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牛原始生殖细胞的分离与培养 被引量：22
1
作者 徐小明 华进联 +1 位作者 冯秀亮 窦忠英 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第1期77-80,共4页
　从4～15周龄的牛胎儿生殖嵴中分离得到牛原始生殖细胞,以STO(一种建系的小鼠胎儿成纤维细胞)及MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)为饲养层抑制分化培养,其中1个细胞系传至4代。研究发现,STO较MEF更有利于牛类EG细胞的分离与培养,体长小于5cm的... 　从4～15周龄的牛胎儿生殖嵴中分离得到牛原始生殖细胞,以STO(一种建系的小鼠胎儿成纤维细胞)及MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)为饲养层抑制分化培养,其中1个细胞系传至4代。研究发现,STO较MEF更有利于牛类EG细胞的分离与培养,体长小于5cm的胎儿适合牛EG细胞分离与克隆。同时观察到这些细胞在体外进行自发性分化,可形成上皮样细胞、神经样细胞和成纤维样细胞。 展开更多
关键词 牛 原始生殖细胞 分离培养 胚胎干细胞 胚胎生殖细胞
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山羊PGCs用于分离与克隆类ES细胞 被引量：10
2
作者 韩建永 桑润滋 +2 位作者 孙国杰 王志刚 李俊杰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期344-347,共4页
选择健康成年本地白山羊 ,自然发情、配种后 4 4 d取胎儿 ,以传统的原始生殖细胞 (PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞 (类 ES细胞 ) ,并对山羊类 ES细胞在不同饲养层上进行培养。... 选择健康成年本地白山羊 ,自然发情、配种后 4 4 d取胎儿 ,以传统的原始生殖细胞 (PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞 (类 ES细胞 ) ,并对山羊类 ES细胞在不同饲养层上进行培养。结果表明 ,采用传统方法和共培养的方法并添加细胞因子均能分离获得类 ES细胞。分离获得的类ES细胞在同源 (山羊 )胎儿细胞饲养层上生长效果较好 ,可传 4代或 5代 ,而在小鼠原代成纤维细胞饲养层上类 ES细胞仅传 3代。另外 ,共培养不添加细胞因子组仅获 1个类 ES细胞集落 。 展开更多
关键词 分离 克隆 山羊 胚胎干细胞 原始生殖细胞 类ES细胞
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鱼类性腺发育研究进展 被引量：21
3
作者 刘晨斌 徐革锋 +4 位作者 黄天晴 谷伟 张玉勇 相福生 王炳谦 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期46-54,共9页
性腺发育对鱼类的成功繁殖与种群延续至关重要。鱼类的性腺发育包括原始性腺的形成和分化、性腺的组织结构、形态特征与时相划分以及环境因素对性腺发育的影响等。掌握鱼类原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)的起源、迁移和分... 性腺发育对鱼类的成功繁殖与种群延续至关重要。鱼类的性腺发育包括原始性腺的形成和分化、性腺的组织结构、形态特征与时相划分以及环境因素对性腺发育的影响等。掌握鱼类原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)的起源、迁移和分化特征是研究性腺发育规律的基础。鱼类的PGCs出现于胚胎发育早期,以不同方式迁移到生殖嵴,与生殖上皮共同形成原始性腺,之后向精巢或卵巢分化。鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。遗传和环境因素(如温度、光照、激素和pH等)影响性腺的性别分化,具有可逆可塑性。判断鱼类性腺分化方向依据两方面:一是观察性腺的组织学形态特征变化;二是以性原细胞的出现及其减数分裂的细胞学分化。性腺分化主要包括雌雄异体、雌雄同体和性逆转三种类型;雌雄异体型又分为分化型和未分化型。本文通过综述鱼类原始生殖细胞的起源、迁移和分化、性别分化以及性腺发育的研究进展,以期为鱼类性腺发育的研究提供参考。 展开更多
关键词 性腺发育 原始生殖细胞 性别分化 配子发生
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人胚胎干细胞研究进展 被引量：11
