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喹乙醇致线粒体DNA基因损伤的SSCP分析 被引量:10
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作者 王德成 高洪 +1 位作者 范泉水 高斌 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期95-101,共7页
为研究喹乙醇对mtDNA基因的致突变效应,以1日龄的健康艾维因商品代肉鸡为试材,运用改进的碱变性法提取肝脏的mtDNA,设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(UUR)t、RNAIlet、RNALys、ATPase8 4个基因,同时运用SSCP技术对扩增产物进行突变分析。... 为研究喹乙醇对mtDNA基因的致突变效应,以1日龄的健康艾维因商品代肉鸡为试材,运用改进的碱变性法提取肝脏的mtDNA,设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(UUR)t、RNAIlet、RNALys、ATPase8 4个基因,同时运用SSCP技术对扩增产物进行突变分析。结果表明:喹乙醇处理Ⅵ组tRNALeu(UUR)有突变发生,序列测定结果表明该突变为4 007位的C→A点突变,其他各组的tRNALeu(UUR)基因无任何突变发生。该结果提示喹乙醇中毒可以导致mtDNA tRNALeu(UUR)基因突变。 展开更多
关键词 喹乙醇 聚合酶链式反应-单链构象多态性 线粒体DNA 基因损伤
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nm23-H1基因突变及异常表达与大肠癌转移相关性的研究 被引量:4
2
作者 黄培林 金月玲 +2 位作者 黄照权 王亚平 王建东 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2002年第1期44-48,共5页
目的 :探讨nm2 3 H1基因突变及异常表达与大肠癌转移之间的关系。方法 :(1)收集 63例中国人大肠癌组织及癌旁组织 ,酚 氯仿 异戊醇法提取基因组DNA ,同时收集整理患者的临床和病理资料 ;(2 )应用PCR扩增nm2 3 H1基因全部编码序列第 ... 目的 :探讨nm2 3 H1基因突变及异常表达与大肠癌转移之间的关系。方法 :(1)收集 63例中国人大肠癌组织及癌旁组织 ,酚 氯仿 异戊醇法提取基因组DNA ,同时收集整理患者的临床和病理资料 ;(2 )应用PCR扩增nm2 3 H1基因全部编码序列第 2~ 5位外显子后 ,经SSCP法初步筛查基因突变并对异常带型样本进行DNA测序分析 ;(3 )应用流式细胞仪检测 14对大肠癌组织及癌旁组织nm2 3 H1蛋白的表达情况。结果 :nm2 3 H1基因第 2~ 4位外显子在 63例大肠癌组织中 (其中 2 0例标本有淋巴结转移 )未发现异常突变 ;仅有 15例大肠癌组织nm2 3 H1基因第 5外显子序列存在突变 ,其第 3 60位碱基发生T C置换 (同义突变 ) ;nm2 3 H1基因蛋白在大肠粘膜组织中有表达 ,在部分大肠癌组织中的表达比其癌旁粘膜组织低 ,并与肿瘤转移有相关性。结论 :nm2 3 H1基因突变在大肠癌组织中为小概率事件 ,大肠癌病理类型、有无转移与nm2 3 H1基因突变无明显相关性 ;nm2 3 H1基因蛋白水平的表达下降与大肠癌的转移有相关性。 展开更多
关键词 NM23-H1基因 大肠癌 聚合酶链反应-单链构象多态性 转移
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结核病临床分离株及痰标本中embB基因型的快速测定 被引量:2
3
作者 张俊仙 吴雪琼 +3 位作者 韩慧新 李洪敏 梁建琴 陆阳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期100-102,共3页
目的建立快速测定结核病耐乙胺丁醇(EMB)分离株和痰标本中结核分枝杆菌EMB耐药基因型的方法,以期为患者提供及时、有效地化验结果。方法应用16SrDNA聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)对11株耐EM... 目的建立快速测定结核病耐乙胺丁醇(EMB)分离株和痰标本中结核分枝杆菌EMB耐药基因型的方法,以期为患者提供及时、有效地化验结果。方法应用16SrDNA聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)对11株耐EMB分离株和46例结核病痰标本进行分子菌种鉴定和embB基因突变的部位与性质分析。结果以结核分枝杆菌H37Rv标准株为对照,11株耐EMB分离株和46例临床痰标本经16SrDNAPCR-SSCP分析电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同;限制性内切酶Nla消化embB基因扩增产物显示,11株耐EMB分离株中4株(36.4%)不被Nla消化;46例结核病痰标本中10例(21.7%)不被Nla消化。结论部分结核分枝杆菌耐EMB是由于embB基因突变所致,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法可直接快速测定结核病耐EMB分离株和痰标本中结核分枝杆菌耐EMB基因型。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 乙胺丁醇 结核分枝杆菌 结核病
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中国先天性心脏病患者TBX1基因突变的研究 被引量:2
