 被引量:2
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作者 高琦 张念章 +2 位作者 胡玲英 朱兴全 翁亚彪 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-7,共7页
为研究弓形虫profilin(prf)蛋白基因的遗传变异规律和表达产物的反应原性,以9个来源于不同宿主和地方的弓形虫虫株基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增该基因并测序。将测序结果与从ToxoDB网站下载的4株弓形虫序列一起进行比对分析,用最大... 为研究弓形虫profilin(prf)蛋白基因的遗传变异规律和表达产物的反应原性,以9个来源于不同宿主和地方的弓形虫虫株基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增该基因并测序。将测序结果与从ToxoDB网站下载的4株弓形虫序列一起进行比对分析,用最大简约法绘制系统发育树。再以弓形虫RH株虫体总RNA为模板,使用RT-PCR方法扩增prf基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,转化入表达菌BL21(DE3)后,使用IPTG进行诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。同时,将弓形虫RH株prf基因编码区序列翻译成氨基酸序列,利用生物信息学软件对其亲疏水性、跨膜结构域、二级结构及B细胞抗原表位进行分析。结果显示,9个弓形虫虫株的prf基因长度均为3 552bp,一致性大于99.5%。系统发育树分析表明,弓形虫虫株的聚类没有规律。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,Profilin蛋白的分子质量约为30ku,且反应原性较好。蛋白结构预测结果显示,该蛋白含有4个亲水区,无跨膜区,7个α螺旋,8个β折叠,4个β转角,2个无规则卷曲和7个线性B细胞抗原表位。本研究结果表明,弓形虫prf基因可作为抗弓形虫疫苗候选分子。 展开更多
关键词 弓形虫 profilin蛋白基因 遗传变异 序列分析 原核表达 B细胞抗原表位
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