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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量:43
1
作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多
关键词 玉米 自交系 转基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因
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农杆菌介导的优良玉米自交系遗传转化体系的建立 被引量:7
2
作者 张艳贞 魏松红 +2 位作者 胡汉桥 王军军 王罡 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第3期195-199,共5页
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,转化率为1.68 %~4.44%。本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化 ,结果表明 :比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5;预培养有利于幼胚转化 ,预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜 ; 展开更多
关键词 农杆菌介导 玉米 自交系 遗传转化体系 转基因 苏云金芽孢杆菌 预培养 共培养
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血清预培养促进神经干细胞的增殖 被引量:8
3
作者 历俊华 郑淑荣 +1 位作者 万虹 张绍东 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第5期339-340,共2页
目的介绍一种时间短、花费少的神经干细胞培养方法。方法先用含10%胎牛血清的DMEM培养液预培养神经干细胞48 h,换含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液继续培养干细胞球。血清诱导分化后行nestin免疫荧光染色... 目的介绍一种时间短、花费少的神经干细胞培养方法。方法先用含10%胎牛血清的DMEM培养液预培养神经干细胞48 h,换含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液继续培养干细胞球。血清诱导分化后行nestin免疫荧光染色。结果血清预培养48 h后即可见神经干细胞聚球,nestin免疫荧光染色为阳性。结论血清预培养可使神经干细胞聚球速度加快,促进神经干细胞增殖。 展开更多
关键词 神经干细胞 预培养 血清 增殖
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向日葵列当寄生机理研究进展 被引量:9
4
作者 赵长山 黄长权 +1 位作者 刘燕 何付丽 《中国农学通报》 CSCD 2013年第6期1-5,共5页
总结归纳了温度、渗透势、预培养时间、生长调节物质及光照等预培养条件对向日葵列当种子萌发的影响,并对刺激向日葵列当种子萌发的信号物质和其吸器形成的诱导物质进行了综述,提出了向日葵列当寄生机理研究中存在的问题,如种子萌发机... 总结归纳了温度、渗透势、预培养时间、生长调节物质及光照等预培养条件对向日葵列当种子萌发的影响,并对刺激向日葵列当种子萌发的信号物质和其吸器形成的诱导物质进行了综述,提出了向日葵列当寄生机理研究中存在的问题,如种子萌发机制不明确、萌发信号物质的分离与鉴定手段有待改进以及向日葵列当与向日葵间的识别机制问题等,同时对研究前景进行了展望。 展开更多
关键词 向日葵列当 寄生机理 预培养 萌发机理 吸器
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高效酿酒微生物菌剂的生产应用试验 被引量:8
5
作者 王蓉 张磊 张文学 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第3期177-179,共3页
为了有效提高白酒生产中原材料的利用率,增加出酒率,在成都市邛崃某酒厂进行了多次生产规模试验,在不改变传统酿造发酵工艺的前提下与现代生物技术相结合,在白酒生产过程中引进前培养阶段。最终使试验窖池的产酒量提高了44%,同时白酒品... 为了有效提高白酒生产中原材料的利用率,增加出酒率,在成都市邛崃某酒厂进行了多次生产规模试验,在不改变传统酿造发酵工艺的前提下与现代生物技术相结合,在白酒生产过程中引进前培养阶段。最终使试验窖池的产酒量提高了44%,同时白酒品质也得到一定程度的提高。 展开更多
关键词 白酒 生物工程 前培养 产酒量 品质