4
作者 黄莹 徐佳伟 +3 位作者 吴小艳 林雯 金润铭 孙宗全 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期544-547,共4页
目的检测中国先天性心脏病患者TBX1基因突变以探讨TBX1基因突变与非综合征心脏畸形发生的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构像多态性(PCR-SSCP)技术对73例先天性心脏病患者和70例健康人样本的TBX1基因进行突变分析。结果先天性心脏... 目的检测中国先天性心脏病患者TBX1基因突变以探讨TBX1基因突变与非综合征心脏畸形发生的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构像多态性(PCR-SSCP)技术对73例先天性心脏病患者和70例健康人样本的TBX1基因进行突变分析。结果先天性心脏病患者和对照组中均检测到928G→A核苷酸变异和933A→G核苷酸变异,经χ2检验,928G→A和933A→G核苷酸变异的频率在先天性心脏病患者和对照组之间差异均无统计学意义。结论在非综合征心脏畸形的发病机制中,TBX1基因突变可能不占主导地位。 展开更多
关键词 TBX1基因 基因突变 先天性心脏病 聚合酶链反应-单链构像多态性技术
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SSCP检测内毒素致mtDNA基因突变及阳离子A的保护作用
5
作者 刘倩 周铭涛 +2 位作者 高洪 高利波 赵汝 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1707-1711,共5页
将60只健康试验大鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、ET处理组(B组)、CA+ET处理组(C组),运用PCR-SSCP技术对肝脏mtDNA tRNACys-Tyr、COI基因片段一等基因进行了分析,同时运用分光光度计法对血清丙二醛的含量进行测定,观察ET致mtDNA的突变... 将60只健康试验大鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、ET处理组(B组)、CA+ET处理组(C组),运用PCR-SSCP技术对肝脏mtDNA tRNACys-Tyr、COI基因片段一等基因进行了分析,同时运用分光光度计法对血清丙二醛的含量进行测定,观察ET致mtDNA的突变效应以及CA对该效应的保护作用。,结果发现,B组mtDNA tRNACys-Tyr基因片段在第5238与5242碱基处发生了插入1个碱基T的插入突变,COI一基因片段发生T5322G和T5331G处置换点突变,其他各组无基因突变发生。B组血清MDA含量均明显高于其他二组(P<0.05)、C组明显低于B组但高于A组(P<0.05)。结果表明,ET可导致mtDNA基因发生突变,而CA对ET致基因突变具有保护效应。 展开更多
关键词 内毒素 聚合酶链式反应单股构象多态性分析 mtDNA基因突变 阳离子A 保护效应
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小儿急性白血病MTS1基因缺失及点突变的研究
6
作者 李戈 符仁义 +3 位作者 石伟 李兰 杨和平 杨以桡 《医学科技》 1997年第2期1-3,共3页
为探讨MTS1基因突变与恶性血液病的关系,应用PCR-SSCP和DNA印迹方法检测35例急性白血病(AL)患儿MTS1基因改变。结果显示:急性淋巴细胞白血病(ALL)缺失(包括点突变)为25.8%(8/31)。B-ALL纯合缺失为16%(4/25),T-ALL为33%(2/6)。点突变... 为探讨MTS1基因突变与恶性血液病的关系,应用PCR-SSCP和DNA印迹方法检测35例急性白血病(AL)患儿MTS1基因改变。结果显示:急性淋巴细胞白血病(ALL)缺失(包括点突变)为25.8%(8/31)。B-ALL纯合缺失为16%(4/25),T-ALL为33%(2/6)。点突变则两型各1例。结果证明:我国儿童ALL有MTS1基因失活的存在,T-ALL高于B-ALL,点突变仅见于少数病例。该基因失活与AL的发生发展及临床预后有密切关系。 展开更多
关键词 白血病 MTS1基因 PCR-SSCP Southern印迹 儿童
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内毒素致兔线粒体DNA基因突变的SSCP检测 被引量:2
7
作者 高洪 彭辂 +1 位作者 王德成 高斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期373-375,共3页
将20只健康实验用白兔随机分为4组(5只/组):正常对照组(A组)、阳离子A处理组(B组)、内毒素处理组(C组)、阳离子A+内毒素处理组(D组),运用改进的碱变性法提取肝细胞的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA),设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(... 将20只健康实验用白兔随机分为4组(5只/组):正常对照组(A组)、阳离子A处理组(B组)、内毒素处理组(C组)、阳离子A+内毒素处理组(D组),运用改进的碱变性法提取肝细胞的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA),设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(UUR)、tRNALys、ATPase8、ATPase6基因,同时运用分光光度计法对扩增产物进行质量鉴定,并运用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析技术对PCR产物进行突变分析。结果发现:C组tRNALeu(UUR)基因在凝胶中的带型出现泳动异常,表明该基因发生了碱基突变,序列测定表明该突变为2716位的A→G点突变,同时其他各组的tRNALeu(UUR)基因无突变发生。该结果提示内毒素可以导致mtDNA的tRNALeu(UUR)基因发生突变,而阳离子A对这一突变具有保护效应。 展开更多
