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基于胞内劳森菌重组flgE蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
廖荣莉
郑金
+6 位作者
熊梦霞
罗灵芝
赵墩
周阳
唐红剑
葛猛
余兴龙
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期150-157,共8页
为建立以胞内劳森菌(LI)重组鞭毛钩基体复合蛋白flgE为包被抗原的间接ELISA检测方法,本研究将flgE基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-flgE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导后获得了可溶性表达的flg...
为建立以胞内劳森菌(LI)重组鞭毛钩基体复合蛋白flgE为包被抗原的间接ELISA检测方法,本研究将flgE基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-flgE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导后获得了可溶性表达的flgE重组蛋白。以纯化的重组flgE蛋白为包被抗原,经优化各反应条件后建立了检测LI抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果显示所建立的ELISA方法与CSFV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV、Mhp和APP等阳性血清均无交叉反应。该方法能检测到1600倍稀释的LI阳性血清,批内和批间变异系数均小于10%。利用该方法检测多个不同类型猪场的猪血清(血清来源:2个种猪场1~5胎次的母猪;3个商品猪场30日龄~140日龄的猪;仔猪30头,从30日龄跟踪至80日龄,共采集4次血清),结果显示,母猪和育肥猪的感染率较高可达100%;母源抗体下降后,自50日龄~70日龄起到育肥猪阶段,LI阳性率和抗体水平随着日龄的增长而不断上升;30头跟踪仔猪在单独密闭的饲养条件下,从开始到全群感染LI所需的时间较短(35 d左右)。这些结果与目前已报道的LI血清流行病学调查研究一致,表明该方法能较准确反映LI感染猪的抗体水平。上述结果表明本研究建立的间接ELISA抗体检测方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性,可初步用于临床LI血清流行病学的调查。
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关键词
猪增生性肠病
胞内劳森菌
鞭毛蛋白flgE
间接ELISA
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职称材料
猪增生性肠炎套式PCR检测方法的建立及初步应用
被引量:
5
2
作者
张文波
戴益民
+4 位作者
蒋新华
胡杨
徐昌满
陈松昌
邓舜洲
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第4期102-106,共5页
本试验旨在建立检测猪增生性肠炎(porcine proliferative enteropathy,PPE)的套式PCR方法,为临床快速鉴别诊断和防控该病提供病原学依据。根据GenBank上已发表的的劳森氏胞内菌(Lawsonia intracellularis,LI)的基因组序列(登录号:AM1802...
本试验旨在建立检测猪增生性肠炎(porcine proliferative enteropathy,PPE)的套式PCR方法,为临床快速鉴别诊断和防控该病提供病原学依据。根据GenBank上已发表的的劳森氏胞内菌(Lawsonia intracellularis,LI)的基因组序列(登录号:AM180252)设计2对特异性引物,以疑似PPE病猪粪便中纯化的DNA为模板,建立了套式PCR方法,并对PCR产物进行序列测定,所扩增的序列与GenBank上登录的劳森氏胞内菌相应序列的同源性在99%以上。应用本试验建立的套式PCR方法对疑似PPE病猪的粪便进行检测,结果表明,本方法具有快速、方便和敏感度高等优点,可用于PPE的临床检测。
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关键词
猪增生性肠炎
劳森氏胞内菌
套式PCR
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职称材料
猪增生性肠炎研究进展
被引量:
3
3
作者
李放皓
雷红宇
+3 位作者
蒋艳成
雷然潇
张熠
苏建明
《中兽医医药杂志》
2015年第6期23-26,共4页
猪增生性肠炎是由胞内劳森菌引起的一种接触性传染病,以肠道增生为主要特征,其临床表现为腹泻、日增重量下降、生长缓慢等,病理变化主要为肠道出血、肠壁增厚、肠黏膜增厚、隐窝上皮细胞增生。该病传播范围广,发病率高,呈世界流行性趋势...
猪增生性肠炎是由胞内劳森菌引起的一种接触性传染病,以肠道增生为主要特征,其临床表现为腹泻、日增重量下降、生长缓慢等,病理变化主要为肠道出血、肠壁增厚、肠黏膜增厚、隐窝上皮细胞增生。该病传播范围广,发病率高,呈世界流行性趋势,严重影响猪场经济效益。本文对其病原、发病机理、流行病学、临床症状与病变、诊断方法和防治措施等进行综述。
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关键词
猪增生性肠炎
胞內劳森茵
发病机理
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职称材料
枝原淨~对猪增生性肠炎的防治效果评价
4
作者
杲向荣
王建
+3 位作者
齐新永
葛菲菲
乔健
杨志彪
《中国动物传染病学报》
CAS
2012年第1期59-63,共5页
本研究评估了枝原淨~产品(活性成分:延胡索酸泰妙菌素)治疗由胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎(porcineproliferative enteropathy,PPE)的临床效果。枝原淨~用药组(拌料或饮水)与感染不用药组比较,投药14 d后,粪便中胞内劳森菌的PCR...
