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有毒赤潮藻种Pfiesteria piscicida的研究进展综述 被引量:11
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作者 颜天 周名江 曾呈奎 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期110-116,共7页
根据1992-1999年国外发表的资料,对有毒赤潮藻种Pfiesteria piscicidaSteidinger et Burkholder sp. nov的结构、行为、生活史、毒素及分泌方式、危害等各方面的研究进展进... 根据1992-1999年国外发表的资料,对有毒赤潮藻种Pfiesteria piscicidaSteidinger et Burkholder sp. nov的结构、行为、生活史、毒素及分泌方式、危害等各方面的研究进展进行了综述。结果表明,该藻是近年才发现的一种赤潮新种,是美国东海岸危害渔业的主要有害藻,具有复杂多变的结构、“幽灵般”的行为和生活史、高活性的毒素及特殊分泌方式,对海洋生物和人类健康存在极为重要的影响。 展开更多
关键词 赤潮 涡鞭毛藻 PFIESTERIA piscicida
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杀鱼爱德华氏菌ETAE_1309基因的启动子研究
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作者 刘鹿忆 何弯弯 +5 位作者 朱泽亮 邓平 艾桃山 谢海侠 朱文欢 张立强 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2024年第5期3-12,共10页
为研究杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)ETAE_1309蛋白的表达调控机制,本实验利用序列截短方式和定点突变技术鉴定了ETAE_1309基因的启动子,并检测了不同培养条件下启动子的活性。结果显示:ETAE_1309上游-139~-1 bp具有启动子活... 为研究杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)ETAE_1309蛋白的表达调控机制,本实验利用序列截短方式和定点突变技术鉴定了ETAE_1309基因的启动子,并检测了不同培养条件下启动子的活性。结果显示:ETAE_1309上游-139~-1 bp具有启动子活性,ETAE_1309的核心启动子为-10元件TATACT和-35元件CTGGCG,该启动子属于σ38依赖型启动子。ETAE_1309转录水平受到RpoS_(Ep)(σ^(38))强烈的正调控,与毒力相关的调控蛋白EsrB、EsrC和与生理过程相关的Fur、CpxR、ETAE_2077对ETAE_1309转录水平影响不大。当杀鱼爱德华氏菌在DMEM培养基中生长时,随着培养时间延长ETAE_1309启动子活性逐渐增加,24 h(稳定期)和36 h(衰亡期)启动子活性分别为12 h(对数期)的2.4倍和2.9倍。当培养温度升高至35℃时ETAE_1309启动子活性显著下降,约为25℃时启动子活性的44.0%。本研究确证了杀鱼爱德华氏菌ETAE_1309的启动子序列及调控蛋白,随着培养时间延长该启动子活性逐渐增加,随着培养温度升高该启动子活性显著降低,研究结果为精准控制ETAE_1309蛋白表达及其介导的细菌毒力奠定了基础。 展开更多
关键词 ETAE_1309 启动子 sigma因子 转录调控 杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)
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大菱鲆源杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)的分离鉴定 被引量:5
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作者 尚琨 王斌 +2 位作者 刘欣 高萍 曲凌云 《河北渔业》 2019年第1期21-25,共5页
从患腹水病大菱鲆Scophthalmus maximus的肝脏中分离到一株优势细菌G1,经人工感染实验表明G1为引发大菱鲆腹水病的致病菌,且半致死浓度为LD50=1.21×105 CFU·g-1。采用常规的生理生化鉴定方法及分子生物学方法对G1进行分析,结... 从患腹水病大菱鲆Scophthalmus maximus的肝脏中分离到一株优势细菌G1,经人工感染实验表明G1为引发大菱鲆腹水病的致病菌,且半致死浓度为LD50=1.21×105 CFU·g-1。采用常规的生理生化鉴定方法及分子生物学方法对G1进行分析,结果表明,G1的16SrRNA基因序列与杀鱼爱德华氏菌Edwardsiella piscicida的同源性达100%,系统发育分析表明菌株G1与杀鱼爱德华氏菌分支聚为一支,结合生理生化鉴定结果确定G1为杀鱼爱德华氏菌。药敏试验表明菌株G1对头孢曲松、环丙氟哌酸、左氧氟沙星等8种抗菌药物高度敏感。 展开更多
关键词 大菱鲆Scophthalmus MAXIMUS 杀鱼爱德华氏菌Edwardsiella piscicida 鉴定 药敏试验
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条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)的分离鉴定 被引量:8
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作者 王庚申 许文军 +2 位作者 谢建军 汪玮 施慧 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第2期151-157,共7页