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优化农杆菌介导基因转化效率因子分析 被引量:4
6
作者 刘彩萍 曾炳山 +2 位作者 裘珍飞 李湘阳 刘英 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第3期1141-1143,1202,共4页
共培养法是农杆菌介导转基因比较常用的方法之一。建立一个高效的遗传转化体系,除了确定抗生素种类,菌种和菌液浓度,预培养和共培养时间等基本因子外,优化影响转化的因子非常重要。主要介绍和分析共培养法中可能优化的影响基因转化因子... 共培养法是农杆菌介导转基因比较常用的方法之一。建立一个高效的遗传转化体系,除了确定抗生素种类,菌种和菌液浓度,预培养和共培养时间等基本因子外,优化影响转化的因子非常重要。主要介绍和分析共培养法中可能优化的影响基因转化因子,为提高农杆菌介导转化率提供了方法和依据。 展开更多
关键词 农杆菌 预培养 侵染液 接种 共培养
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Effect of pre-culture on virus elimination from in vitro apple by thermotherapy coupled with shoot tip culture 被引量:3
7
作者 HU Guo-jun DONG Ya-feng +3 位作者 ZHANG Zun-ping FAN Xu-dong REN Fang LI Zheng-nan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第9期2015-2023,共9页
We evaluated the role of pre-culture on survival rate of in vitro apple plants treated by thermotherapy. Two apple cultivars, Malusxdomestica cv. Pink Lady and Huafu, were used in the experiment and both have widely g... We evaluated the role of pre-culture on survival rate of in vitro apple plants treated by thermotherapy. Two apple cultivars, Malusxdomestica cv. Pink Lady and Huafu, were used in the experiment and both have widely grown in China and infected with Apple chlorotic leafspot virus (ACLSV) and Apple stem grooving virus (ASGV). Results in growth and virus titer of apple plants did not exhibit clear trends during five different periods of pre-culture. Whilst, pre-culture increased the survival rate of the two cultivars during thermotherapy. The survival rate of plants pre-cultured for 13 d (P-13d) was 14 and 51% higher than that of P-ld plants for Pink Lady and Huafu, respectively. Moreover, pre-culture positively influenced regeneration of Huafu plants. The average survival rate of plants regenerated from P-ld and P-4d was 20% lower than that regenerated from P-7d, P-10d, and P-13d. The efficiency of virus eradication was determined by reverse-transcription PCR with two primer pairs for each virus, and the detection results showed that pre-culture scarcely affected apple virus elimination. Despite the fact that the two viruses were hardly detected at 5 d of thermotherapy, no virus-free plants were found in the two cultivars of regenerated apple plantlets after 30-d treatment. 展开更多
