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PCR-SSCP分支杆菌菌种初步鉴定方法的建立及其应用 被引量:46
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作者 吴雪琼 张俊仙 +2 位作者 刘佳文 黄海南 王晋洪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2000年第7期25-26,共2页
建立一种简便、快速、灵敏和特异的分支杆菌菌种鉴定方法。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR) -单链构象多态性 (Single -strndedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析分支杆菌 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标... 建立一种简便、快速、灵敏和特异的分支杆菌菌种鉴定方法。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR) -单链构象多态性 (Single -strndedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析分支杆菌 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标准株的相似性进行菌种初步鉴定。结果 :2 9种分支杆菌标准株中 ,除结核分支杆菌、牛结核分支杆菌和卡介苗之间及堪萨斯分支杆菌和胃分支杆菌之间SSCP电泳图谱相似外 ,其余各种分支杆之间电泳图谱均有显著差异。 70株BACTECTB4 60初步鉴定为结核分支杆菌复合群的临床分离株中 ,55株显示与结核分支杆菌SSCP电泳图谱相似 ,15例 (2 1.4 % )显示出与结核分支杆菌完全不同的电泳图谱 ;10株经传统方法鉴定为结核分支杆菌的分离株中 ,仅 1株显示出与结核分支杆菌不同的电泳图谱。结论 :PCR -SSCP有可能成为一种快速、有效的分支杆菌菌种初步鉴定方法。 展开更多
关键词 菌种鉴定 分支杆菌 PCR-SSCP
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一种叶片直接用作PCR扩增的新方法及其应用 被引量:37
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作者 汪秀峰 杨剑波 +2 位作者 向太和 李莉 倪大虎 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期67-70,共4页
以水稻为模式植物研究了利用碱处理叶片直接用作 PCR扩增的模板 ,并应用于水稻品种种性和纯度鉴定以及分子标记辅助田间育种材料的选择中。该方法具有快速、简便、结果可信度高 ,重复性好 ,对待测植株的损伤小等特点 ,它无需高速冷冻离... 以水稻为模式植物研究了利用碱处理叶片直接用作 PCR扩增的模板 ,并应用于水稻品种种性和纯度鉴定以及分子标记辅助田间育种材料的选择中。该方法具有快速、简便、结果可信度高 ,重复性好 ,对待测植株的损伤小等特点 ,它无需高速冷冻离心机及相应的提取 DNA的试剂 ,故试验成本低 ,检测所需的时间短。尤其是群体较大时 ,此种方法更是显得经济有效 ,利用此种方法在 1 d内可检测 30 0份样品。 展开更多
关键词 水稻 基因组DNA 分子标记 聚合酶链式反应 鉴定 研究方法 叶片
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PCR检测鸭疫里默氏菌的研究 被引量:16
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作者 程龙飞 施少华 +2 位作者 李文杨 傅光华 黄瑜 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第1期131-133,共3页
对本研究室分离、鉴定并保存的42株鸭疫里默氏菌(包括8个血清型)、9株鸭源大肠杆菌和4株鸭源禽多杀性巴氏杆菌进行PCR扩增,结果所有的鸭疫里默氏菌均能扩增出809bp的特异性DNA片段,而鸭源大肠杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌均为阴性。试验... 对本研究室分离、鉴定并保存的42株鸭疫里默氏菌(包括8个血清型)、9株鸭源大肠杆菌和4株鸭源禽多杀性巴氏杆菌进行PCR扩增,结果所有的鸭疫里默氏菌均能扩增出809bp的特异性DNA片段,而鸭源大肠杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌均为阴性。试验证明以细菌DNA和全菌体分别作模板,对PCR的扩增结果无影响。经过优化的该PCR方法能检测出的最低DNA量为1pg。 展开更多
关键词 PCR 鸭疫里默氏菌 多聚酶链反应 特异性 敏感性 DNA
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聚合酶链反应对一期梅毒患者的诊断 被引量:6
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作者 刘爱英 尹跃平 +5 位作者 孙建方 陈祥生 余艳华 尤永燕 徐敏 王书崎 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期413-415,共3页