2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量... 2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×10~4 CFU/g。形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长。API 20E细菌鉴定系统、16S r RNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselaesubsp.piscicida)。该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性。 展开更多
关键词 条石鲷 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 细菌鉴定
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Identification of two pIgR-like molecules in teleost fish with opposite roles in mucosal immunity against bacterial infection
5
作者 Haoyue Xu Zixuan Wang +4 位作者 Zhenyu Huang Xiaoyun Chen Ruiqi Lin Yongyao Yu Zhen Xu 《Water Biology and Security》 2023年第4期101-115,共15页
Polymeric immunoglobulin(Ig)receptor-like(pIgRL)molecules have been identified in teleost fish.However,compared to functional studies of their related genes(e.g.,mammalian CD300 family)in eliminating pathogen invasion... Polymeric immunoglobulin(Ig)receptor-like(pIgRL)molecules have been identified in teleost fish.However,compared to functional studies of their related genes(e.g.,mammalian CD300 family)in eliminating pathogen invasion while preserving homeostasis,the roles of pIgRL in teleost fish remain unclear.In this study,we demonstrated that a pair of pIgRL molecules in zebrafish,pIgRL3.5 and pIgRL4.2,were highly expressed in the intestine and immune cells.Moreover,we constructed an Edwardsiella piscicida infection model,which induced strong inflammatory responses in the zebrafish intestine.Interestingly,pIgRL3.5 and pIgRL4.2 exhibited opposite inducible expression patterns in response to bacterial infection,suggesting that they perform different roles.More importantly,by conducting overexpression and knockdown experiments,our findings demonstrated that zebrafish pIgRL3.5 played a protective role in host defense against E.piscicida infection by inhibiting excessive inflammatory responses.In contrast,pIgRL4.2 facilitated pathogen growth and dissemination in zebrafish intestine.Collectively,our findings are the first to demonstrate that a pair of pIgRL molecules in teleost fish play opposite roles in mucosal immune response to bacterial infection.Therefore,our results provide crucial insights into the conserved role of pIgRL molecules in immune regulatory functions throughout vertebrate evolution. 展开更多
关键词 pIgR-like Mucosal immunity Edwardsiella piscicida Inflammatory response ZEBRAFISH
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Genome-wide characterization of mapk gene family in black rockfish Sebastes schlegelii and their expression patterns against Edwardsiella piscicida infection
