期刊文献+
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建 被引量:5
1
作者 李俊 刘信 +5 位作者 曹应龙 武玉花 厉建萌 吴刚 张丽 卢长明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期639-647,共9页
植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以... 植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以满足我国植酸酶转基因作物监管需要。此外,我们将6种主要农作物(小麦、水稻、棉花、大豆、玉米和油菜)的内标准基因和植酸酶基因克隆到同一载体上,构建成了阳性质粒分子pBS Endogenous-phytase。该质粒分子适用于这6种作物中植酸酶基因的筛查检测。本研究为转植酸酶基因作物的安全监管提供了阳性材料和检测方法。 展开更多
关键词 转基因检测 植酸酶基因 定性PCR 阳性质粒分子
下载PDF
转基因油菜筛查阳性质粒分子的研制及应用 被引量:4
2
作者 李俊 李夏莹 +7 位作者 王颢潜 翟杉杉 陈子言 高鸿飞 李允静 吴刚 张秀杰 武玉花 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1322-1337,共16页
【目的】转基因油菜是四大转基因作物之一,是中国转基因生物安全监管的重要对象,转基因检测为转基因安全监管提供技术支撑。转基因筛查是转基因检测的第一步,筛查靶标设置不合理会导致漏检部分转基因成分。建立转基因油菜筛查策略,并研... 【目的】转基因油菜是四大转基因作物之一,是中国转基因生物安全监管的重要对象,转基因检测为转基因安全监管提供技术支撑。转基因筛查是转基因检测的第一步,筛查靶标设置不合理会导致漏检部分转基因成分。建立转基因油菜筛查策略,并研制与筛查策略配套的阳性质粒分子,将为中国的转基因油菜安全监管提供强有力的技术支撑。【方法】通过收集数据库中登记的转基因油菜品种的外源基因元件信息,分析转基因油菜品种中常用的调控元件和标记基因,基于最大筛查覆盖率原则,确定转基因油菜的筛查靶标。通过检索数据库或查询专利,收集筛查元件的核苷酸序列。一个筛查元件通常有多个标准方法,查阅各筛查元件的检测标准,分析各标准中普通PCR引物对和实时荧光PCR引物/探针组合在筛查元件核苷酸序列中的位置,根据引物探针的结合位点,确定拟构建到质粒上的各筛查元件的核苷酸序列。人工合成各筛查元件和油菜内标基因的融合序列,克隆到常用质粒pUC18,构建阳性质粒分子。采用各筛查元件的普通PCR和实时荧光PCR方法,评估阳性质粒分子的适用性。【结果】建立了转基因油菜的筛查策略,通过检测CaMV 35S启动子、FMV 35S启动子、Bar、PAT、CP4-EPSPS、NPTⅡ、HPT、NOS终止子和PinⅡ终止子共9个基因元件,可实现已知信息转基因油菜品种的全覆盖。构建出聚合9个筛查元件和2个油菜内标基因HMG I/Y和CruA的转基因油菜筛查质粒分子pYCSC-1905。9个筛查元件和2个油菜内标基因的扩增效率均在90%—110%,证明质粒分子上的不同靶标序列没有相互干扰,影响PCR的扩增效率。质粒分子pYCSC-1905可用作9个筛查元件和2个油菜内标基因的通用阳性对照,适用于国家标准(GB/T和农业农村部公告)、出入境检验检疫行业标准(SN/T)和欧盟标准。【结论】提出的转基因油菜筛查策� 展开更多
关键词 转基因油菜 筛查 筛查策略 阳性质粒分子 应用
下载PDF
三种植物源性成分阳性质粒的构建及检测方法的验证 被引量:3
3
作者 翟清燕 任易婕 +1 位作者 郑世超 霍胜楠 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期237-241,共5页
植物蛋白饮料含有丰富的营养成分,深受广大消费者的喜爱。但由于利益驱使,掺假现象也逐年增加。针对此现象构建了核桃、花生、大豆3种植物成分的阳性质粒分子,对3种阳性质粒分子的特异性和灵敏度进行了验证,并对实时荧光PCR反应体系中... 植物蛋白饮料含有丰富的营养成分,深受广大消费者的喜爱。但由于利益驱使,掺假现象也逐年增加。针对此现象构建了核桃、花生、大豆3种植物成分的阳性质粒分子,对3种阳性质粒分子的特异性和灵敏度进行了验证,并对实时荧光PCR反应体系中不同品牌PCR预混液效果进行了对比分析。结果表明,构建的核桃、花生、大豆阳性质粒分子均具有特异性强、灵敏度高等特点,检验灵敏度均可达到10-5 ng/μL;标准曲线扩增效率分别为93.299%、123.623%和132.975%,且相关线性系数R 2均在0.99以上。综上所述,3种品牌的PCR预混液均具有很高的灵敏度,均可以满足核桃、花生和大豆日常检验工作的要求,对于植物源性成分的鉴定具有重要意义。 展开更多
关键词 阳性质粒分子 特异性 灵敏度 PCR预混液
下载PDF
两种动物源性成分阳性质粒分子的构建与检测方法的建立
4
作者 翟清燕 郑世超 霍胜楠 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第10期110-115,共6页
旨在构建水貂、紫貂两种成分的阳性质粒分子,对该方法的特异性和灵敏度进行验证,同时对3家公司合成的引物、探针进行比较,对实时荧光PCR反应体系进行优化。结果表明,该检测方法具有较好的特异性和较高的灵敏度,所选择的3家公司的引物、... 旨在构建水貂、紫貂两种成分的阳性质粒分子,对该方法的特异性和灵敏度进行验证,同时对3家公司合成的引物、探针进行比较,对实时荧光PCR反应体系进行优化。结果表明,该检测方法具有较好的特异性和较高的灵敏度,所选择的3家公司的引物、探针均具有较高的检出限,为貂成分检测提供一个新型阳性对照,解决了阳性物质难获取的问题。 展开更多
关键词 阳性质粒分子 特异性 灵敏度 引物 探针
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部