目的:建立聚合酶链反应(PCR)用于快速检测梅毒螺旋体。方法:根据梅毒螺旋体47ku膜蛋白基因序列,自行设计筛选一对特异寡核苷酸引物,建立梅毒螺旋体的PCR。同时对其进行实验室评价和临床标本的检测验证。结果:PCR对梅毒螺旋体能产生特异... 目的:建立聚合酶链反应(PCR)用于快速检测梅毒螺旋体。方法:根据梅毒螺旋体47ku膜蛋白基因序列,自行设计筛选一对特异寡核苷酸引物,建立梅毒螺旋体的PCR。同时对其进行实验室评价和临床标本的检测验证。结果:PCR对梅毒螺旋体能产生特异性扩增,片段大小为252bp,而对其他生殖道常见菌及人基因组DNA不能扩增出任何片段。检测65例临床标本,PCR检查阳性54例(83.1%),梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检查阳性52例(80%),梅毒螺旋体暗视野显微镜检查阳性40例(61.5%)。PCR检测结果,与暗视野显微镜检查结果比较,差异有显著性(P<0.01);与梅毒血清学检查结果比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:PCR可特异、快速地检测梅毒螺旋体,并具有较好的敏感性。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 聚合酶链反应
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副鸡嗜血杆菌16 S rDNA PCR检测方法的建立 被引量:6
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作者 邓显文 谢芝勋 +3 位作者 谢丽基 刘加波 庞耀珊 谢志勤 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期14-17,共4页
根据副鸡嗜血杆菌的16 S rDNA基因序列设计一对特异性引物XZIC1和XZIC2,对6株副鸡嗜血杆菌进行PCR扩增。结果显示,该对引物对6株副鸡嗜血杆菌均扩增出与预期大小相一致的282bp片段,而对鸡毒支原体、禽巴氏杆菌、鸡传染性支气管炎病毒、... 根据副鸡嗜血杆菌的16 S rDNA基因序列设计一对特异性引物XZIC1和XZIC2,对6株副鸡嗜血杆菌进行PCR扩增。结果显示,该对引物对6株副鸡嗜血杆菌均扩增出与预期大小相一致的282bp片段,而对鸡毒支原体、禽巴氏杆菌、鸡传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌、禽流感病毒(H9)、鸡喉气管炎病毒及葡萄球菌等9种病原体的扩增结果均为阴性。该PCR敏感性结果表明,本方法可以检测到10pg的副鸡嗜血杆菌DNA模板。采用引物XZIC1和XZIC2,对分别用副鸡嗜血杆菌ctcc253、ctcc255、ctcc257、ctcc269株感染SPF鸡的临床病料DNA进行PCR扩增,均可扩增出单一的282bp的片段。 展开更多
关键词 PCR 副鸡嗜血杆菌 检测
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线粒体DNA含量与HIV相关脂肪营养不良的关系 被引量:3
6
作者 吴鹏 顾卫斌 +5 位作者 张璐 李雁凌 邱志峰 韩扬 谢静 李太生 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期1448-1452,共5页
目的研究高效联合抗反转录病毒治疗(HAART)过程中外周血单核淋巴细胞(PBMC)内线粒体DNA(mtDNA)含量变化规律及其与人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关脂肪营养不良(HIV.LD)的相关性。方法通过实时定量PCR(real—timePCR),对2... 目的研究高效联合抗反转录病毒治疗(HAART)过程中外周血单核淋巴细胞(PBMC)内线粒体DNA(mtDNA)含量变化规律及其与人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关脂肪营养不良(HIV.LD)的相关性。方法通过实时定量PCR(real—timePCR),对2002年5月至2008年5月北京协和医院感染内科门诊长期规律随访的33例HIV/AIDS中国成年患者抗病毒治疗基线、半年、2年的mtDNA含量测定,其中出现了HIV—LD的为17例,比较各组间的差异。结果HIV/AIDS患者治疗基线PBMC mtDNA含量低于健康对照组(9.578比17.195,P〈0.01)。HIV—LD组治疗各时点PBMCmtDNA含量均显著低于未出现脂肪营养不良综合征(NLD)组(治疗基线、治疗半年、治疗2年分别为13.619比5.775、6.360比1.387、7.170比1.266)。mtDNA含量降低先于临床HIV—LD的出现。使用司他夫定(d4T)方案组患者PBMCmtDNA含量(2^-△△C1)治疗后较基线显著降低,而齐多夫定(AZT)方案组患者治疗前后PBMC mtDNA含量变化不显著(P=0.205)。结论HIV感染和d4T与PBMCmtDNA含量的下降具有密切关系。 展开更多
关键词 DNA 线粒体 脂质营养不良 聚合酶链反应 司他夫定
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口腔扁平苔藓中人乳头瘤病毒的检测 被引量:3
7
作者 雷蕾 李辉■ 孙瑜 《临床口腔医学杂志》 1997年第1期5-7,共3页