6
作者 Xiaoyan ZHANG Yuan TIAN +2 位作者 Haohui YU Min CAO Chao LI 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期2348-2362,共15页
Mitogen-activated protein kinases(MAPKs)play pivotal roles in response to environmental stresses and bacterial infections.Compared with those in the higher vertebrates,studies of mapk gene family are still limited in ... Mitogen-activated protein kinases(MAPKs)play pivotal roles in response to environmental stresses and bacterial infections.Compared with those in the higher vertebrates,studies of mapk gene family are still limited in teleost.Identification,characterization,classification,and expression profiling of totally 15 mapk genes in black rockfish(Sebastes schlegelii)were conducted.Phylogenetic relationships show that these mapk genes could be divided into extracellular signal-regulated kinase(ERK),c-Jun N-terminal kinase(JNK),and p38 sub-families.In addition,gene structures,syntenic analysis,and selective pressure analysis are performed to confirm their annotations.Results of selective pressure analysis indicate that mapk1,mapk3,mapk7,mapk10,mapk11,and mapk12 underwent significantly-positive selections,while the others genes such as mapk4,mapk6,mapk15,mapk8a,mapk8b,mapk9,mapk13,mapk14a,and mapk14b were under purifying selections.Moreover,results of qRT-PCR indicate that mapk genes in 8 healthy tissues displayed different expression patterns.The expression patterns of several mapk genes including mapk12,mapk13,mapk14a,mapk14b,and mapk15 were significantly changed in mucosal tissues after Edwardsiella piscicida infection.This study demonstrates that mapk genes in black rockfish play vital prevention roles against bacterial infection,which not only helps us understand the structure and function of mapk genes in black rockfish,but also provides a reference to understand the role of mapk genes in teleost immune responses. 展开更多
关键词 Sebastes schlegelii mitogen activated protein kinases(mapk) Edwardsiella piscicida expression profiles
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动物血清刺激下的有毒甲藻生长研究(英文)
7
作者 Katherine Beauchamp 林森杰 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第A02期225-232,共8页
目前有关Pfiesteria piscicida Steindinger et Burkholder的摄食行为研究已有相当多的报道,然而这种生物是如何应用蛋白的还没有人做过研究.我们研究了P.piscicida依赖于血清蛋白的生长能力,发现不管添不添加其捕食者Rhodomonas s... 目前有关Pfiesteria piscicida Steindinger et Burkholder的摄食行为研究已有相当多的报道,然而这种生物是如何应用蛋白的还没有人做过研究.我们研究了P.piscicida依赖于血清蛋白的生长能力,发现不管添不添加其捕食者Rhodomonas sp.,仅仅1h后,添加了动物血清的实验组就比未添加血清的对照组显示出明显出更快的生长速率,这种活跃的生长至少持续了4h.当添加了异硫氰酸荧光素的共扼免疫蛋白后,在P.piscicida的细胞中检测到了荧光;第1个小时只能检测到微弱的荧光。此后荧光逐渐增强,到3~4h达到最强.此外.我们还进一步通过蛋白质印迹法来验证P.piscicida细胞对血清蛋白质的吸收.本研究首次提供了沟鞭藻能够消化利用蛋白质的直接证据,并且发现P.piscicida生长响应与动物蛋白的添加几乎是同步的.尽管细胞快速生长机制还有待进一步研究。但我们的发现可能解释了P.piscicida是如何得益于其吞噬摄食方式及如何在鱼类出现时作出快速反应的. 展开更多