关键词 内毒素 聚合酶链式反应-单链构象多态性 MTDNA 基因突变
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我国大陆首例DNA分析证实的囊性纤维化病及其突变分析 被引量:22
8
作者 陈柏华 张思仲 杨元 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期5-9,T001,共6页
用多聚酶链式反应-单链构象多态性方法分析了2例经尸检诊断为囊性纤维化病患者的石蜡包埋组织DNA和3例汗液钠离子浓度偏高患儿外周血细胞DNA。结果在一例尸检病例发现第2外显子区域约30大碱基对的缺失,另一例疑诊患儿第1... 用多聚酶链式反应-单链构象多态性方法分析了2例经尸检诊断为囊性纤维化病患者的石蜡包埋组织DNA和3例汗液钠离子浓度偏高患儿外周血细胞DNA。结果在一例尸检病例发现第2外显子区域约30大碱基对的缺失,另一例疑诊患儿第12外显子两侧内含子可能存在DNA变异。 展开更多
关键词 囊性纤维化病 聚合酶链反应 基因缺失 DNA
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血管紧张素原基因核心启动子区域突变与藏族原发性高血压的关联分析 被引量:19
9
作者 杨春 邱长春 +9 位作者 卢圣栋 涔维浚 卓玛 崔超英 才旦 朱席琳 刘怡雯 周文郁 庄兰平 仁丹 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期149-152,共4页
目的 寻找血管紧张素原 (angiotensinogen,AGT)基因核心启动子区域存在的突变 ,分析该突变在中国西藏人群中的分布以及与原发性高血压的关联。方法 以藏族 10 3例原发性高血压患者和 82名健康受试者为研究对象进行病例 -对照研究。用... 目的 寻找血管紧张素原 (angiotensinogen,AGT)基因核心启动子区域存在的突变 ,分析该突变在中国西藏人群中的分布以及与原发性高血压的关联。方法 以藏族 10 3例原发性高血压患者和 82名健康受试者为研究对象进行病例 -对照研究。用聚合酶链反应 -单链构象多态性 (polymerase chain reaction/singlestrand conformation polymorphism,PCR/SSCP)分析和自动荧光测序方法 ,对 AGT基因核心启动子区域DNA序列进行突变分析 ;用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (polymerase chain reaction/restrictionfragmentlength polymorphism,PCR- RFL P)方法分析 AGT基因 (- 6 )位点多态性。结果 PCR/SSCP分析发现 ,AGT基因转录起始位点上游 (- 2 0 )位存在 A→C突变 ,统计分析显示 ,藏族正常人群与高血压人群中该位点 A等位基因均有较高的发生频率 (0 .9175 ,0 .912 4) ,突变位点多态性分布无统计学差异 (P>0 .8)。AGT基因转录起始位点上游 (- 6 )位点存在 A→G突变 ,在藏族正常人群中等位基因 A和 G分布频率分别为 0 .780和 0 .2 2 0 ,原发性高血压群体中它们的分布频率分别为 0 .6 2 6和 0 .374,两者之间存在差异 (P<0 .0 2 5 )。结论(1)藏族群体中 AGT基因 (- 2 0 ) A等位基因有较高的分布频率 ;(2 ) AGT基? 展开更多
关键词 原发性高血压 AGT基因核心启动子 基因突变 藏族
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PCR-SSCP技术在植物病毒学上的应用 被引量:9
10
作者 魏太云 林含新 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农业大学学报》 CSCD 2000年第2期181-186,共6页
聚合酶链式反应及单链构象多态性技术作为一种区分检测基因组之间微小差异的有效方法 ,具有快速、简便、灵敏和适用于大样品量筛选的特点 .本文详细介绍了该技术的条件优化及改进策略 .该技术在植物病毒学上主要应用于 :(1)分子变异 ;(... 聚合酶链式反应及单链构象多态性技术作为一种区分检测基因组之间微小差异的有效方法 ,具有快速、简便、灵敏和适用于大样品量筛选的特点 .本文详细介绍了该技术的条件优化及改进策略 .该技术在植物病毒学上主要应用于 :(1)分子变异 ;(2 )混合侵染的检测 ;(3) 展开更多
关键词 植物病毒 应用 PCR-SSCP 分子变异 分子流行病学
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结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制的研究 被引量:16
11
作者 吴雪琼 梁建琴 +5 位作者 李洪敏 张俊仙 由昆 金关甫 刘佳文 闫国蕊 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期49-54,共6页