为研究口腔扁平苔藓(OLP)与人乳头瘤病毒(HPV)的关系.作者采用聚合酶链(PCR)技术,对22例OLP中的HPV低危型──11型以及高危型—16型DNA分别进行了检测,并以10例正常口腔粘膜(NOM)作为对照。结果表明:PCR是检测OLP中HPV较为... 为研究口腔扁平苔藓(OLP)与人乳头瘤病毒(HPV)的关系.作者采用聚合酶链(PCR)技术,对22例OLP中的HPV低危型──11型以及高危型—16型DNA分别进行了检测,并以10例正常口腔粘膜(NOM)作为对照。结果表明:PCR是检测OLP中HPV较为理想的方法。OLP中的HPV与NOM相比较,11型相对升高。OLP各临床分型中,网纹型的HPV阳性百分比最高,该型的病程迁延.治疗后易复发,可能与HPV的潜伏和感染有关,4例糜烂型,即有2例含有HPV16,提示糜烂型与癌变的关系。HPV在NOM中的存在。表明HPV可以无症状或以潜伏的形式存在于口腔粘膜。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 人乳头瘤病毒 聚合酶链反应
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应用PCR-SSCP方法鉴定深圳市龟分支杆菌暴发感染的研究 被引量:1
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作者 张俊仙 吴雪琼 +4 位作者 张灵霞 李洪敏 金关甫 扈庆华 李良成 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第10期21-22,共2页
鉴定深圳市龟分支杆菌脓肿亚种的基因。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction) -单链构象多态性 (Single -StrandedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析深圳龟分支杆菌分离株的 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标准株的相... 鉴定深圳市龟分支杆菌脓肿亚种的基因。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction) -单链构象多态性 (Single -StrandedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析深圳龟分支杆菌分离株的 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标准株的相似性进行鉴定。结果 :35株龟分支杆菌分离株与龟分支杆菌脓肿亚种标准株的SSCP图谱对比 ,6株显示出与龟分支杆菌脓肿亚种标准株相似的图谱 ,2 9株显示出不同的图谱。结论 :应用PCR -SSCP方法可将深圳市龟分支杆菌脓肿亚种分为两种基因型。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 单链构象多态性 龟分支杆菌
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分子伴侣基因的克隆及表达 被引量:1
9
作者 马学军 侯云德 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期107-110,共4页
用聚合酶链反应(PCR)方法从大肠杆菌染色体DNA中扩增得到2000bp的DNA片段(含GroES和GroEL),并克隆到PGEM3zf(+)载体中,经限制性图谱分析和部分DNA序列测定,证实2000bp的PCR产物... 用聚合酶链反应(PCR)方法从大肠杆菌染色体DNA中扩增得到2000bp的DNA片段(含GroES和GroEL),并克隆到PGEM3zf(+)载体中,经限制性图谱分析和部分DNA序列测定,证实2000bp的PCR产物为GroE基因全部编码序列。将PCR产物构建在PLPR启动子控制下的pBV220表达质粒中,转入大肠杆菌DH5α,经42℃热诱导,获得GroE基因的表达产物,在SDS-PAGE上出现分子量约60000(GroEL)及15000的蛋白带(GroES),经密度扫描分析,前者约占细菌总蛋白的30%,后者占28%。经鉴定GroES和GroEL基因表达产物在细胞内形成可溶性蛋白。 展开更多
关键词 分子伴侣 基因表达 基因工程 基因克隆
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实时定量聚合酶链反应检测人半翼基因在宫颈病变中的表达及意义 被引量:2
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作者 卢博奇 蔺莉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第30期3445-3448,共4页
目的探讨人半翼(hWAPL)基因在宫颈病变,包括慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈癌组织中的表达及意义。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测100例宫颈病变组织,包括慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组织各20例中hWAP... 目的探讨人半翼(hWAPL)基因在宫颈病变,包括慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈癌组织中的表达及意义。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测100例宫颈病变组织,包括慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组织各20例中hWAPL基因mRNA表达量,并经β-actin基因校正得到hWAPL基因mRNA相对表达量。