关键词 异养性沟鞭藻 PFIESTERIA piscicida 免疫荧光 蛋白 血清 蛋白质印迹法
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Multi-tissue scRNA-seq reveals immune cell landscape of turbot (Scophthalmus maximus) 被引量:2
8
作者 Weijie Chen Jianchang Huang +6 位作者 Wei Wang Ying Wang Hao Chen Qiyao Wang Yuanxing Zhang Qin Liu Dahai Yang 《Fundamental Research》 CAS 2022年第4期550-561,共12页
In vertebrates,bony fishes possess not only innate immune cells but also T and B cells that are equivalent to those in mammals.However,the precise sub-cluster of immune cells in teleost fish remains largely unknown.He... In vertebrates,bony fishes possess not only innate immune cells but also T and B cells that are equivalent to those in mammals.However,the precise sub-cluster of immune cells in teleost fish remains largely unknown.Herein,we developed a dynamic bacterial infection model in turbot(Scophthalmus maximus)and created a fish immune cell landscape(FICL)for a primary lymphoid organ(head kidney),a secondary lymphoid organ(spleen),and barrier tissues(gill and posterior intestine).Moreover,through comprehensive characterization of the expression profiles of 16 clusters,including dendritic cells-like(DCs-like),macrophages(Mos),neutrophils,NK cells,as well as 12 sub-clusters of T and B cells,we found that CD8+CTLs,CD4-CD8-T,Th17 and ILC3-2 like cells posssa bifunctional role associated with cytotoxicity and immunoregulation during bacterial infection.To our knowledge,these results could provide a useful resource for a better understanding of immune cells in teleost fish and could act as a comprehensive knowledge base for assessing the evolutionary mechanism of adaptive immunity in vertebrates. 展开更多
关键词 ScRNA-Seq Fish immune cellandscape Dynamic immunecell responses Edwardsiella piscicida infection TURBOT
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半滑舌鳎病原菌(发光杆菌杀鱼亚种)的分离与鉴定(英文) 被引量:31
9
作者 王燕 韩茵 +2 位作者 李筠 陈吉祥 张晓华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期763-768,共6页
2006年夏,山东青岛某渔场养殖半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther)大量死亡。症状主要表现为体表溃烂,鳍基部出血等,解剖可见胆囊发黑,肾脏发黄。从患病半滑舌鳎胆囊分离出优势菌并命名为WY06。人工感染试验证实WY06对半滑舌鳎及... 2006年夏,山东青岛某渔场养殖半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther)大量死亡。症状主要表现为体表溃烂,鳍基部出血等,解剖可见胆囊发黑,肾脏发黄。从患病半滑舌鳎胆囊分离出优势菌并命名为WY06。人工感染试验证实WY06对半滑舌鳎及模式动物斑马鱼都具有很强的致病性,其半数致死量分别为5.5×103cfu/克鱼(5.2×105cfu/条鱼)和1.9×103cfu/克鱼(8.9×102cfu/条鱼)。该病原菌革兰氏染色阴性,菌体呈杆状。综合该菌在形态、生理生化特征及16S rDNA同源性等方面的结果,确认WY06为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)。该菌对头孢呋肟、菌必治等抗生素敏感。美人鱼发光杆菌杀鱼亚种在美国、日本、欧洲的海水养殖中为常见的病原菌,但作为鱼类病原菌在中国属首次报道。 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 Photobacterium damselae