目的 了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法 通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B... 目的 了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法 通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B基因。结果 以 H3 7Rv标准株为对照 ,10 7株结核分枝杆菌临床分离株的 16 S r DNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准相同。 38株药物敏感株的 emb B基因、SSCP均泳动正常 ,RFL P和 DS分析与对照株相同。 6 9株耐乙胺丁醇 (EMB)分离株中 ,2 5株 (36 .2 % ) emb B基因 SSCP泳动异常 ;8株 RFL P分析异常 ;DS分析 2 5株均为 30 6位密码子突变 ,其中 1株合并有 2 74位 CGC→ CCC突变 ,其 EMB MICs均≥ 2 0 μg/ml;8株为 30 6位 ATG→ATA或 ATT突变 ,17株为 ATG→GTG或 CTG突变 ,后者 EMB MICs均≥ 30μg/ml。结论 部分结核分枝杆菌耐乙胺丁醇是由于其 emb B基因 (尤其是 30 6位密码子 )突变所致 ,PCR- SSCP技术可能成为测定部分结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药基因型的简便。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 药物耐受性 聚合酶链反应 单链构象多态性 DNA序列分析 乙胺丁醇
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结核分支杆菌五种耐药基因检测的临床应用及评价 被引量:11
12
作者 王巍 李洪敏 +8 位作者 吴雪琼 王安生 王仲元 刘金伟 陈红兵 林明贵 王金河 叶一秀 李素梅 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期670-673,共4页
目的 检测结核分支杆菌rpoBkatG、rpsL、pncA和embB耐药基因 ,评价其临床应用价值。方法 采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)分析和药敏试验 (比例法 ) ,了解 10 9例肺结核患者结核分支杆菌耐药情况 ,并分析、比较临床治疗... 目的 检测结核分支杆菌rpoBkatG、rpsL、pncA和embB耐药基因 ,评价其临床应用价值。方法 采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)分析和药敏试验 (比例法 ) ,了解 10 9例肺结核患者结核分支杆菌耐药情况 ,并分析、比较临床治疗效果。结果  1/ 2以上的肺结核患者至少耐两种抗结核药物 ,对RFP、INH、SM、PZA和EB总耐药率分别为 80 7%、71 5 %、78 8%、5 7 7%和48 6%。rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变率分别为 76%、68%、71%、5 1%和 3 0 %。结核分支杆菌耐药基因突变率与耐药水平联系密切 ,多数结核分支杆菌耐药基因突变易发生在高耐药株 ,也有少数基因突变发生在低耐药株。根据药敏试验和耐药基因检测结果 ,6个月耐多药结核治愈率分别达到 5 4 8%和 62 8% ,治疗效果满意 ,两种方法差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索 ,PCR SSCP方法敏感、特异 ,可以快速检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB耐药基因突变 。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 耐药基因 结核病 检测 临床应用 评价
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藏绵羊DQA1基因多态性分析 被引量:12
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作者 成述儒 罗玉柱 +2 位作者 胡江 王继卿 刘秀 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2146-2153,共8页
【目的】研究藏绵羊DQA1基因多态性,确定其等位基因数、核苷酸多态位点、氨基酸多态位点及各等位基因间的遗传关系,同时分析其进化意义。【方法】采用PCR-SSCP方法检测了900只藏绵羊DQA1基因第2外显子多态性;克隆、测序群体内变异产生... 【目的】研究藏绵羊DQA1基因多态性,确定其等位基因数、核苷酸多态位点、氨基酸多态位点及各等位基因间的遗传关系,同时分析其进化意义。【方法】采用PCR-SSCP方法检测了900只藏绵羊DQA1基因第2外显子多态性;克隆、测序群体内变异产生的各等位基因序列,并分析序列数据。【结果】发现了17个DQA1的等位基因,包括缺失的1种基因,其中5个为发现的新等位基因。16个单倍型序列中发现56个核苷酸多态位点,27个氨基酸多态位点。【结论】藏绵羊DQA1基因第2外显子具有丰富的多态性,群体中可能蕴藏着更多的遗传资源;藏绵羊DQA1基因最初可能是由2个等位基因突变分化成两大类等位基因的;藏绵羊DQA1基因第2外显子序列与牛的DQA1基因第2外显子序列具有较高的同源性,预示绵羊和牛的DQA1基因最早可能来源于它们分歧以前的共同祖先原始序列;DQA1基因在与其相关的特定抗原刺激下发生的免疫应答反应在绵羊和牛上具有相似性;新等位基因C的139位发现了1个新的核苷酸突变位点(A/G),属同义突变;5个新发现的DQA1等位基因遗传关系较近,可能由同一等位基因突变产生。 展开更多