4
作者 华进联 窦忠英 +1 位作者 李松 屈雷 《中国科学基金》 CSCD 2000年第2期67-71,共5页
叙述了人胚胎干细胞(hES细胞)的研究现状,并对hES细胞的研究进展及其应用前景等作全面综述。
关键词 人 胚胎干细胞 原始生殖细胞 全能性 多能性
原文传递
胚胎干细胞研究进展 被引量：16
5
作者 董晓 冯书堂 郑行 《国外畜牧科技》 2000年第4期24-26,共3页
介绍哺乳动物胚胎干细胞及其生物学特性 ;综述胚胎干细胞国内外研究进展和新动态 ;归纳利用早期胚胎或原始生殖细胞建立干细胞系的一系列技术要点 ;阐述胚胎干细胞潜在的应用价值。
关键词 胚胎干细胞 原始生殖细胞 饲养层 转基因动物
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泰山螭霖鱼原始生殖细胞的发生及性腺分化规律的研究 被引量：10
6
作者 宋卉 王树迎 彭克美 《动物医学进展》 CSCD 2005年第12期62-67,共6页
通过光镜、电镜及PAS法对泰山螭霖鱼原始生殖细胞的发生、迁移及性腺分化规律进行了研究。结果表明,原始生殖细胞最早出现于受精后11 h的原肠早期;6日龄,生殖嵴形成;20日龄,原始生殖细胞迁移到生殖嵴中,与生殖嵴共同组成原始性腺;60日龄... 通过光镜、电镜及PAS法对泰山螭霖鱼原始生殖细胞的发生、迁移及性腺分化规律进行了研究。结果表明,原始生殖细胞最早出现于受精后11 h的原肠早期;6日龄,生殖嵴形成;20日龄,原始生殖细胞迁移到生殖嵴中,与生殖嵴共同组成原始性腺;60日龄,原始性腺开始分化。卵巢的分化时间早于精巢。电镜下观察到泰山螭霖鱼原始生殖细胞核膜附近有生殖质存在。原始生殖细胞的PAS反应呈阳性。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 原始性腺 性腺分化 泰山螭霖鱼
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鸡原始生殖细胞迁移和聚集规律的研究 被引量：9
7
作者 李碧春 陈国宏 +1 位作者 李厚达 戴子亮 《江苏农业研究》 CSCD 2000年第2期1-6,共6页
研究表明 :鸡的原始生殖细胞 ( PGCs)起源于孵化前胚盘的明区 ,而后逐渐迁移至胚体的头前侧部的生殖新月区 ,并于孵化约 2 2 h时 ,大量聚集于此 ( 3 1～ 3 8个 )。随着鸡胚内、外血管的发育 ,PGCs则进入血管中 ,并顺着血管于孵化约 3 6h... 研究表明 :鸡的原始生殖细胞 ( PGCs)起源于孵化前胚盘的明区 ,而后逐渐迁移至胚体的头前侧部的生殖新月区 ,并于孵化约 2 2 h时 ,大量聚集于此 ( 3 1～ 3 8个 )。随着鸡胚内、外血管的发育 ,PGCs则进入血管中 ,并顺着血管于孵化约 3 6h ( 1 0期 )时首次迁移到胚体上。孵化至 4 4～ 52 h ( 1 1～ 1 3期 )时聚集 (约 1 0 5个 )于胚体的心脏、大血管及头部间充质中。最后 ,PGCs于孵化 62 h( 1 7期 )时大量迁移至胚体后端生殖嵴处 ,迁移过程一直可持续到孵育第 4天。孵化 5d时 ,迁移入生殖嵴的 展开更多
关键词 鸡 原始生殖细胞 迁移 聚集 胚胎发育
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石鲽仔、幼鱼性腺发育的组织学观察 被引量：8
8
作者 王文君 王开顺 +2 位作者 邵明瑜 张全启 张志峰 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期843-848,共6页
利用组织学方法对人工培育的石鲽(Kareius bicoloratusBasiewsky)仔、幼鱼性腺发育进行研究。结果表明,性腺的发育与体长密切相关。刚孵化石鲽的原生殖细胞数目为2个,孵化3 d数目增至8个,之后经过迁移,至孵化9 d到达生殖嵴。在全长为7.2... 利用组织学方法对人工培育的石鲽(Kareius bicoloratusBasiewsky)仔、幼鱼性腺发育进行研究。结果表明,性腺的发育与体长密切相关。刚孵化石鲽的原生殖细胞数目为2个,孵化3 d数目增至8个,之后经过迁移,至孵化9 d到达生殖嵴。在全长为7.2～8.5 mm(孵化9～11 d)的仔鱼中,性腺原基中的体细胞迅速增殖并包围原生殖细胞,后者在全长10～15 mm(孵化后10～35 d)的仔幼鱼中增殖成为生殖干细胞。原始性腺在全长15～30 mm(孵化40～60 d)的幼鱼中逐渐发育完善,呈细线状,位于腹腔后部中肾管下方紧贴体壁。雌性性腺最早在全长32.5 mm(孵化66 d)的个体中出现分化特征,至全长89～102 mm时雌性性腺特征完全分化。雄性性腺的分化较雌性性腺晚,最早在全长为91 mm的幼鱼中开始,至全长为114～118 mm时雄性性腺分化特征已经十分明显。 展开更多