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卵形鲳鲹美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的分离鉴定 被引量:28
10
作者 王瑞旋 冯娟 +2 位作者 苏友禄 蓝祥宾 王江勇 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1020-1027,共8页
2006年海南省凌水网箱养殖卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)出现大批死亡。肉眼观察病鱼体表完好,部分病鱼内脏稍肿大,病理组织研究显示脾脏和肝脏有灰白色结节。从病鱼的脾脏分离到1株明显优势菌,命名为TOS1,人工感染确认TOS1对卵形鲳鲹... 2006年海南省凌水网箱养殖卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)出现大批死亡。肉眼观察病鱼体表完好,部分病鱼内脏稍肿大,病理组织研究显示脾脏和肝脏有灰白色结节。从病鱼的脾脏分离到1株明显优势菌,命名为TOS1,人工感染确认TOS1对卵形鲳鲹有强致病性,其半数致死量为1.1×106CFU/g,组织病理研究显示相同症状,因此确定TOS1为本次流行病的病原菌。经API鉴定系统和16SrDNA序列分析结合常规生化指标,将TOS1鉴定为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)。该菌具有很强的溶血性和较强的蛋白酶活性,对多种抗生素和中草药均具抗性,仅对诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素等敏感,对中草药番石榴(Psidium guajava)和苍术(Atractylodes lancea)高度敏感。以上敏感药物可作为该病预防或治疗的参考用药。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 细菌鉴定 药敏试验
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美人鱼发光杆菌杀鱼亚种感染卵形鲳鲹的病理学观察 被引量:14
11
作者 苏友禄 冯娟 +2 位作者 郭志勋 徐力文 王江勇 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期75-81,共7页
病原菌美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)分离自发病的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus),本实验利用腹腔注射和浸泡的感染途径,观察卵形鲳鲹发光杆菌病的病理变化。感染发病鱼呈现急性和慢性临床症状,主要... 病原菌美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)分离自发病的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus),本实验利用腹腔注射和浸泡的感染途径,观察卵形鲳鲹发光杆菌病的病理变化。感染发病鱼呈现急性和慢性临床症状,主要急性症状为鳃盖周围轻微出血,腹腔积水和内脏器官多灶性坏死;主要慢性症状为脾脏、肾脏和心脏内能观察到直径为0.5~1.0 mm的白色粟米样结节;利用光学显微镜和透射电镜观察的组织病理显示:急性病理症状主要表现为鳃、肝和肾发生变性及凝固性坏死,肾管微绒毛紊乱,线粒体的嵴脱落,脾淋巴细胞增生,核染色质边集,心肌细胞发生多灶性坏死,线粒体增生,肠道的病变较轻微。慢性病理症状主要表现为鳃丝上皮细胞坏死,脾淋巴细胞线粒体、高尔基体和内质网溶解,肾小管上皮细胞的微绒毛脱落,心肌纤维Z带排列紊乱,线粒体变性,肝脏、肾脏、脾脏、心脏和肠道出现典型的肉芽肿病变。相比之下,脾脏、肾脏和心脏的病变是所有器官中最严重的。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida) 病理学
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大口黑鲈杀鱼爱德华氏菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:3
12
作者 郭文杰 韩锐 +2 位作者 许为镇 李言伟 但学明 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期47-51,68,共6页
2022年3月,广东珠三角地区养殖的大口黑鲈(Micropterus salmoides)发生了大规模暴发性死亡,特别是佛山市南海区,死亡率高达20%~50%。为明确大口黑鲈死亡原因,采集佛山市南海区沙头镇腹部膨大和内脏缺血、体长25~35 cm濒死病鱼42尾,进行... 2022年3月,广东珠三角地区养殖的大口黑鲈(Micropterus salmoides)发生了大规模暴发性死亡,特别是佛山市南海区,死亡率高达20%~50%。为明确大口黑鲈死亡原因,采集佛山市南海区沙头镇腹部膨大和内脏缺血、体长25~35 cm濒死病鱼42尾,进行组织病理分析、病原分离与鉴定、病原菌毒力和耐药性检测等,为该病的诊断和防控提供科学依据。结果显示,病鱼主要临床症状为严重腹水、肝脏和鳃缺血以及肝脏和肾脏肿大。病理切片显示。肝脏和肾脏均严重组织变性和细胞坏死。从肝脾肾组织中均分离出大量菌落形态一致的细菌,其中肝组织细菌丰度最高。生化鉴定和16S rRNA分子鉴定结果表明:细菌S1为杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida),在系统进化树中与杀鱼爱德华氏菌(MN203719.1)自然聚为一支。动物回归感染实验表明该菌为引起大口黑鲈死亡的致病菌,且毒力很强。药敏试验结果显示,该菌对氟苯尼考、恩诺沙星、多西环素等药物敏感,对利福平、阿莫西林、四环素耐受。 展开更多