本研究评估了枝原淨~产品(活性成分:延胡索酸泰妙菌素)治疗由胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎(porcineproliferative enteropathy,PPE)的临床效果。枝原淨~用药组(拌料或饮水)与感染不用药组比较,投药14 d后,粪便中胞内劳森菌的PCR检出率显著降低;健康状况、饲料转化率和平均日增重得到有效提高;免疫组化检测结果表明枝原淨~用药组未检出阳性猪。组织病理学观察显示,用药组的猪呈现较轻的回肠腺上皮增生(PPE的典型病变)或无腺上皮增生,而对照组的猪回肠腺上皮显著增生,说明枝原淨~能有效抑制回肠出现PPE的典型组织病变。结果表明,枝原淨~均能有效抑制胞内劳森菌感染并控制猪增生性肠炎,进而有效提高饲料报酬。
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关键词
猪增生性肠炎
PCR检测
免疫组化检测
健康状况评分
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职称材料
猪增生性肠炎的研究进展
被引量:
6
5
作者
余彦国
张瑾
《畜牧兽医杂志》
2009年第3期33-36,共4页
猪增生性肠炎(porcine proliferative enteritis,PPE),又称猪增生性肠病(porcine proliferative enteropathy,PPE),是以回肠和结肠隐窝内未成熟的肠细胞发生腺瘤样增生为特征的猪的一种肠道综合症。本文主要概述其病原学、流行病学、发...
猪增生性肠炎(porcine proliferative enteritis,PPE),又称猪增生性肠病(porcine proliferative enteropathy,PPE),是以回肠和结肠隐窝内未成熟的肠细胞发生腺瘤样增生为特征的猪的一种肠道综合症。本文主要概述其病原学、流行病学、发病机理、临床症状、病理变化、诊断以及防治等方面的研究现状。
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关键词
猪增生性肠炎
细胞内劳森菌
增生性肠病
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职称材料
题名
基于胞内劳森菌重组flgE蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
廖荣莉
郑金
熊梦霞
罗灵芝
赵墩
周阳
唐红剑
葛猛
余兴龙
机构
湖南农业大学动物医学院
湖南康保特生物科技有限公司
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期150-157,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(31972713)。
文摘
为建立以胞内劳森菌(LI)重组鞭毛钩基体复合蛋白flgE为包被抗原的间接ELISA检测方法,本研究将flgE基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-flgE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导后获得了可溶性表达的flgE重组蛋白。以纯化的重组flgE蛋白为包被抗原,经优化各反应条件后建立了检测LI抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果显示所建立的ELISA方法与CSFV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV、Mhp和APP等阳性血清均无交叉反应。该方法能检测到1600倍稀释的LI阳性血清,批内和批间变异系数均小于10%。利用该方法检测多个不同类型猪场的猪血清(血清来源:2个种猪场1~5胎次的母猪;3个商品猪场30日龄~140日龄的猪;仔猪30头,从30日龄跟踪至80日龄,共采集4次血清),结果显示,母猪和育肥猪的感染率较高可达100%;母源抗体下降后,自50日龄~70日龄起到育肥猪阶段,LI阳性率和抗体水平随着日龄的增长而不断上升;30头跟踪仔猪在单独密闭的饲养条件下,从开始到全群感染LI所需的时间较短(35 d左右)。这些结果与目前已报道的LI血清流行病学调查研究一致,表明该方法能较准确反映LI感染猪的抗体水平。上述结果表明本研究建立的间接ELISA抗体检测方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性,可初步用于临床LI血清流行病学的调查。
关键词
猪增生性肠病
胞内劳森菌
鞭毛蛋白flgE
间接ELISA
Keywords
porcine
proliferative
enteropathy
Lawsonia
intracellularis
flagellar
hook-basal
body
complex
protein
flgE
indirect
ELISA
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪增生性肠炎套式PCR检测方法的建立及初步应用
被引量:
5
2
作者
张文波
戴益民
蒋新华
胡杨
徐昌满
陈松昌
邓舜洲
机构
江西农业大学动物科学技术学院
南昌金牧动物保健服务有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第4期102-106,共5页
基金
国家自然科学基金(31360617)
江西省科技支撑计划项目(20121BBF60031
20132BBF60044)
文摘
