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pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
马巧丽
刘爱翠
+2 位作者
王妍柏
汪超
王振海
《宁夏医科大学学报》
2015年第5期504-507,前插2,共5页
目的克隆布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因并构建荧光真核表达载体p EGFP-N1-omp25,检测其在大鼠脑内的表达。方法根据Genebank中omp25基因的核苷酸序列,设计并合成1对引物,以布鲁氏杆菌总基因组DNA为模板,进行PCR扩增得到omp25基因片段,并...
目的克隆布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因并构建荧光真核表达载体p EGFP-N1-omp25,检测其在大鼠脑内的表达。方法根据Genebank中omp25基因的核苷酸序列,设计并合成1对引物,以布鲁氏杆菌总基因组DNA为模板,进行PCR扩增得到omp25基因片段,并将omp25基因片段及质粒p EGFP-N1分别进行进行酶切、体外连接,使其定向重组,构建其重组质粒。将制备的重组质粒经侧脑室注射至大鼠,检测p EGFP-N1-omp25在大鼠脑内的表达。结果 PCR扩增出642bp大小的片段,挑取的LB固体培养基上的单菌落经菌液PCR、酶切、测序表明成功构建了p EGFP-N1-omp25荧光真核表达载体。质粒经大鼠侧脑室注射后,脑组织冰冻切片可见荧光表达。结论采用体外重组技术,成功构建了布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因的真核表达载体,且重组质粒在大鼠脑组织内成功表达。
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关键词
布鲁氏杆菌
基因om
p
25
载体
p
egfp
-
n
1
侧脑室注射
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职称材料
题名
pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
马巧丽
刘爱翠
王妍柏
汪超
王振海
机构
宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室
宁夏医科大学总医院神经内科
宁夏医科大学总医院脑脊液实验室
出处
《宁夏医科大学学报》
2015年第5期504-507,前插2,共5页
基金
国家自然科学基金(81260189)
文摘
目的克隆布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因并构建荧光真核表达载体p EGFP-N1-omp25,检测其在大鼠脑内的表达。方法根据Genebank中omp25基因的核苷酸序列,设计并合成1对引物,以布鲁氏杆菌总基因组DNA为模板,进行PCR扩增得到omp25基因片段,并将omp25基因片段及质粒p EGFP-N1分别进行进行酶切、体外连接,使其定向重组,构建其重组质粒。将制备的重组质粒经侧脑室注射至大鼠,检测p EGFP-N1-omp25在大鼠脑内的表达。结果 PCR扩增出642bp大小的片段,挑取的LB固体培养基上的单菌落经菌液PCR、酶切、测序表明成功构建了p EGFP-N1-omp25荧光真核表达载体。质粒经大鼠侧脑室注射后,脑组织冰冻切片可见荧光表达。结论采用体外重组技术,成功构建了布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因的真核表达载体,且重组质粒在大鼠脑组织内成功表达。
关键词
布鲁氏杆菌
基因om
p
25
载体
p
egfp
-
n
1
侧脑室注射
Keywords
Brucella
om
p
25
ge
n
e
plasmid
p
egfp
-
n
1
i
n
tracerebrove
n
tricular
i
n
jectio
n
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定
马巧丽
刘爱翠
王妍柏
汪超
王振海
《宁夏医科大学学报》
2015
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