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猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
东梦珂
郑南南
+5 位作者
吴宏举
侯浩宇
陈寅龙
李潮
张改平
杜永坤
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期29-34,共6页
CCL2作为一种典型的促炎因子,在病毒感染、各类肿瘤、自身免疫疾病等许多病症的发生、发展中都有着举足轻重的意义,然而猪的CCL2研究鲜有报道。本研究使用PCR方式扩增CCL2基因,将其克隆于大肠杆菌原核表达系统的pET-28a(+)表达载体中,...
CCL2作为一种典型的促炎因子,在病毒感染、各类肿瘤、自身免疫疾病等许多病症的发生、发展中都有着举足轻重的意义,然而猪的CCL2研究鲜有报道。本研究使用PCR方式扩增CCL2基因,将其克隆于大肠杆菌原核表达系统的pET-28a(+)表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a(+)-CCL2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,再经0.1mmol/L的IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明猪CCL2蛋白在大肠杆菌中获得可溶性表达。将CCL2蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,4次免疫后收集血清,通过ELISA方法检测其效价达到1∶128000。Western blot和IFA测定结果显示本研究获得的猪CCL2多克隆抗体具有较好的特异性。本研究获得的猪CCL2蛋白和针对CCL2的兔多克隆抗体为未来研究猪CCL2的在疾病中的相关作用及生物学功能提供了试验材料。
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关键词
猪
ccl
2
原核表达
多克隆抗体
原文传递
题名
猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
东梦珂
郑南南
吴宏举
侯浩宇
陈寅龙
李潮
张改平
杜永坤
机构
河南农业大学、动物医学学院、国家动物免疫学国际联合研究中心
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期29-34,共6页
基金
中国博士后科学基金资助项目(2021M690926)
国家自然科学基金专项资助项目(31941001)
河南省高等学校重点科研资助项目(21A230010)。
文摘
CCL2作为一种典型的促炎因子,在病毒感染、各类肿瘤、自身免疫疾病等许多病症的发生、发展中都有着举足轻重的意义,然而猪的CCL2研究鲜有报道。本研究使用PCR方式扩增CCL2基因,将其克隆于大肠杆菌原核表达系统的pET-28a(+)表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a(+)-CCL2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,再经0.1mmol/L的IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明猪CCL2蛋白在大肠杆菌中获得可溶性表达。将CCL2蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,4次免疫后收集血清,通过ELISA方法检测其效价达到1∶128000。Western blot和IFA测定结果显示本研究获得的猪CCL2多克隆抗体具有较好的特异性。本研究获得的猪CCL2蛋白和针对CCL2的兔多克隆抗体为未来研究猪CCL2的在疾病中的相关作用及生物学功能提供了试验材料。
关键词
猪
ccl
2
原核表达
多克隆抗体
Keywords
porcine
ccl
2
gene
prokaryotic
expression
polyclonal
antibody
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备
东梦珂
郑南南
吴宏举
侯浩宇
陈寅龙
李潮
张改平
杜永坤
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
已选择
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