关键词 DQA1基因 多态性 PCR-SSCP 藏绵羊
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人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析 被引量:7
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作者 张利能 俞强 +2 位作者 贺建宇 王丽影 查锡良 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第1期1-3,共3页
目的 研究人肝细胞癌中PTEN基因缺失及第5、第8外显子突变。方法 应用Southern杂交检测人肝细胞癌中PTEN基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性(PCRS... 目的 研究人肝细胞癌中PTEN基因缺失及第5、第8外显子突变。方法 应用Southern杂交检测人肝细胞癌中PTEN基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性(PCRSSCP)检查PTEN基因的第5、第8外显子的突变。结果 Southern杂交结果显示,所有34例肝细胞癌中PTEN基因未见限制性片段长度多态性或纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。PCRSSCP检测发现,2例肝细胞癌第5外显子PCR产物均显示1条额外电泳迁移带,突变率为5.9%(2/34)。另2例肝细胞癌第8外显子PCR产物呈现额外电泳迁移带,突变率为5.9%(2/34),合计突变率为11.8%(4/34)。结论 所检34例人肝细胞癌中PTEN基因未见纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失,但存在突变。 展开更多
关键词 肝细胞癌 基因突变 PETN基因 DNA杂交
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Interleukin-10 promoter polymorphisms in patients with hepatitis B virus infection or hepatocellular carcinoma in Chinese Han ethnic population 被引量:9
15
作者 Juan Wang, Hong Ni, Li Chen and Wen-Qin Song College of Life Sciences, Nankai Umversity, Tianjin 300071. China and College of Life Sciences, Shenzhen University, Shenzhen 518060, China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2006年第1期60-64,共5页
BACKGROUND: Since single nucleotide polymorphisms (SNPs) can serve as gene markers, polymorphism profiles may help scientists to identify the full collection of genes that contribute to the development of complex dise... BACKGROUND: Since single nucleotide polymorphisms (SNPs) can serve as gene markers, polymorphism profiles may help scientists to identify the full collection of genes that contribute to the development of complex diseases such as cancer. The distribution of interleukin-10 (IL-10) promoter polymorphisms in Chinese Han ethnic patients with hepatitis B virus (HBV) infection and hepatocellular carcinoma (HCC) was investigated in this study. METHODS: The polymorphisms of IL-10 promoter region were detected by pulymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) and sequencing. Sixty-six health controls, 42 patients with HBV infection, 30 HCC patients, and cell line SMMC-7721 were examined this way. RESULTS: Polyrnorphisms of T/C or T/N on-872 site occurred frequently in Han ethnic population. Pulyrnorphisms were detected in HBV and HCC patients and cell line SMMC-7721. The hotspot among the pulymorphisms was inserting base A between-1058 and-1057. CONCLUSION: Polymorphisms of IL-10 promoter in HBV and HCC patients may be associated with HBV infection and HCC development. 展开更多