关键词 石鲽 原生殖细胞 性腺发育 组织学
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哺乳动物PGCs用于胚胎干细胞培养的研究 被引量：5
9
作者 韩建永 桑润滋 《黄牛杂志》 2001年第3期43-46,共4页
本文综述了哺乳动物原始生殖细胞 (PGCs)的研究进展 ;归纳了影响用 PGCs分离胚胎干细胞培养的因素 ;阐述了在 PGCs用于胚胎干细胞培养研究中存在的问题及应用前景。
关键词 哺乳动物 原始生殖细胞 胚胎干细胞 全能性细胞 培养基 饲养层 分化抑制物
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鸡胚胎原始生殖细胞体外培养 被引量：6
10
作者 谢蓓 黄海 +3 位作者 胡小芬 曹祥荣 黄启忠 李震 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期225-229,共5页
以14￣15期鸡胚血液为材料,采用Ficoll密度梯度离心方法,提取鸡胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs),在无基质细胞和基质细胞上分别进行体外培养。从实验结果可以看出:在含有胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、鸡血清(chicke... 以14￣15期鸡胚血液为材料,采用Ficoll密度梯度离心方法,提取鸡胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs),在无基质细胞和基质细胞上分别进行体外培养。从实验结果可以看出:在含有胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、鸡血清(chicken serum,CS)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人胰岛素样生长因子(hIGF-1)、小鼠白血病抑制因子(mLIF)和青、链霉素双抗的M199培养液中培养时,鸡PGCs最多能够存活4天;当采用细胞因子和5天鸡胚胎性腺基质细胞共培养时能存活23代且每代细胞增殖可达近10倍。提纯后的PGCs细胞冻存复苏后,经台盼蓝染色鉴定存活率可达80%左右。 展开更多
关键词 鸡 胚胎 原始生殖细胞 体外培养 转基因动物
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鱼类原始生殖细胞的研究进展 被引量：8
11
作者 宋卉 王树迎 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期22-23,共2页
鱼类原始生殖细胞参与生殖腺的形成,可影响性别的分化。通过对原始生殖细胞的研究可以人为地控制鱼类的性别,在畜牧业生产中有重要的实践意义。本文综述了几十年来国内外学者对鱼类原始生殖细胞的特征、起源、迁移和分化等方面的研究,... 鱼类原始生殖细胞参与生殖腺的形成,可影响性别的分化。通过对原始生殖细胞的研究可以人为地控制鱼类的性别,在畜牧业生产中有重要的实践意义。本文综述了几十年来国内外学者对鱼类原始生殖细胞的特征、起源、迁移和分化等方面的研究,旨在为鱼类生产和研究提供参考。 展开更多
关键词 鱼类 原始生殖细胞 结构 起源 迁移 性腺分化
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禽类原始生殖细胞与转基因研究进展 被引量：2
12
作者 李碧春 陈国宏 《国外畜牧科技》 2001年第3期26-30,共5页
综述了鸟类原始生殖细胞的特性、起源、迁移等以及对 PGCs进行操作和培养 。
关键词 鸡 原始生殖细胞 转基因鸡 禽类 鸟类
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影响鸡原始生殖细胞分离克隆因素的研究(简报) 被引量：9
13
作者 王娟 杜立新 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期247-250,共4页
具有多向分化潜能的胚胎干细胞有两种来源:一是来自于早期胚胎内细胞团的胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ESCs),另一种是来自于胚胎生殖腺原始生殖细胞(Primordial Germ Cells,PGCs)的胚胎生殖细胞(Embryonic Germ Cells,EGCs).
