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题名人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定
被引量：2
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作者
王敏
陆祥
曾峰
檀军
侯泽宇
陈伟
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机构
遵义医科大学组织胚胎学教研室
贵州中医药大学第一附属医院
遵义医科大学第一附属医院
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出处
《遵义医学院学报》
2019年第4期448-454,共7页
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基金
国家自然科学基金资助项目(NO:81460466)
贵州省科技厅、遵义医科大学、遵义市科技局联合基金项目(NO:黔科合LH字[2014]7582)
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文摘
目的通过对人乳腺癌原代细胞组织块培养方法进行改良,建立一种快速高效可获得高纯度的人乳腺癌细胞原代培养方法,为乳腺癌深入研究提供实验基础。方法取经临床病理诊断确诊为乳腺导管原位癌患者的癌组织标本,所有样本随机分为改良组(全程正置培养瓶进行培养,原代细胞铺满瓶底50%左右,用延长酶消化时间差法一次性纯化原代细胞)和传统组(翻转培养瓶倒置孵箱1~2 h后,再正置培养瓶培养,原代细胞铺满瓶底80%~100%时,用反复酶消化时间差法纯化原代细胞)。在倒置显微镜下观察,比较两组原代细胞爬出时间、爬出数量和贴壁生长情况;细胞计数比较两组组织块培养7 d后获得贴壁细胞总数;免疫组化和流式细胞术鉴定、比较两组纯化后原代细胞的纯度;MTT法检测两组纯化培养48 h后贴壁细胞的活性。结果经改良组织块培养法2 d后,见大量细胞从组织块四周爬出,培养3 d后见爬出原代细胞贴壁生长,胞质展开,培养5 d后见细胞融合贴壁生长,铺满瓶底50%左右;而传统组织块培养法培养2 d后见少量细胞爬出,培养5 d才见少量细胞贴壁生长,培养10d后原代细胞方可铺满瓶底50%左右;人乳腺癌原代细胞培养7 d贴壁细胞总量,改良组为(9.88±0.20)×10^5个,传统组为(4.88±0.21)×10^5个;纯化后改良组细胞纯度为(99.13±0.06)%,传统组为(75.72±4.96)%;纯化培养48 h后贴壁原代细胞活性改良组为(0.86±0.03),传统组为(0.47±0.01),以上观察指标均明显高于传统组织块培养方法,有统计学意义(P<0.05)。获得的贴壁人乳腺癌原代细胞胞质展开,多呈扁平多边形,细胞体积较大,细胞核多位于细胞中央,相互衔接后呈典型的“铺路石”状,细胞结合紧密,生长分裂旺盛。结论本实验成功建立了一种高效快速获得高纯度的人原代乳腺癌细胞原代培养的方法,为进一步的实验研究奠定基础。
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关键词
乳腺癌细胞
原代培养技术
原代细胞纯化
鉴定
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Keywords
breast cancer cells
primary culture techniques
primary cell purification
identification
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分类号
R736.3
[医药卫生—肿瘤]
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题名鱼类细胞培养技术研究进展
被引量：7
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作者
艾庆辉
李庆飞
麦康森
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机构
海水养殖教育部重点实验室中国海洋大学水产学院
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出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2012年第3期122-128,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(30871930、31072222)资助
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文摘
鱼类细胞培养技术是一种重要且有潜力的生物学研究技术手段和方法。随着生物技术的发展,越来越多的鱼类细胞系(株)被建立。鱼类细胞培养的具体方法因细胞种类而异,但是总体上有共同之处。作者针对鱼类细胞培养的发展现状、应用与特点、方法技术进行综述,并为鱼类细胞培养的发展前景作出展望。
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关键词
鱼类
细胞培养
原代培养
培养技术
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Keywords
Fish Cell culture primary culture culture techniques
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分类号
S968.1
[农业科学—水产养殖]
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