关键词 INTERLEUKIN-10 polymorphisms on promoter region polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism hepatitis B virus carcinoma hepatocellular
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雄激素受体基因剪接受点突变G^(3346)→T引起一例完全型雄激素不敏感综合征 被引量:10
16
作者 张蔚 李修琪 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期14-16,共3页
目的 探讨完全型雄激素不敏感综合征 (complete androgen insensitivity syndrome,c AIS)发病的分子机理 ,并研究雄激素受体 (androgen receptor,AR)结构、功能及其与临床表现的关系。方法 用银染聚合酶链反应 -单链构象多态性 (polym... 目的 探讨完全型雄激素不敏感综合征 (complete androgen insensitivity syndrome,c AIS)发病的分子机理 ,并研究雄激素受体 (androgen receptor,AR)结构、功能及其与临床表现的关系。方法 用银染聚合酶链反应 -单链构象多态性 (polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism,PCR- SSCP)及 PCR产物直接测序的方法 ,对 1例完全型 AIS患者 AR基因外显子 B~H分别进行了研究。结果 外显子 F片段在 SSCP分析时有泳动变位 ,经测序 ,突变发生在内含子 5与外显子 F交界处 G33 46→T。结论 为首例发现的 AR基因剪接受点突变 ,GU- AG的高度保守对于维持 展开更多
关键词 完全型雄激素不敏感综合征 雄激素受体 聚合酶链反应-单链构象多态性 剪接受点
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中国人早发及多发糖尿病家系HNF-1α基因突变的筛查 被引量:9
17
作者 方启晨 张蓉 +2 位作者 王从容 林辛 项坤三 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期329-334,共6页
目的 了解中国人早发及多发糖尿病家系中肝细胞核因子HNF 1α基因突变发生情况。方法 应用聚合酶链反应 单链构象多态性技术和测序方法对 2 47名无亲缘关系上海地区中国人 [其中 93名为正常对照者 ,15 4例为早发和 (或 )多发糖尿病... 目的 了解中国人早发及多发糖尿病家系中肝细胞核因子HNF 1α基因突变发生情况。方法 应用聚合酶链反应 单链构象多态性技术和测序方法对 2 47名无亲缘关系上海地区中国人 [其中 93名为正常对照者 ,15 4例为早发和 (或 )多发糖尿病家系先证者 ]进行HNF 1α基因启动子区、10个外显子及其侧翼内含子区筛查。结果 在 15 4例糖尿病家系先证者者中见到 14种碱基改变。 3种改变未见于 93名非糖尿病者 ,其中启动子区nt -12 8T→G和IVS2nt +2 1G→A未见报道 ,且在家系中表现为与糖尿病共分离 ;另 11种碱基改变 ,它们的基因型和等位基因频率在糖尿病者及非糖尿病者间差异未见显著性 ,且各变异与血糖、胰岛素、C 肽及空腹血脂谱等临床变量均无相关。结论 HNF 1α基因突变不是上海地区中国人早发及多发糖尿病的主要原因。 展开更多
关键词 糖尿病 多发 Α基因 家系 早发 改变 筛查 碱基 内含子 外显子
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粘多糖贮积症Ⅱ型患者IDS基因的一个新突变 被引量:10
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作者 张春芽 李麓芸 +2 位作者 刘上峰 傅俊江 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期269-271,共3页