关键词 鸡 原始生殖细胞 分离 克隆 胚胎干细胞 血清浓度
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卵巢早衰患者来源的诱导多能干细胞的建系、鉴定及诱导分化 被引量：8
14
作者 文艳飞 蔡柳洪 +2 位作者 何文 曾敏慧 蒋满波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期140-145,共6页
目的:建立和鉴定卵巢早衰(又称原发性卵巢功能不全,primary ovarian insufficiency,POI)患者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),研究其向原始生殖细胞分化的潜能。方法:将表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4和Lin2... 目的:建立和鉴定卵巢早衰(又称原发性卵巢功能不全,primary ovarian insufficiency,POI)患者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),研究其向原始生殖细胞分化的潜能。方法:将表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4和Lin28基因的p EB-C5和表达SV40 T抗原的p EB-Tg质粒转染POI患者的外周血单个核细胞,将其重编程为i PSCs并检测其干细胞多能性特性。添加转化生长因子β1(transfroming growth factor-β1,TGF-β1)和骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)后,应用real-time PCR和Western blot方法分别检测原始生殖细胞标志物的mRNA及蛋白表达水平。结果:通过碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光、拟胚体及畸胎瘤形成检测,证明了POI患者外周血来源的i PSCs可成功向3胚层细胞分化并保持多能性。添加TGF-β1和BMP4后,诱导组原始生殖细胞特异性标志物干细胞生长因子受体(stem cell growth factor receptor,c-Kit)、发育多能性相关蛋白3(developmental pluripotency-associated 3,STELLA/DPPA3)和DEAD盒多肽4(DEAD box polypeptide 4,VASA/DDX4)的mRNA水平明显升高(P<0.05),VASA/DDX4蛋白表达水平亦明显增加(P<0.05)。结论:POI患者外周血单个核细胞在体外可被成功诱导成无外源性基因整合的i PSCs,并且具有多能分化特性,添加TGF-β1和BMP4后可向原始生殖细胞分化。 展开更多
关键词 原发性卵巢功能不全 诱导多能干细胞 原始生殖细胞
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鸡胚血液中原始生殖细胞的分离及其培养的研究 被引量：5
15
作者 韩毅冰 于康震 +1 位作者 周琦 秦鹏春 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第2期11-13,共3页
从孵化４８～５５小时鸡胚中抽取血液，每只胚胎可获血液２～６μｌ左右。一步法离心分离原始生殖细胞，可使其浓度由０．１％以下提高到５０％以上。将多余血细胞用微量吸管移走后，加入添加１０％胎牛血清的ＴＣＭ—１９９做为培养基... 从孵化４８～５５小时鸡胚中抽取血液，每只胚胎可获血液２～６μｌ左右。一步法离心分离原始生殖细胞，可使其浓度由０．１％以下提高到５０％以上。将多余血细胞用微量吸管移走后，加入添加１０％胎牛血清的ＴＣＭ—１９９做为培养基，３７．５℃，５％ＣＯ２，９５％空气，饱和湿度下培养，原始生殖细胞可成活２４小时左右。 展开更多
关键词 鸡 原始生殖细胞 体外培养 分离
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哺乳动物原始生殖细胞与EG细胞研究进展 被引量：1
16
作者 王英泽 常万存 +1 位作者 贾青 于永生 《黄牛杂志》 2001年第5期32-34,共3页
本文综述了哺乳动物原始生殖细胞的来源、增殖、迁移及生物学特点及近年来国内外用原始生殖细胞分离 EG细胞的研究进展 ,探讨了
关键词 哺乳动物 原始生殖细胞 EG细胞 多能性干细胞 胚胎生殖细胞 分离 克隆
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山羊胚胎原始生殖细胞的分离与培养 被引量：2
17
作者 杨继建 葛秀国 窦忠英 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第5期15-18,共4页