关键词 大口黑鲈 杀鱼爱德华氏菌 分离鉴定 耐药性检测
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杀鱼爱德华氏菌新型毒力因子研究进展
13
作者 李静林 宫春光 +3 位作者 舒艾梅 张杉杉 高博 胡永华 《水产学杂志》 CAS 2024年第3期94-99,共6页
杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida,又称迟缓爱德华氏菌),可感染多种重要水产养殖动物,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。杀鱼爱德华氏菌具有很强的环境适应性与抗逆性,通过典型的胞内寄生引发严重感染,为研究水产致病菌毒力机... 杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida,又称迟缓爱德华氏菌),可感染多种重要水产养殖动物,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。杀鱼爱德华氏菌具有很强的环境适应性与抗逆性,通过典型的胞内寄生引发严重感染,为研究水产致病菌毒力机制的模型菌株。除T3SS/T6SS系统等典型毒力因子外,近年来又在杀鱼爱德华氏菌中鉴定出众多新型毒力因子。本文主要综述了杀鱼爱德华氏菌一些新型毒力因子(如逃逸宿主免疫杀伤因子、毒素-抗毒素、硫氧还蛋白和蛋白酶类等)以及新型毒力调控因子的研究进展,可为研究该菌致病性提供参考。 展开更多
关键词 杀鱼爱德华氏菌 水产致病菌 新型毒力因子 毒素-抗毒素系统
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杀鱼爱德华氏菌新型抗酸系统GadBCD的抗酸作用与致病作用
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作者 高博 宫春光 +3 位作者 舒艾梅 张杉杉 李静林 胡永华 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期230-241,共12页
本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高... 本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高温刺激细菌时gadBCD表达基本不变,但过氧化氢和宿主血清刺激时gadBCD表达显著上调。利用同源重组构建了GadBCD系统缺失突变株ΔgadP,通过比较野生株和ΔgadP的生长曲线以及酸性压力下存活率等实验,发现GadBCD系统不仅是杀鱼爱德华氏菌抗中强酸的重要参与者,也是抗强酸所必需的;通过比较野生株和ΔgadP在生物膜形成、运动性、抗宿主血清杀伤、感染细胞等方面的差异,发现GadBCD参与了细菌的毒力。综上所述,GadBCD系统是杀鱼爱德华氏菌重要的抗强酸系统,并参与了细菌的致病作用。 展开更多
关键词 杀鱼爱德华氏菌 谷氨酸脱羧酶系统 抗酸性 致病作用
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3种美人鱼发光杆菌疫苗对卵形鲳鲹的免疫效果 被引量:6
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作者 苏友禄 冯娟 +4 位作者 郭志勋 王瑞旋 徐力文 姜敬哲 王江勇 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期105-110,共6页
用美人鱼发光杆菌Photobacterium damselae subsp.piscicida制备外膜蛋白(OMP)、脂多糖(LPS)及甲醛灭活全菌(FKC)3种疫苗,分别腹腔注射卵形鲳鲹Trachinotus ovatus,在免疫后第7、14、21、28天进行尾静脉采血,检测试验鱼的白细胞吞噬活... 用美人鱼发光杆菌Photobacterium damselae subsp.piscicida制备外膜蛋白(OMP)、脂多糖(LPS)及甲醛灭活全菌(FKC)3种疫苗,分别腹腔注射卵形鲳鲹Trachinotus ovatus,在免疫后第7、14、21、28天进行尾静脉采血,检测试验鱼的白细胞吞噬活性、溶菌酶活力以及血清凝集抗体效价等免疫指标.与对照组相比,OMP、LPS和FKC均能显著提高所测的免疫指标(P<0.05),白细胞吞噬百分比、吞噬指数和血清溶菌酶活力在免疫第14~21天内,保持较高的水平,而血清抗体滴度则在免疫第14天后维持在较高的水平.免疫第28天后,测得LPS或OMP免疫组的鱼体增质量率明显高于FKC免疫组(P<0.05),同时进行人工感染,LPS、OMP和FKC免疫组的相对保护率分别为66.7%、60.0%和38.8%.说明注射美人鱼发光杆菌的LPS或OMP疫苗能给卵形鲳鲹提供良好的免疫保护效果. 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌 疫苗 卵形鲳鲹 免疫效果
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60种中草药及其复方对杀鱼爱德华氏菌的体外抑菌效果 被引量:4
16