结果慢性宫颈炎组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和宫颈癌组hWAPL基因mRNA相对表达量逐渐升高,分别为(1.05±0.68)、(3.05±1.57)、(4.48±2.25)、(8.71±7.70)和(10.49±9.82)。宫颈癌组和CINⅢ组与慢性宫颈炎组、CINⅠ组、CINⅡ组3组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组与CINⅢ组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hWAPL基因在宫颈组织,包括慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组织中均有表达。随着宫颈病变程度的加重hWAPL基因的表达量逐渐增加,在CINⅢ组和宫颈癌组中表达量明显高于慢性宫颈炎组、CINⅠ组和CINⅡ组。hWAPL基因的高表达可能在宫颈癌的发生中起重要作用。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤样变 宫颈肿瘤 宫颈疾病 聚合酶链反应
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16SrRNA在多聚酶链反应麻风诊断中的特异性研究 被引量:2
11
作者 熊俊浩 雍刚 喻林冲 《预防医学情报杂志》 CAS 2002年第1期26-27,共2页
目的 了解用 16SrRNA作引物 ,多聚酶链反应 (PCR)技术检测麻风病的特异性。方法 用 16SrRNA分子片段作引物 ,用多聚酶链反应技术检测 2 0余株非麻风分枝杆菌 ,麻风分枝杆菌标准菌株及 4例传统方法确诊的麻风病患者。结果 麻风标准菌... 目的 了解用 16SrRNA作引物 ,多聚酶链反应 (PCR)技术检测麻风病的特异性。方法 用 16SrRNA分子片段作引物 ,用多聚酶链反应技术检测 2 0余株非麻风分枝杆菌 ,麻风分枝杆菌标准菌株及 4例传统方法确诊的麻风病患者。结果 麻风标准菌株和 4例中的 3例患者检测为阳性 ,其余 2 0余株非麻风分枝杆菌均为阴性。结论 16SrRNA作引物 。 展开更多
关键词 麻风病分枝菌 多聚酶链反应 16SrRNA 麻风 诊断 特异性研究
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非何杰金氏淋巴瘤P16基因纯合性缺失及其临床意义
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作者 吉兆宁 刘国卿 +1 位作者 许多荣 洪文德 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2002年第1期60-62,共3页
目的 :探讨P16基因纯合性缺失与非何杰金氏淋巴瘤 (NHL)的关系及其临床意义。方法 :采用半定量多重PCR检测了 5 1例非何杰金氏淋巴瘤病人P16基因纯合性缺失情况。结果 :发现 9例病人出现P16基因纯合性缺失 ,缺失率为 17.6 % ,且低度恶... 目的 :探讨P16基因纯合性缺失与非何杰金氏淋巴瘤 (NHL)的关系及其临床意义。方法 :采用半定量多重PCR检测了 5 1例非何杰金氏淋巴瘤病人P16基因纯合性缺失情况。结果 :发现 9例病人出现P16基因纯合性缺失 ,缺失率为 17.6 % ,且低度恶性组与高度恶性组有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :P16基因纯合性缺失主要发生于恶性程度较高的NHL中 。 展开更多
关键词 P16基因 PCR 非何杰金氏淋巴瘤 基因纯合性缺失
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中国汉族群体MPSⅣ A型Stu Ⅰ位点的遗传多态性 被引量:1
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作者 郭奕斌 杜传书 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期23-25,共3页
[目的]研究中国汉族群体GALNS基因Stu Ⅰ位点的遗传多态性以及该位点等位基因片段传递的规律,为今后的连锁分析打下基础。[方法]采用PCR-RFLP方法,对180例无血缘关系的健康中国汉族个体的360条染色体和6个家系18位成员的36条染色体进行... [目的]研究中国汉族群体GALNS基因Stu Ⅰ位点的遗传多态性以及该位点等位基因片段传递的规律,为今后的连锁分析打下基础。[方法]采用PCR-RFLP方法,对180例无血缘关系的健康中国汉族个体的360条染色体和6个家系18位成员的36条染色体进行检测。然后用x^2检验进行统计学处理。[结果]等位基因片段D_1的频率为0.72,D_2为0.28,杂合率为27%,D_1、D_2的传递规律与理论上预计的完全符合。[结论]中国汉族群体中Stu Ⅰ位点存在多态性,其基因频率(D_1和D_2)与高加索群体的有显著差别,与日本群体的则无显著差别;而杂合率与高加索群体及日本群体的均有显著差异。D_1、D_2在世代中的传递完全符合孟德尔遗传规律。 展开更多
关键词 中国 汉族群体 遗传多态性 MPSⅣA型 聚合酶链反应
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筑巢式PCR检测22例慢性粒细胞白血病患者bcr/abl融合基因结果分析 被引量:1
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作者 杜冰 徐开林 +2 位作者 王林 鹿群先 潘秀英 《现代检验医学杂志》 CAS 2002年第4期5-6,共2页