关键词 APPLE in vitro culture pre-culture THERMOTHERAPY virus elimination
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人体肠道细菌寡营养培养组条件的优化研究
8
作者 黄自然 韩妮 +6 位作者 常宇骁 李蕙敏 丁磊 谭亚芳 毕玉晶 杨瑞馥 吴家红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3641-3652,共12页
【目的】探讨寡营养对人体肠道细菌培养组的条件。【方法】通过稀释富集培养基、固体平板和增菌肉汤培养基成分获得寡营养培养基。对健康人粪便样本分别用原液(0)、5、10、20、30和40倍稀释的富集培养基(添加羊血和瘤胃液的血培养瓶)连... 【目的】探讨寡营养对人体肠道细菌培养组的条件。【方法】通过稀释富集培养基、固体平板和增菌肉汤培养基成分获得寡营养培养基。对健康人粪便样本分别用原液(0)、5、10、20、30和40倍稀释的富集培养基(添加羊血和瘤胃液的血培养瓶)连续增菌,在不同时间点(第0、3、6、9、15、27、30天)吸取增菌液,用YCFA(yeast casitone fatty acid)固体培养平板分离菌落;用YCFA增菌肉汤增菌后再次挑取单菌落,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF)质谱和16S rRNA基因测序鉴定菌株。通过比较上述6种寡营养条件分离肠道菌群的效果,选取富集培养基原液、稀释10倍和30倍这3种条件下分离效果较好的富集条件,与同样稀释倍数条件的固体平板和增菌肉汤分别组合成9种培养基条件,进一步优化肠道菌群的培养组条件。【结果】在6种寡营养富集培养基中,未稀释(原液)、10倍和30倍稀释的富集培养基分离细菌的种类比其他稀释倍数多,其中10倍稀释的富集培养基分离细菌种数最多;同时除去原液,仅在寡营养条件中分离细菌为24种。在进一步优化固体培养基平板和增菌肉汤下,发现原液富集培养基-10倍稀释的固体平板和增菌肉汤培养基、10倍稀释的富集培养基-原液或10倍稀释的固体平板和增菌肉汤培养基这3个组合分离的细菌种数较多;除去原液,仅在寡营养条件中分离细菌为20种,其中10倍稀释的富集培养基-原液的固体平板和增菌肉汤培养基分离的菌种数最多。【结论】通过稀释富集培养基、固体平板和增菌肉汤培养基成分获得的寡营养培养条件,能够分离出约40%的常规培养条件分离不到的细菌,为从人体肠道微生物群分离更多的菌种提供了有效的方法。 展开更多
关键词 肠道菌群 寡营养 预培养 培养组学
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牡丹愈伤组织增殖及褐化研究 被引量:4
9
作者 程雨飞 朱向涛 +4 位作者 季雯 洪尔蔓 林芯 范贞 张俊丽 《广东农业科学》 CAS 2019年第6期30-36,共7页
【目的】提高牡丹愈伤组织增殖倍数和质量,减轻增殖过程中的褐化现象,为牡丹愈伤组织增殖提供途径。【方法】以牡丹胚轴、子叶愈伤组织为材料,对不同添加物组合及浓度、不同预培养时间等方法手段进行探究。【结果】牡丹胚轴愈伤组织继... 【目的】提高牡丹愈伤组织增殖倍数和质量,减轻增殖过程中的褐化现象,为牡丹愈伤组织增殖提供途径。【方法】以牡丹胚轴、子叶愈伤组织为材料,对不同添加物组合及浓度、不同预培养时间等方法手段进行探究。【结果】牡丹胚轴愈伤组织继代增殖最佳培养基组合是PVP1.0g/L+IAA0.2mg/L+TDZ1.0mg/L+GA31.0mg/L,增殖倍数为5.75;子叶愈伤组织继代增殖的最佳培养基组合是PVP2.0g/L+IAA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L+GA31.0mg/L,增殖倍数为5.50。采用预培养30d的外植体,可有效提高增殖倍数并减轻褐化。1.0mg/LGA3有利于抑制愈伤组织增殖过程中的褐化现象,并促进愈伤组织增殖。呈淡黄绿色表面附着絮状物且质地松软的愈伤组织在继代增殖过程中不易褐化,且中后期体积增殖变化明显。【结论】牡丹愈伤组织增殖中加入1.0mg/LGA3和采用预培养30d的愈伤组织,可以获得较高的增殖倍数并有效抑制褐化,呈淡黄绿色且质地松软的愈伤组织是良好的愈伤组织增殖状态。 展开更多
关键词 牡丹 愈伤组织 继代增殖 预培养 褐化 赤霉素
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低频再生黄瓜离体培养体系的优化 被引量:3
10
作者 李富童 程智慧 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2020年第5期81-87,共7页