作者 胡建美 王宝屯 +2 位作者 冯娟 许新 苏友禄 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第2期27-35,共9页
【目的】探究60种单方中草药和4种复方中草药水提液对花鲈(Lateolabrax maculatus)源杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)的体外抑菌效果。【方法】首先采用平板打孔法判断中草药有无抑菌作用,然后使用试管二倍稀释法测定具有抑菌... 【目的】探究60种单方中草药和4种复方中草药水提液对花鲈(Lateolabrax maculatus)源杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)的体外抑菌效果。【方法】首先采用平板打孔法判断中草药有无抑菌作用,然后使用试管二倍稀释法测定具有抑菌效果的14种中药的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),并选择其中部分中药组合,进行复方评价。【结果】苏木(Caesalpinia sappan)的抑菌圈直径可达到约22 mm;分心木(Semen juglandis)、石榴皮(Punica granatum)和番石榴叶(Psidium guajava)的抑菌圈直径均大于15 mm;半枝莲(Scutellaria barbata)和石榴皮的MIC为15.625 mg/mL,蒲公英(Taraxacum mongolicum)和乌梅(Fructus mume)的MBC为31.25 mg/mL。在复方试验中,苏木+半枝莲和地榆(Sanguisorba officinalis)+乌梅的抑菌效果良好,其中苏木+半枝莲效果最佳,抑菌圈直径可达20.13 mm,MIC为31.25 mg/mL,MBC为125 mg/mL;4种复方中草药的联和抑菌指数(Fraction inhibitory concentration index,FICI)显示,联合用药的两种中草药的作用效应均为拮抗。【结论】单方中草药半枝莲、石榴皮、乌梅和蒲公英对杀鱼爱德华氏菌有较强的体外抑菌和杀菌作用。 展开更多
关键词 花鲈 杀鱼爱德华氏菌 体外抑菌 中草药
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短期投喂石榴皮水提物对花鲈防控杀鱼爱德华氏菌感染的作用 被引量:1
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作者 胡建美 马壮 +3 位作者 王宝屯 黄伟民 冯娟 苏友禄 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期397-405,共9页
为探究石榴皮(Punica granatum L.)对花鲈(Lateolabrax maculatus)防控杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)感染的作用,采用石榴皮水提物拌饲(添加量为4、8 g/kg)后连续投喂花鲈(体质量为10.14 g±2.53 g)7 d,分别在投喂3、5、... 为探究石榴皮(Punica granatum L.)对花鲈(Lateolabrax maculatus)防控杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)感染的作用,采用石榴皮水提物拌饲(添加量为4、8 g/kg)后连续投喂花鲈(体质量为10.14 g±2.53 g)7 d,分别在投喂3、5、7 d时,检测鱼体血清生理生化指标和免疫相关酶活性,以及脾脏、鳃和头肾组织中免疫相关基因表达量,并用杀鱼爱德华氏菌浸泡感染花鲈,探究石榴皮水提物在细菌侵染鱼体中的防控效果。结果表明:与对照组相比,投喂添加石榴皮水提物饲料的试验组花鲈,随投喂时间延长,血清中总胆固醇、谷丙转氨酶、谷胱甘肽还原酶、乳酸脱氢酶、总蛋白和高密度脂蛋白含量均显著升高(P<0.05),投喂3、5 d时,血糖含量显著降低(P<0.05),碱性磷酸酶(AKP)活性显著升高(P<0.05);脾脏中LZM基因和头肾NK-lysin、LZM基因表达量降低,其余免疫相关基因相对表达量均有所升高;投喂石榴皮水提物混合饲料5 d后,使用杀鱼爱德华氏菌浸泡感染花鲈,其存活率显著提高(P<0.05),说明石榴皮水提物对花鲈的杀鱼爱德华氏菌感染具有良好的防控效果,其中4、8 g/kg石榴皮水提物添加组对花鲈的相对保护率分别为50%和47%。研究表明,投喂石榴皮水提物混合饲料在短期内可有效增强花鲈免疫力和抗杀鱼爱德华氏菌感染力,且显著提高花鲈在杀鱼爱德华氏菌浸泡感染后的存活率。 展开更多
关键词 石榴皮 花鲈 杀鱼爱德华氏菌 免疫力
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杀鱼爱德华氏菌双组分调控系统研究进展
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作者 金梦如 胡永华 孙冬梅 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年第5期78-84,116,共8页
杀鱼爱德华氏菌是一种重要的鱼类病原菌,可感染多种重要的经济鱼类,包括海水鱼如大菱鲆、牙鲆、石斑鱼和淡水鱼如罗非鱼等。杀鱼爱德华氏菌致病机制复杂,由多因素构成,其中双组分调控系统(two-component regulatory system,TCS)是其发... 杀鱼爱德华氏菌是一种重要的鱼类病原菌,可感染多种重要的经济鱼类,包括海水鱼如大菱鲆、牙鲆、石斑鱼和淡水鱼如罗非鱼等。杀鱼爱德华氏菌致病机制复杂,由多因素构成,其中双组分调控系统(two-component regulatory system,TCS)是其发挥抗逆作用与致病作用的一种重要系统,与细菌抗酸、抗氧化、生物被膜形成、运动性、毒力相关因子的表达等密切相关。当前,杀鱼爱德华氏菌已成为研究水产动物致病菌的一个模式菌株,尽管其致病机制相关研究相对深入,但有关杀鱼爱德华氏菌TCS的研究还很缺乏。为明确TCS在病原菌中发挥的作用,对杀鱼爱德华氏菌TCS的组成、TCS对T3SS/T6SS和其他毒力因子的调控作用与机制以及双组分系统受调控的作用等方面进行了综述,结论表明:(1)TCS对环境应激、T3SS/T6SS、其他毒力因子以及对Mg2+浓度感知和氨基酸途径代谢等方面具有调控作用;(2)EsrA-EsrB系统受到FabR、EvrA的正调控;(3)EsrA-EsrB系统受到RpoS、PepA、MviN、UhpA、EnrR等的负调控;(4)EsrB与Fur存在相互作用。通过综述以上结论,以期能促进相关研究的深入。 展开更多
