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兼并PCR技术反应条件的探索 被引量：1
1
作者 吴茜 敬永升 +2 位作者 王艺霖 刘肖肖 王洪涛 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2017年第4期272-276,共5页
[目的]探索兼并PCR技术反应的条件。[方法]依据过氧化物酶N-末端氨基酸序列设计的兼并引物,提取幼龄梨果实的DNA和RNA并将RNA反转录为cDNA,分别以DNA、cDNA和PCR产物为模板,利用PCR和琼脂糖电泳分析的方法,在不同的退火温度和引物添加... [目的]探索兼并PCR技术反应的条件。[方法]依据过氧化物酶N-末端氨基酸序列设计的兼并引物,提取幼龄梨果实的DNA和RNA并将RNA反转录为cDNA,分别以DNA、cDNA和PCR产物为模板,利用PCR和琼脂糖电泳分析的方法,在不同的退火温度和引物添加量的配比下,对PCR条件进行优化。[结果]优化了PCR反应的条件,并且得到目的基因。[结论]优化后的兼并PCR技术可以更好地应用于新基因的克隆、病毒的检测等研究领域。 展开更多
关键词 兼并引物 PCR 过氧化物酶 退火温度 引物添加量的配比
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基于blaCARB-17和toxR基因的副溶血弧菌双重PCR检测方法的建立 被引量：1
2
作者 胡元庆 林凯玲 +1 位作者 周赞虎 李凤霞 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第19期132-136,共5页
建立一种针对副溶血弧菌bla_(CARB-17)和toxR基因的双重PCR检测方法。按照副溶血弧菌的bla_(CARB-17)和toxR基因序列设计并合成引物,于同一反应体系中进行PCR扩增,优化退火温度、退火时间和引物比例,确定双重PCR的特异性和灵敏性,最后... 建立一种针对副溶血弧菌bla_(CARB-17)和toxR基因的双重PCR检测方法。按照副溶血弧菌的bla_(CARB-17)和toxR基因序列设计并合成引物,于同一反应体系中进行PCR扩增,优化退火温度、退火时间和引物比例,确定双重PCR的特异性和灵敏性,最后用实验室分离鉴定的副溶血弧菌分离株验证。结果表明:建立的双重PCR最佳退火条件是52℃30 s,引物比例1∶1,在同一体系中特异地扩增出副溶血弧菌的bla_(CARB-17)和toxR基因的303、350 bp片段,其它对照菌株均无扩增,表明该方法特异性良好。双重PCR的最低检测限达1×10~2 CFU/mL,对实验室鉴定的56个副溶血弧菌分离株验证均为阳性。建立的双重PCR方法操作简单、高效快速、特异性强,适用于副溶血弧菌的检测。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 双重PCR bla_(CARB-17)基因 toxR基因 退火温度 退火时间 引物比例
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基于两种荧光毛细管电泳平台筛选评估玉米新型SSR引物 被引量：10
3
作者 刘文彬 许理文 +5 位作者 王凤格 赵久然 冯博 赵涵 吕远大 蔚荣海 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期24-30,共7页
以93份代表自交系及27套包括杂交种及双亲在内的三联体材料为试材,分别用Qiagen和ABI3730两种DNA分析仪,从111对新型玉米SSR引物中筛选出多态性高、稳定性好、适于自动化分型的引物9对,确定1套适合SSR引物评估筛选的方案,可以为今后引... 以93份代表自交系及27套包括杂交种及双亲在内的三联体材料为试材,分别用Qiagen和ABI3730两种DNA分析仪,从111对新型玉米SSR引物中筛选出多态性高、稳定性好、适于自动化分型的引物9对,确定1套适合SSR引物评估筛选的方案,可以为今后引物设计至评估入选提供高效的筛选方案提供参考。 展开更多
关键词 玉米 DNA分析仪 新型SSR引物 引物评估筛选 入选率
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预涂金属卷材用水性环氧聚酯底漆的研制 被引量：1
4
作者 冯全芬 林安 《电镀与涂饰》 CAS CSCD 2008年第5期45-48,共4页
将水性环氧树脂、丙烯酸改性饱和聚酯树脂、氨基树脂、插层改性累托石、各种颜填料和助剂按比例制成预涂金属卷材用水性环氧聚酯底漆。讨论了不同颜基比以及不同用量的环氧树脂、颜填料、插层改性累托石和偶联剂对漆膜性能的影响。获得... 将水性环氧树脂、丙烯酸改性饱和聚酯树脂、氨基树脂、插层改性累托石、各种颜填料和助剂按比例制成预涂金属卷材用水性环氧聚酯底漆。讨论了不同颜基比以及不同用量的环氧树脂、颜填料、插层改性累托石和偶联剂对漆膜性能的影响。获得了水性环氧聚酯底漆最佳配方：环氧树脂用量占树脂总固体分的15％，锶铬黄和插层改性累托石的用量分别占颜填料用量的30％和2％～3‰硅烷偶联剂1％。所得漆膜的附着力0级，硬度2H，T弯0，耐MEK擦试70次，抗流挂性和流平性良好。 展开更多
关键词 水性环氧聚酯底漆 金属卷材 颜基比 插层改性累托石 偶联剂 防锈颜料
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