【目的】优化低频再生黄瓜离体培养体系,为黄瓜遗传转化体系的进一步完善奠定基础。【方法】以低频再生黄瓜种质Q24和L66为材料,分别以黄瓜的子叶、子叶节和下胚轴为外植体,研究外植体类型对黄瓜再生频率的影响;在MS培养基中添加不同质... 【目的】优化低频再生黄瓜离体培养体系,为黄瓜遗传转化体系的进一步完善奠定基础。【方法】以低频再生黄瓜种质Q24和L66为材料,分别以黄瓜的子叶、子叶节和下胚轴为外植体,研究外植体类型对黄瓜再生频率的影响;在MS培养基中添加不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和脱落酸(ABA),研究激素配比对黄瓜再生频率的影响;将获得的黄瓜子叶节外植体置于1/2 MS培养基上预培养0,1,2,3和4 d,研究预培养处理对黄瓜再生频率的影响。【结果】不同基因型黄瓜再生频率差异显著,其中Q24整体上具有相对较高的再生频率,其子叶节再生频率为54.8%,下胚轴再生频率为50.0%;L66的再生频率相对较低,其子叶节再生频率为36.9%,下胚轴再生频率为16.7%。激素配比显著影响黄瓜子叶节外植体的再生频率,其中1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对Q24子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到60.7%;2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对L66子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到42.9%。预培养处理可显著提高L66子叶节的再生频率,经过1~3 d预培养,其再生频率逐渐增加并达到最高(32.1%),4 d后再生频率开始降低;Q24子叶节经3 d预培养再生频率达到最高,为27.4%,但与对照相比差异不显著。【结论】Q24子叶节外植体最适激素配比为1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后其再生频率可达60.7%;L66子叶节外植体最适激素配比为2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后再生频率可达42.9%。 展开更多
关键词 黄瓜 离体培养 低频再生 外植体类型 植物激素 预培养
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孢子预培养与形态控制提高柠檬酸生产效率 被引量:2
11
作者 金赛 孙福新 +4 位作者 胡志杰 李由然 堵国成 石贵阳 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期1-7,共7页
现有柠檬酸生产以黑曲霉孢子直接接种,种子延滞期长,发酵水平波动大。针对上述问题,提出孢子预培养策略缩短种子培养周期,通过颗粒物添加和振荡分散调控菌丝球形态均一性。研究获得了最适的孢子预培养条件:碳源为葡萄糖,氮源为玉米浆,Ca... 现有柠檬酸生产以黑曲霉孢子直接接种,种子延滞期长,发酵水平波动大。针对上述问题,提出孢子预培养策略缩短种子培养周期,通过颗粒物添加和振荡分散调控菌丝球形态均一性。研究获得了最适的孢子预培养条件:碳源为葡萄糖,氮源为玉米浆,Ca^(2+)浓度为10 mmol/L,初始pH为5.0,温度为35℃,初始孢子浓度为0.8×10^(7) CFU/mL,在有氧条件下培养10 h。研究发现,孢子萌发前,颗粒物对孢子凝聚和菌丝球形态影响显著(P<0.05),发芽孢子的凝聚对最终菌丝球形态起决定性作用。同时,小菌丝球会导致发酵产酸速率显著提高(P<0.05)。最后,在5000 L规模工艺放大中,种子培养周期缩短12 h以上,成球率增加了18.3%,最大产酸速率提高了7.5%,发酵强度增加0.14 g/(L·h),发酵周期缩短2 h,糖酸转化率升高1.2%。该研究对提升柠檬酸生产效率具有重要参考意义。 展开更多
关键词 黑曲霉 柠檬酸 预培养 孢子萌发 形态控制
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影响大麦植株再生及基因枪转化因素的研究 被引量:2
12
作者 任江萍 王新国 +2 位作者 李磊 卫丽 尹钧 《山地农业生物学报》 2004年第5期377-380,共4页
以 2个澳大利亚啤酒大麦品种为供试材料 ,研究了基因转化和植株再生过程中Cu2 + 浓度、不同受体材料、高渗处理对基因转化频率的影响。结果表明 ,Cu2 + 浓度为 5 0 μmol·L-1时可以显著地促进胚性愈伤组织的形成及植株再生 ;预培... 以 2个澳大利亚啤酒大麦品种为供试材料 ,研究了基因转化和植株再生过程中Cu2 + 浓度、不同受体材料、高渗处理对基因转化频率的影响。结果表明 ,Cu2 + 浓度为 5 0 μmol·L-1时可以显著地促进胚性愈伤组织的形成及植株再生 ;预培养 9d的幼胚愈伤组织作为受体材料其愈伤组织的抗性率明显高于剥取当天和预培养 3~ 4d的幼胚 ;基因枪轰击前 6h和轰击后 18h ,用 0 5mol·L-1的甘露醇进行渗透处理 。 展开更多