选择受精后30～50d的关中奶山羊胎儿为材料,参照小鼠原始生殖细胞(PGCs)分离得到了山羊的PGCs,将其分别培养在STO饲养层上,或与同源山羊成纤维细胞(GEF)及山羊睾丸支持细胞(GSCs)共培养。结果表明,3种方法均能获得类EG细胞。分离得到的... 选择受精后30～50d的关中奶山羊胎儿为材料,参照小鼠原始生殖细胞(PGCs)分离得到了山羊的PGCs,将其分别培养在STO饲养层上,或与同源山羊成纤维细胞(GEF)及山羊睾丸支持细胞(GSCs)共培养。结果表明,3种方法均能获得类EG细胞。分离得到的类EG细胞在STO饲养层上仅传4代;培养在GEF上的效果最差,传至第3代时丢失;而在GSCs上培养的效果最好,可传6代。 展开更多
关键词 山羊 原生殖细胞 胚胎干细胞
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小鼠生殖细胞的胚胎发育 被引量：4
18
作者 韩嵘 尚克刚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期77-81,共5页
本文综述了近年来小鼠胚胎发育过程中生殖细胞的起源、迁移与增殖、性别分化及其基因组修饰等方面的研究进展。小鼠生殖细胞在 7～ 7.5dpc时由原始生殖细胞 (PGC)演变而来 ,至 12 .5dpc时PGC全部迁移进入生殖嵴 ,到 13.5dpc时停止分裂。... 本文综述了近年来小鼠胚胎发育过程中生殖细胞的起源、迁移与增殖、性别分化及其基因组修饰等方面的研究进展。小鼠生殖细胞在 7～ 7.5dpc时由原始生殖细胞 (PGC)演变而来 ,至 12 .5dpc时PGC全部迁移进入生殖嵴 ,到 13.5dpc时停止分裂。Steel/c -kit信号途径在PGC迁移过程中起重要作用。生殖细胞的性别主要是由生殖腺中体细胞的微环境决定的。Y染色体上存在精子形成所必需的基因。生殖细胞的全基因组范围的重新甲基化晚于胚胎体细胞的重新甲基化 ,到 18.5dpc时才完成。雌性生殖细胞的X染色体重新活化在 14.5～ 15 .5dpc时完成 ,并且与生殖嵴的性别分化无关。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 小鼠 胚胎发育 基因组
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原始卵泡的形成与发育 被引量：4
19
作者 高辉 郁琦 徐苓 《生殖医学杂志》 CAS 2007年第6期453-456,共4页
在胚胎发育时期,原始生殖细胞形成并迁移至生殖腺,形成种系囊。卵原细胞进入减数分裂成为卵母细胞。随后种系囊分裂,单个卵母细胞与前颗粒细胞组装成原始卵泡。前泡膜细胞被募集到原始卵泡周围,原始卵泡发育并向初级卵泡转化。原始卵泡... 在胚胎发育时期,原始生殖细胞形成并迁移至生殖腺,形成种系囊。卵原细胞进入减数分裂成为卵母细胞。随后种系囊分裂,单个卵母细胞与前颗粒细胞组装成原始卵泡。前泡膜细胞被募集到原始卵泡周围,原始卵泡发育并向初级卵泡转化。原始卵泡的形成和发育是卵巢生物学的重要过程,阐释其分子和细胞机制为调节卵巢功能和治疗卵巢疾病提供方向。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 卵母细胞 原始卵泡 卵子形成
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体外获得成熟配子的研究进展和难点
20
作者 马昕芮 冯蕾 +1 位作者 孙莹璞 王海松 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期197-200,共4页
成熟配子包括来自于父本的精子和来自母本的卵子,两者发生精卵结合形成受精卵从而发育为成熟个体。体外获得成熟配子的研究目前主要集中在通过体外诱导分化胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)或诱导性多能干细胞(induced pluripoten... 成熟配子包括来自于父本的精子和来自母本的卵子,两者发生精卵结合形成受精卵从而发育为成熟个体。体外获得成熟配子的研究目前主要集中在通过体外诱导分化胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)或诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)获得成熟配子。因为多能性干细胞(pluripotent stem cells,PSCs)在体外特定条件下可以分化形成包括原始生殖细胞在内的三胚层组织,所以PSCs在体外通过诱导分化和减数分裂等过程可以获得成熟配子,进而获得后代。本文围绕成熟配子的产生过程,综述体外产生成熟配子的研究进展和需要攻克的难点。 展开更多
关键词 卵母细胞 精原细胞 减数分裂 多能性干细胞 原始生殖细胞
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