目的 研究粘多糖贮积症 型 ( mucopolysaccharidosis type ,MPS )患者的艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 ( iduronate- 2 - sulfatase,IDS)基因的基因突变。方法 应用聚合酶链反应 -单链构象多态性( polymerase chain reaction- single strand ... 目的 研究粘多糖贮积症 型 ( mucopolysaccharidosis type ,MPS )患者的艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 ( iduronate- 2 - sulfatase,IDS)基因的基因突变。方法 应用聚合酶链反应 -单链构象多态性( polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism,PCR- SSCP)对患者的 IDS基因可能的常见突变第 2、3、5、7~ 9外显子进行检测 ,并对 PCR- SSCP检出的突变进行直接测序 ,测序发现的突变进行 PCR-限制性酶切分析验证。结果 经 PCR- SSCP和 DNA序列分析发现该患者的第 7外显子发生新的点突变 ( G12 5 3T) ;聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 ( PCR- RFL P)电泳检测示患者和母亲出现突变导致的酶切位点 ,进一步验证了序列分析结果。结论 筛查所得的点突变 G12 5 3T可能是该 MPS 展开更多
关键词 粘多糖贮积症Ⅱ型 IDS基因 艾杜糖-2-硫酸酯酶基因 基因突变 PCR-SSCP
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先天性视网膜劈裂症基因突变分析 被引量:10
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作者 俞萍 李继承 +1 位作者 李瑞峰 张文涛 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期88-91,共4页
目的 阐明先天性视网膜劈裂症 (X- linked juvenile retinoschisis,RS or XL RS)的发病机理 ,为建立基因诊断的方法提供理论依据。方法 采用聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 ,对 6个独立 XL RS病例进行了 XL RS1基因突变筛选 ,并对... 目的 阐明先天性视网膜劈裂症 (X- linked juvenile retinoschisis,RS or XL RS)的发病机理 ,为建立基因诊断的方法提供理论依据。方法 采用聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 ,对 6个独立 XL RS病例进行了 XL RS1基因突变筛选 ,并对发现的异常泳动带进行 DNA测序 ,以明确突变位点 ;对发现的缺失突变进行 Southern印迹证实。结果 在 5个病例中发现基因突变。在家系 1中发现缺失突变 ,家系中的4个患者均缺失了 1、2和 3外显子。在外显子 4上检出 3种异常泳动带 ,分别为 3种突变 :Glu72 L ys、Glu72 Gln、Gly70 Ser。结论 XL RS1基因突变是导致中国人患 RS的主要原因。本研究结果可直接应用于RS的遗传咨询和产前基因诊断。 展开更多
关键词 先天性视网膜劈裂症 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 基因突变 基因诊断
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PCR-SSCP检测非霍奇金淋巴瘤患者骨髓克隆性T细胞受体基因重排及其临床意义 被引量:7
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作者 徐兵 田红 周淑芸 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期397-400,共4页
背景与目的:进一步了解非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinslymphoma,NHL)患者骨髓标本克隆T细胞受体(Tcellreceptor,TCR)基因重排情况及临床意义。方法:应用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)联合单链构象多态性(single-strandconfor... 背景与目的:进一步了解非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinslymphoma,NHL)患者骨髓标本克隆T细胞受体(Tcellreceptor,TCR)基因重排情况及临床意义。方法:应用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)联合单链构象多态性(single-strandconformationpolymorphism,SSCP)分析43例NHL患者骨髓标本TCRVγI-Jγ基因重排情况。结果:43例NHL患者有26例(60.5%)存在克隆性TCRVγI-Jγ基因重排。16例骨髓形态学检查未发现淋巴瘤细胞浸润者中有3例(18.8%)发现克隆性TCRVγI-Jγ基因重排,此3例患者分别于4~9个月后行骨髓形态检查时发现淋巴瘤细胞浸润;27例骨髓形态学检查有淋巴瘤细胞浸润者有23例(85.2%)存在克隆性TCRVγI-Jγ基因重排阳性。26例PCR扩增阳性病例经SSCP分析发现7例(26.9%)存在寡/亚克隆重排。7例存在寡/亚克隆重排患者经3~11个月有5例(71.4%)发展为白血病,存在寡/亚克隆重排NHL患者1年内转化为白血病的发生率显著高于无寡/亚克隆重排患者(10.5%)(P<0.005)。结论:应用PCR检测NHL患者骨髓标本克隆性TCRVγI-Jγ基因重排可较骨髓形态学检查更早发现NHL患者骨髓浸润微小病灶。具有寡/亚克隆NHL患者更易发展为白血病,还可发展为急性非淋巴细胞白血病。 展开更多
关键词 非霍奇金淋巴瘤 T细胞受体基因重排 寡克隆 亚克隆 聚合酶链反应 单链构象多态性
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