为了提高聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的银染效果和条带回收的效率,以广玉兰DNA为材料进行ISSR-PCR分析,比较了两种银染(常规银染法和快速银染法)和条带回收法(乙醇糖原法和改进的煮沸法).结果显示:两种银染方法效果一致,但常规银...为了提高聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的银染效果和条带回收的效率,以广玉兰DNA为材料进行ISSR-PCR分析,比较了两种银染(常规银染法和快速银染法)和条带回收法(乙醇糖原法和改进的煮沸法).结果显示:两种银染方法效果一致,但常规银染要用2-3 h,而快速银染仅用30 m in,是常规银染的1/6-1/4;改良的煮沸法回收条带比乙醇糖原法更简便、更快捷.因此,快速银染和改良的煮沸法条带回收法可以应用在以后的研究中.展开更多
目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚...目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。展开更多
文摘为了提高聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的银染效果和条带回收的效率,以广玉兰DNA为材料进行ISSR-PCR分析,比较了两种银染(常规银染法和快速银染法)和条带回收法(乙醇糖原法和改进的煮沸法).结果显示:两种银染方法效果一致,但常规银染要用2-3 h,而快速银染仅用30 m in,是常规银染的1/6-1/4;改良的煮沸法回收条带比乙醇糖原法更简便、更快捷.因此,快速银染和改良的煮沸法条带回收法可以应用在以后的研究中.
文摘目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。