关键词 杀鱼爱德华氏菌 双组分调控系统 毒力 调控
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一种利用λRed重组技术在杀鱼爱德华氏菌基因组添加标签的方法
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作者 张淑雅 李端友 +3 位作者 刘莹莉 贺甜甜 聂品 谢海侠 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期895-902,共8页
在杀鱼爱德华氏菌病原学研究中,在动物中制备杀鱼爱德华氏菌蛋白抗体耗时长,且获得的多克隆或多肽抗体在宿主细胞中特异性差,背景信号强。为解决这一问题,对在大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)中建立起来的λRed基因... 在杀鱼爱德华氏菌病原学研究中,在动物中制备杀鱼爱德华氏菌蛋白抗体耗时长,且获得的多克隆或多肽抗体在宿主细胞中特异性差,背景信号强。为解决这一问题,对在大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)中建立起来的λRed基因编辑方法进行调整和优化,建立了在杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)基因组基因上添加HA标签序列的方法,为使用标签抗体研究杀鱼爱德华氏菌基因功能提供便利。λRed重组系统利用同源线性DNA片段与基因组DNA进行重组。即以质粒pSU315为模板,在引物上引入目的基因的特异性序列,扩增FRT序列和抗生素抗性基因;以获得的PCR产物转化携带pKD46的杀鱼爱德华氏菌,在pKD46表达的λ噬菌体的3个重组蛋白(Exo、Beta和Gam)作用下,PCR产物与杀鱼爱德华氏菌基因组发生同源重组,获得引入了抗生素抗性的靶基因缺失或靶基因携带标签序列的菌株;接着利用pKD46的温敏型特性,消除引入的pKD46;最后向杀鱼爱德华氏菌引入文章构建的表达Flp重组酶的质粒pKD46-flp,在FLP作用下,两个FRT位点之间发生重组,消除抗生素抗性基因和一个FRT位点,获得携带一个FRT位点序列、靶基因缺失或靶基因添加标签序列的杀鱼爱德华氏菌菌株。该遗传操作平台的建立为杀鱼爱德华氏菌基因功能研究提供便利条件,亦为其他水产病原细菌遗传操作方法的建立提供借鉴。 展开更多
关键词 λRed重组 基因组基因标签序列添加 pKD46-flp 杀鱼爱德华氏菌
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杀鱼假交替单胞菌C923几丁质酶基因PpchiC的克隆表达与酶学性质
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作者 薛家威 温崇庆 +3 位作者 王玲 宁为民 戴思婷 薛明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期91-106,共16页
【背景】某些假交替单胞菌可分泌几丁质酶,在降解利用几丁质为水产动物提供营养、免疫、抗病等方面有着重要潜力。【目的】克隆杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)C923的一个几丁质酶基因,实现其在大肠杆菌中的异源表达,并... 【背景】某些假交替单胞菌可分泌几丁质酶,在降解利用几丁质为水产动物提供营养、免疫、抗病等方面有着重要潜力。【目的】克隆杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)C923的一个几丁质酶基因,实现其在大肠杆菌中的异源表达,并对重组几丁质酶的酶学性质进行研究。【方法】从菌株C923测序的基因组中注释到一个几丁质酶家族基因PpchiC,设计引物克隆该基因后进行生物信息学分析;构建载体进行异源表达并从温度、时间与诱导剂浓度进行表达优化;对表达蛋白进行最适温度与pH等酶学性质研究,同时比较了重组菌破碎后上清与沉淀及纯化的酶蛋白对几丁质的降解效应。【结果】基因PpchiC长1350bp,编码450个氨基酸,PpchiC蛋白理论分子量为48.76kDa,等电点为4.78,不稳定系数为29.08。结构域分析发现该蛋白含有一个类型Ⅲ几丁质结合域和一个糖苷水解酶18家族(glycosyl hydrolase 18,GH18)的催化域;PpchiC蛋白含有GH18家族几丁质酶的保守催化基序DxxDxDxE、YxR和[E/D]xx[V/I]。16℃、0.25 mmol/L IPTG、诱导12 h为其最优化表达条件,PpchiC在50℃、pH 8.0时表现出最大酶活性;以胶体几丁质为底物时,PpchiC的Km值为2.58 mg/mL、Vmax值为5.04 mg/(mL·min)。降解结果表明,菌体的沉淀与上清及从上清中纯化的酶蛋白均有着较好的几丁质降解效应。【结论】杀鱼假交替单胞菌C923基因PpchiC编码GH18家族的几丁质酶,能被大肠杆菌高效表达且降解几丁质效应明显,这为PpchiC及菌株C923的应用提供了参考依据。 展开更多
关键词 杀鱼假交替单胞菌 几丁质酶 酶学性质
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