关键词 大麦 植株再生 基因枪转化 预培养 渗透处理 愈伤组织
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影响白菜型油菜下胚轴外植体芽高频率再生的因素 被引量:2
13
作者 骞宇 《重庆教育学院学报》 2006年第6期13-15,共3页
本试验以白菜型油菜(B.campestris)“浠水白”下胚轴为外植体,分析讨论了苗龄、预培养、激素浓度、AgNO3等因素对下胚轴的再生条件的影响。实验表明:11d(天)苗龄的外植体出愈率很高;3天的预培养有利于外植体长芽;MS+1mg/L(毫克/升)6-BA+... 本试验以白菜型油菜(B.campestris)“浠水白”下胚轴为外植体,分析讨论了苗龄、预培养、激素浓度、AgNO3等因素对下胚轴的再生条件的影响。实验表明:11d(天)苗龄的外植体出愈率很高;3天的预培养有利于外植体长芽;MS+1mg/L(毫克/升)6-BA+1mg/L(毫克/升)2,4-D+0.1mg/L(毫克/升)NAA时芽的分化率最高;AgNO3可减少外植体芽的褐化,提高下胚轴芽的分化率;调节激素的适当配比、控制温度等措施可以减少外植体芽玻璃化现象。 展开更多
关键词 愈伤组织 下胚轴 外植体 预培养
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脂肪干细胞通过旁分泌作用改善异种脱细胞真皮基质体内植入效果的机制研究
14
作者 朱朱 袁兆琪 +2 位作者 黄成 杨军 罗旭松 《组织工程与重建外科杂志》 2018年第6期306-310,共5页
目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)在异种脱细胞真皮基质(HADM)微环境中能否有效发挥其旁分泌功能,从而改善HADM体内植入的效果。方法将ADSCs分别接种于HADM及培养皿上。分别收集两组细胞的总RNA,通过q RT-PCR检测ADSCs旁分泌基因的表达。将AD... 目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)在异种脱细胞真皮基质(HADM)微环境中能否有效发挥其旁分泌功能,从而改善HADM体内植入的效果。方法将ADSCs分别接种于HADM及培养皿上。分别收集两组细胞的总RNA,通过q RT-PCR检测ADSCs旁分泌基因的表达。将ADSCs预处理前后的HADM分别植入大鼠体内,4周后取材行组织学观察。结果在HADM上培养的ADSCs与在普通培养皿上培养的ADSCs相比,其促血管形成因子(VEGF、HGF、bFGF)、炎症调节因子(TGF-β、i NOS、TSG-6、COX-2)及干性因子(SOX-2)均有所上调。经ADSC体外预培养后的HADM与未经处理的HADM相比,体内植入后表现出更好的血管化能力且炎症反应也更低。结论 HADM能为ADSCs发挥旁分泌作用提供合适的微环境,且HADM经过ADSCs体外预培养,其血管化程度更高,而炎症反应则得以缓解及局限化。 展开更多
关键词 异种脱细胞真皮基质 脂肪干细胞 体外预培养 旁分泌
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油菜农杆菌介导转化体系的优化
15
作者 张姗姗 耿思宇 +1 位作者 徐培林 王景雪 《山西农业科学》 2019年第8期1295-1299,共5页
以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3d,可明... 以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3d,可明显提高子叶外植体和下胚轴外植体出愈率和抗性芽苗分化率,有利于获得较高的转化效率;在基因转化中,AgNO3的最佳使用浓度为30μmol/L,最佳的农杆菌侵染菌液OD600为0.4,共培养基pH值5.4是油菜农杆菌介导转化中优化的转化条件。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 农杆菌 遗传转化 预培养
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用包埋脱水法冰冻保存两种硅藻——预培养对包埋脱水法冰冻保存两种硅藻存活率的影响
16
作者 李莹 李刚 《鞍山师范学院学报》 2005年第6期68-70,共3页
采用包埋脱水法冰冻保存牟氏角刺藻(Chaetocerosmuelleri)、小新月菱形藻(Nitzschiaclosteriumminutissimai),探讨了预培养对两种硅藻存活率的影响.结果表明,用0.6M的蔗糖预培养时,牟氏角刺藻冰冻后的存活率有提高,最大可提高7.2%.但预... 采用包埋脱水法冰冻保存牟氏角刺藻(Chaetocerosmuelleri)、小新月菱形藻(Nitzschiaclosteriumminutissimai),探讨了预培养对两种硅藻存活率的影响.结果表明,用0.6M的蔗糖预培养时,牟氏角刺藻冰冻后的存活率有提高,最大可提高7.2%.但预培养对小新月菱形藻的存活率没有明显提高. 展开更多