目的 探讨bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病(CGL)的诊断、治疗和预后判断的价值。方法对22例CGL患者作筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测bcr/abl融合基因。结果 22例CGI。患者中21例bcr/abl融合基因阳性,阳性率为95.5%。结论 ... 目的 探讨bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病(CGL)的诊断、治疗和预后判断的价值。方法对22例CGL患者作筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测bcr/abl融合基因。结果 22例CGI。患者中21例bcr/abl融合基因阳性,阳性率为95.5%。结论 筑巢式PCR是一种快速、敏感而准确的检测方法。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 融合基因 聚合酶链反应 CGL 诊断 治疗 预后
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宫颈癌组织中乳头瘤病毒感染及抑癌基因p53突变的检测 被引量:1
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作者 周宁 于萍 +7 位作者 徐增祥 杨道理 克丙申 陈诵芬 李红 王保成 谢智农 陈君 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期443-445,共3页
目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)16、18型感染及抑癌基因p53突变与宫颈癌发生的关系。方法:应用PCR及其单链构象多态性(PCR-SSCP)方法,对60例宫颈癌组织DNA进行检测,同时选择宫颈糜烂及正常宫颈各50例... 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)16、18型感染及抑癌基因p53突变与宫颈癌发生的关系。方法:应用PCR及其单链构象多态性(PCR-SSCP)方法,对60例宫颈癌组织DNA进行检测,同时选择宫颈糜烂及正常宫颈各50例作为对照。结果:宫颈癌组织中HPV16感染呈明显梯度关系,且鳞癌组织中HPV16的检出率远比腺癌高(86.7%,33.3%,P<0.01),并高于CIN和正常宫颈组织;相反,腺癌中HPV18的检出率比鳞癌高(53.5%,6.7%,P<0.01)。PCR-SSCP研究涉及p53基因外显子5~8的突变,它主要在HPV阴性的宫颈癌中出现。结论:宫颈癌发生与人乳头瘤病毒感染及p53基因功能失活有关。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 乳头瘤病毒 抑癌基因 基因突变
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尿激酶型纤溶酶原激活剂mRNA在结肠癌中的表达及其意义 被引量:1
16
作者 张维康 张锦辉 熊俊 《腹部外科》 2007年第4期243-244,共2页
目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA在结肠癌组织中的表达及其意义。方法采用实时定量PCR检测60例结肠癌及癌旁组织(距离癌组织边缘5~10cm)中uPA mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果结肠癌组织uPA mRNA表达阳性率为8... 目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA在结肠癌组织中的表达及其意义。方法采用实时定量PCR检测60例结肠癌及癌旁组织(距离癌组织边缘5~10cm)中uPA mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果结肠癌组织uPA mRNA表达阳性率为81.7%,明显高于癌旁组织的23.3%;伴有淋巴结转移者uPA mRNA表达阳性率为95.1%,明显高于无淋巴结转移者的63.1%;侵犯浆膜层及肌层者uPA mRNA表达阳性率为90.4%,明显高于侵犯黏膜和黏膜下层者的66.7%。结论uPA mRNA的表达可作为结肠癌临床病理分期及预后判断的指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 尿激酶 聚合酶链反应
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筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因 被引量:1
17
作者 肖敏敏 吴祥林 江继发 《医学研究杂志》 2006年第8期19-21,共3页
目的探讨最适退火温度和核酸扩增(PCR)周期,利用筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病(CML)的bcr-abl融合基因类型,并进行PCR荧光定量(RQ—PCR),研究其与疾病的关系。方法通过改变PCR条件,将退火温度由55℃增加到60℃,反应周期由... 目的探讨最适退火温度和核酸扩增(PCR)周期,利用筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病(CML)的bcr-abl融合基因类型,并进行PCR荧光定量(RQ—PCR),研究其与疾病的关系。方法通过改变PCR条件,将退火温度由55℃增加到60℃,反应周期由原来的30周期增加到45周期,检测14例22份标本。同时用荧光定量试剂检测标本。结果退火温度为58℃,45周期可测出10^3 copies/μl定量标准品的PCR产物。22份标本6cr-abl融合基因巢式PCR结果均阳性。其中b2a2型9份,b3a2型13份。定量检测18例阳性,量值在10^2-10^6copies/μg,两例急变患者急性期和慢性期有明显差异。结论筑巢式PCR是一种敏感而准确的检测方法,对bcr—abl进行定量有助于反映白血病细胞负荷、评价疗效及判断疾病预后。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 聚合酶链反应 bcr—abl融合基因
