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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M蛋白的真核表达及免疫原性评价 被引量:1
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作者 娄慧聪 林润山 +4 位作者 李亚波 赵雨娜 焦鹏涛 罗廷荣 刘文军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4809-4823,共15页
为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的流行及进化情况并开发针对流行谱系的亚单位疫苗,对2001-2021年间分离于我国的PRRSV毒株进行遗传进化分析,选用优势流行谱系代表毒株,... 为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的流行及进化情况并开发针对流行谱系的亚单位疫苗,对2001-2021年间分离于我国的PRRSV毒株进行遗传进化分析,选用优势流行谱系代表毒株,优化其GP5和M蛋白的基因序列,与干扰素(interferon,IFN)和免疫球蛋白的Fc区串联后,构建真核表达质粒pCDNA3.4-IFNα-GP5-Fc和pCDNA3.4-IFNα-M-Fc,并使用HEK293T真核表达系统表达重组蛋白IFNα-GP5-Fc和IFNα-M-Fc。将2种重组蛋白与ISA206VG佐剂混匀,免疫断奶仔猪,通过酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbentassay,ELISA)及中和试验评价体液免疫水平,酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)评价细胞免疫水平。试验结果表明,NADC30-like谱系为近年我国主要流行的谱系,IFNα-GP5-Fc和IFNα-M-Fc组合免疫仔猪能诱导高水平的抗体和细胞免疫,该研究为制备更为安全有效的新型PRRSV亚单位疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征(prrs) 遗传进化分析 GP5重组蛋白 M重组蛋白 免疫原性评价
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检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA方法的建立 被引量:17
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作者 蔡雪晖 郭宝清 +3 位作者 柴文君 刘文兴 翁长江 刘光清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期122-125,共4页
本试验通过差速离心法和非线性蔗糖密度梯度离心法纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)。经三氯_三氟乙烷处理后 ,作为ELISA试验的标准抗原 ,并建立了检测PRRSV抗体ELISA方法。该方法与IFA、IPMA和国外同类商品化试剂盒进行了对比试验 ... 本试验通过差速离心法和非线性蔗糖密度梯度离心法纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)。经三氯_三氟乙烷处理后 ,作为ELISA试验的标准抗原 ,并建立了检测PRRSV抗体ELISA方法。该方法与IFA、IPMA和国外同类商品化试剂盒进行了对比试验 ,表明该方法具有敏感性高、特异性好的特点 ,是一种快速准确检测PRRSV抗体的方法。间接ELISA方法在敏感性上要优于IFA和IPMA。 展开更多
关键词 间接ELISA prrsV 抗体检测 敏感性 诊断
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