关键词 牟氏角刺藻 小新月菱形藻 包埋脱水法 冰冻(超低温)保存 预培养
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甘蓝型黑籽油菜遗传转化中预培养环节的优化
17
作者 林呐 刘梅 丁凌 《安徽农业科学》 CAS 2014年第20期6556-6559,6572,共5页
[目的]对甘蓝型黑籽油菜遗传转化中预培养环节进行优化。[方法]利用甘蓝型黑籽油菜下胚轴为外植体,对油菜下胚轴的预培养及其浸染后影响再生和分化情况进行研究,分别从苗龄、激素两方面讨论了下胚轴再生与分化频率的影响。[结果]苗龄、... [目的]对甘蓝型黑籽油菜遗传转化中预培养环节进行优化。[方法]利用甘蓝型黑籽油菜下胚轴为外植体,对油菜下胚轴的预培养及其浸染后影响再生和分化情况进行研究,分别从苗龄、激素两方面讨论了下胚轴再生与分化频率的影响。[结果]苗龄、激素与遗传转化之间存在密切的联系。在农杆菌介导的油菜下胚轴预培养最佳体系是:4 d苗龄的外植体在农杆菌侵染前进行5 d预培养,预培养基是MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 4.0 mg/L。绿色抗性愈伤组织获得GUS瞬时表达,PCR鉴定再生植株为转基因植株。[结论]该研究获得了最佳的预培养条件,为建立一个高效的遗传转化体系奠定基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 遗传转化 预培养
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低温预处理和低温预培养对苜蓿新品系花药愈伤组织诱导的影响 被引量:20
18
作者 马菊兰 张博 《中国草地学报》 CSCD 2007年第6期59-63,共5页
对低温预处理和低温预培养苜蓿新品系花药培养的效应进行研究,4℃低温预处理和15℃低温预培养小孢子发育处于单核中期到单核靠边期的花药,以提高苜蓿花药愈伤组织诱导率。结果表明,4℃低温预处理2~4d和15℃低温预培养3d,均可以显著提... 对低温预处理和低温预培养苜蓿新品系花药培养的效应进行研究,4℃低温预处理和15℃低温预培养小孢子发育处于单核中期到单核靠边期的花药,以提高苜蓿花药愈伤组织诱导率。结果表明,4℃低温预处理2~4d和15℃低温预培养3d,均可以显著提高愈伤组织诱导率。 展开更多
关键词 苜蓿 花药培养 低温预处理 低温预培养 愈伤组织诱导率
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农杆菌培养方式和预培养基激素配比对甘蓝型油菜下胚轴转化效应分析 被引量:13
19
作者 孙洁 黄团 +3 位作者 李加纳 殷家明 柴友荣 丁彩霞 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期49-53,共5页
利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜"华双4号"下胚轴,通过组织化学染色法检测报告基因gus的表达情况,研究了农杆菌培养方式和预培养基激素配比对转化效果的影响.结果表明,用LB培养基活化后的农杆菌再用添加AS的MS培养液继... 利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜"华双4号"下胚轴,通过组织化学染色法检测报告基因gus的表达情况,研究了农杆菌培养方式和预培养基激素配比对转化效果的影响.结果表明,用LB培养基活化后的农杆菌再用添加AS的MS培养液继续培养6~30h对转化有明显的促进作用;不同的农杆菌培养方式对转化的影响有明显的差异,在试验的6种农杆菌培养方式中s2-5的转化效果最好,即收集活化后的农杆菌用MS+AS+抗生素重悬培养24h,再用MS+AS培养6h;2,4-D与6BA之间的相互作用对转化有重要影响,在试验的预培养基激素组合中,2,4-D2.00mg/L6BA0.25mg/L的组合转化效率最高;抗性愈伤率与转化效率之间不一定具有相关关系. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 下胚轴 农杆菌培养方式 预培养基 转化
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南亳地理之我见 被引量:4
20
作者 宋豫秦 《中原文物》 2001年第6期45-47,共3页
古文献有关南亳的记述,目前尚不可完全相信,也不可完全否定,重要的是努力寻找考古证据。如果南亳确实存在,其文化应是漳河型一类先商文化。
关键词 南亳地理 先商文化 岳石文化 中国 考古证据
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