本试验旨在建立检测猪增生性肠炎(porcine proliferative enteropathy,PPE)的套式PCR方法,为临床快速鉴别诊断和防控该病提供病原学依据。根据GenBank上已发表的的劳森氏胞内菌(Lawsonia intracellularis,LI)的基因组序列(登录号:AM180252)设计2对特异性引物,以疑似PPE病猪粪便中纯化的DNA为模板,建立了套式PCR方法,并对PCR产物进行序列测定,所扩增的序列与GenBank上登录的劳森氏胞内菌相应序列的同源性在99%以上。应用本试验建立的套式PCR方法对疑似PPE病猪的粪便进行检测,结果表明,本方法具有快速、方便和敏感度高等优点,可用于PPE的临床检测。
关键词
猪增生性肠炎
劳森氏胞内菌
套式PCR
Keywords
porcine
proliferative
enteropathy
Lawscmia
iintracellularis
nested
PCR
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪增生性肠炎研究进展
被引量:
3
3
作者
李放皓
雷红宇
蒋艳成
雷然潇
张熠
苏建明
机构
湖南农业大学动物医学院
出处
《中兽医医药杂志》
2015年第6期23-26,共4页
基金
湖南省科技计划项目(编号:2012NK3078)
湖南农业大学大学生创新性实验计划项目(编号:XCX1556)
文摘
猪增生性肠炎是由胞内劳森菌引起的一种接触性传染病,以肠道增生为主要特征,其临床表现为腹泻、日增重量下降、生长缓慢等,病理变化主要为肠道出血、肠壁增厚、肠黏膜增厚、隐窝上皮细胞增生。该病传播范围广,发病率高,呈世界流行性趋势,严重影响猪场经济效益。本文对其病原、发病机理、流行病学、临床症状与病变、诊断方法和防治措施等进行综述。
关键词
猪增生性肠炎
胞內劳森茵
发病机理
Keywords
porcine
proliferative
enteropathy
Lawsonia
intracellularis
pathogenesis
分类号
S853.74 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
枝原淨~对猪增生性肠炎的防治效果评价
4
作者
杲向荣
王建
齐新永
葛菲菲
乔健
杨志彪
机构
上海交通大学农业与生物学院
上海市动物疫病预防控制中心
中国农业大学动物医学院
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2012年第1期59-63,共5页
基金
沪农科攻字(2010)第2-5号
文摘
本研究评估了枝原淨~产品(活性成分:延胡索酸泰妙菌素)治疗由胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎(porcineproliferative enteropathy,PPE)的临床效果。枝原淨~用药组(拌料或饮水)与感染不用药组比较,投药14 d后,粪便中胞内劳森菌的PCR检出率显著降低;健康状况、饲料转化率和平均日增重得到有效提高;免疫组化检测结果表明枝原淨~用药组未检出阳性猪。组织病理学观察显示,用药组的猪呈现较轻的回肠腺上皮增生(PPE的典型病变)或无腺上皮增生,而对照组的猪回肠腺上皮显著增生,说明枝原淨~能有效抑制回肠出现PPE的典型组织病变。结果表明,枝原淨~均能有效抑制胞内劳森菌感染并控制猪增生性肠炎,进而有效提高饲料报酬。
关键词
猪增生性肠炎
PCR检测
免疫组化检测
健康状况评分
Keywords
porcine
proliferative
enteropathy
(PPE)
PCR
immunohistochemical
staining
clinical
scoring
分类号
S859.795 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
猪增生性肠炎的研究进展
被引量:
6
5
作者
余彦国
张瑾
机构
甘肃畜牧工程职业技术学院
出处
《畜牧兽医杂志》
2009年第3期33-36,共4页
文摘
猪增生性肠炎(porcine proliferative enteritis,PPE),又称猪增生性肠病(porcine proliferative enteropathy,PPE),是以回肠和结肠隐窝内未成熟的肠细胞发生腺瘤样增生为特征的猪的一种肠道综合症。本文主要概述其病原学、流行病学、发病机理、临床症状、病理变化、诊断以及防治等方面的研究现状。
关键词
猪增生性肠炎
细胞内劳森菌
增生性肠病
Keywords
porcine
proliferative
enteritis
Lawsonia
intracellularis
porcine
prolif
eative
enteropathy
分类号
S856.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于胞内劳森菌重组flgE蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用
廖荣莉
郑金
熊梦霞
罗灵芝
赵墩
周阳
唐红剑
葛猛
余兴龙
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
下载PDF
职称材料
2
猪增生性肠炎套式PCR检测方法的建立及初步应用
张文波
戴益民
蒋新华
胡杨
徐昌满
陈松昌
邓舜洲
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
5
下载PDF
职称材料
3
猪增生性肠炎研究进展
李放皓
雷红宇
蒋艳成
雷然潇
张熠
苏建明
《中兽医医药杂志》
2015
3
下载PDF
职称材料
4
枝原淨~对猪增生性肠炎的防治效果评价
杲向荣
王建
齐新永
葛菲菲
乔健
杨志彪
《中国动物传染病学报》
CAS
2012
0
下载PDF
职称材料
5
猪增生性肠炎的研究进展
余彦国
张瑾
《畜牧兽医杂志》
2009
6
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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