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化疗联合生物治疗对结肠癌患者IL-10的影响
18
作者 王瑞华 刘海荣 李岩 《生物医学工程研究》 2004年第4期246-248,共3页
观察生物治疗联合化疗对结肠癌患者体内IL - 10表达的影响。用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,比较生物治疗联合化疗与单纯化疗对结肠癌患者IL - 10的影响 ,并检测结肠癌患者化疗前、后外周血IL - 10mRNA的表达。结果表明 ,生物治... 观察生物治疗联合化疗对结肠癌患者体内IL - 10表达的影响。用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,比较生物治疗联合化疗与单纯化疗对结肠癌患者IL - 10的影响 ,并检测结肠癌患者化疗前、后外周血IL - 10mRNA的表达。结果表明 ,生物治疗加化疗组较单纯化疗能更好的降低结肠癌患者IL - 10的表达 ,外周血IL - 10在化疗前呈强势表达 ,化疗后IL - 10表达减弱 ,甚至有向Th1类细胞因子漂移的趋势。表明化疗可降低结肠癌患者IL - 10的表达 ,化疗加生物治疗能更好的改善患者的免疫状况 ,抑制肿瘤生长 ,有助于改善预后和康复。 展开更多
关键词 IL-10 患者 结肠癌 生物治疗 表达 化疗前 联合化疗 纯化 RNA RT—PCR
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凋亡基因ras突变和rasP21蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后关系
19
作者 涂响安 赵志毅 +5 位作者 黄春南 余明年 冯家骅 刘丽萍 李全贞 左连富 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期185-187,共3页
目的 研究凋亡基因ras突变和rasP2 1蛋白表达及DNA倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。方法 应用聚合酶链式反应加单链多态性分析 (PCR SSCP)及流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 52例尿路上皮肿瘤K ras基因突变及rasP2 1蛋白表达和DNA... 目的 研究凋亡基因ras突变和rasP2 1蛋白表达及DNA倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。方法 应用聚合酶链式反应加单链多态性分析 (PCR SSCP)及流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 52例尿路上皮肿瘤K ras基因突变及rasP2 1蛋白表达和DNA含量变化。K ras基因突变5例 (9 6 % ) ,rasP2 1蛋白阳性表达 36例 (6 9 2 % ) ;异倍体 2 2例 (4 2 3% ) ,二倍体 30例 (57 7% ) ;DNA倍体异常和rasP2 1蛋白表达随肿瘤病理分级和分期的上升而增加 ,与肿瘤预后呈正相关 (P <0 0 1) ;异倍体肿瘤其rasP2 1蛋白表达率明显高于二倍体肿瘤 (P <0 0 1)。结论 DNA倍体异常和rasP2 展开更多
关键词 尿路上皮肿瘤 预后 聚合酶链反应 基因突变
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原位逆转录PCR检测干细胞因子mRNA在白血病细胞的表达
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作者 吴彬 刘晓力 +3 位作者 宣文兰 冯茹 尹芳 周淑芸 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期490-492,共3页
目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性。方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达。结果直接法和间接法原位RT-PCR... 目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性。方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达。结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性。结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR。 展开更多
关键词 原位逆转录PCR 干细胞因子 MRNA 白血病 原位杂交 K562细胞 HL-60细胞
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