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巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展 被引量：65
1
作者 欧阳立明 张惠展 +1 位作者 张嗣良 刘志敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期151-154,共4页
巴斯德毕赤酵母是一种近年来广泛使用的基因表达系统 ,它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等许多优点 .综述了该系统在载体类型、载体元件 (包括启动子、选择标记和信号肽序列 )、受体类型。
关键词 巴斯德毕赤酵母 基因表达系统 载体 受体
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巴斯德毕赤酵母表达系统及其高水平表达策略 被引量：17
2
作者 胡世界 罗素兰 +1 位作者 张吉贞 长孙东亭 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期78-83,共6页
毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达... 毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达载体和宿主菌的特点,以及高水平表达外源基因的策略。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 酵母表达系统 高水平表达 表达策略
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巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 被引量：10
3
作者 王黎明 王琦 梅汝鸿 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期42-45,共4页
巴斯德毕赤酵母外源基因表达系统是近年来发展的一种优秀的真核表达系统 ,与传统的大肠杆菌和酿酒酵母表达体系相比 ,其具有的诸多优势使之研究价值及应用价值不断体现。综述了其在生物学特性、表达载体、基因整合、外源蛋白的分泌、诱... 巴斯德毕赤酵母外源基因表达系统是近年来发展的一种优秀的真核表达系统 ,与传统的大肠杆菌和酿酒酵母表达体系相比 ,其具有的诸多优势使之研究价值及应用价值不断体现。综述了其在生物学特性、表达载体、基因整合、外源蛋白的分泌、诱导表达及发酵等方面的基础研究及新近研究进展。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 基因表达系统 外源蛋白 生物学特性 表达载体 基因整合 真核表达系统
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巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望 被引量：20
4
作者 娄瑞娟 罗利龙 +2 位作者 张霞 张瑞刚 宋水山 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期73-76,共4页
巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能... 巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能影响巴斯德毕赤酵母表达系统的相关因素,这些因素包括外源基因的特性、基因拷贝数、产物稳定性及发酵策略等,结合这些因素和具体实践经验,就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量进行了阐述;讨论了该表达系统存在的不足之处并且展望了其发展前景。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 表达系统 外源基因 高效表达
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巴斯德毕赤酵母研究进展 被引量：5
5
作者 丁云菲 刘勇 戴长柏 《生命科学》 CSCD 2003年第1期26-30,共5页
巴斯德毕赤酵母以其独特的生物学和遗传学特征成为当今一种诱人的外源基因表达系统,已成功地表达了各种类型的外源蛋白。本文综述了巴斯德毕赤酵母的一些特征及其作为外源基因表达系统,实现高表达的策略。
关键词 巴斯德毕赤酵母 特征 基因表达系统 高表达策略
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毕赤酵母工程菌高密度发酵研究与进展 被引量：20
6
作者 武婕 张晓雪 +5 位作者 余河水 李薇 贾宇平 郭江玉 张丽娟 宋新波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期108-114,共7页
毕赤酵母表达系统是近年来发展最为迅速的一种新型外源蛋白真核表达系统,被广泛应用于多种不同领域且成功表达了许多基因工程产品。高密度发酵技术已被广泛运用到毕赤酵母工程菌发酵工程当中。主要从毕赤酵母的表达常用菌株、载体及表... 毕赤酵母表达系统是近年来发展最为迅速的一种新型外源蛋白真核表达系统,被广泛应用于多种不同领域且成功表达了许多基因工程产品。高密度发酵技术已被广泛运用到毕赤酵母工程菌发酵工程当中。主要从毕赤酵母的表达常用菌株、载体及表型等方面介绍了其表达系统,从外源基因自身的特性、培养基的组成、温度、p H、溶氧量及补料流加策略方面阐述了对毕赤酵母高密度发酵的过程及蛋白质表达结果的影响,并对毕赤酵母工程菌高密度发酵进行了展望,为其今后的研究及应用提供借鉴。 展开更多
关键词 毕赤酵母 表达系统 工程菌 高密度发酵
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巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)高密度发酵研究进展 被引量：18
7
作者 闵兆升 郭会明 +1 位作者 颜旭 洪厚胜 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期42-49,共8页
高密度发酵已经成为提高毕赤酵母目的蛋白表达量的关键技术之一,而其中发酵工艺又是高密度发酵的一个重要因素。主要从巴斯德毕赤酵母遗传学特性、表达宿主菌、表达载体、外源蛋白的表达方面进行了阐述,并从毕赤酵母工程菌的选择、培养... 高密度发酵已经成为提高毕赤酵母目的蛋白表达量的关键技术之一,而其中发酵工艺又是高密度发酵的一个重要因素。主要从巴斯德毕赤酵母遗传学特性、表达宿主菌、表达载体、外源蛋白的表达方面进行了阐述,并从毕赤酵母工程菌的选择、培养基的优化设计、发酵过程关键参数调控以及甲醇诱导等方面阐述毕赤酵母的高密度发酵。最后,提出了巴斯德毕赤酵母高密度发酵过程中存在的问题并进行展望。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 表达系统 高密度发酵 过程参数 甲醇
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毕赤酵母表达系统研究进展 被引量：17
8
作者 马银鹏 王玉文 +2 位作者 党阿丽 孔祥辉 张介驰 《黑龙江科学》 2013年第9期27-31,共5页
毕赤酵母是外源蛋白表达的一种重要宿主。毕赤酵母表达系统既具有原核表达系统操作简单、价格低廉、生产率高的优点,又具有真核表达系统能对表达后的蛋白折叠、糖基化和形成二硫键等翻译后进行加工和修饰的功能,因此毕赤酵母表达系统具... 毕赤酵母是外源蛋白表达的一种重要宿主。毕赤酵母表达系统既具有原核表达系统操作简单、价格低廉、生产率高的优点,又具有真核表达系统能对表达后的蛋白折叠、糖基化和形成二硫键等翻译后进行加工和修饰的功能,因此毕赤酵母表达系统具有广泛的应用前景和重要的研究价值。本研究对毕赤酵母表达系统的特点、组成、影响外源基因高效表达的影响因素等进行总结。 展开更多
关键词 毕赤酵母 表达系统 外源蛋白 甲醇
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外源基因在巴斯德毕赤酵母中的表达 被引量：6
9
作者 华慧 周思翔 王正荣 《国外医学（生物医学工程分册）》 CAS 2003年第3期112-117,共6页
酵母是单细胞真核生物 ,既具有类似原核生物的生长特性 ,又具有一般真核生物的细胞生物学特性。巴斯德毕赤酵母是新近发展起来的新型表达系统 ,许多有应用价值的外源基因成功地在其中表达 ,使其日益受到关注。本文就毕赤酵母的生物学特性。
关键词 外源基因表达 巴斯德毕赤酵母 真核表达系统 AOXl启动子
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影响外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中表达和分泌的研究进展 被引量：7
10
作者 张丞斌 傅正伟 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第7期1382-1384,共3页
巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是基因工程研究中广泛使用的外源蛋白表达系统。但外源基因在该系统中表达时,由于受自身特性及环境等诸多因素的影响,在表达过程中出现表达量不够稳定或较低,甚至不表达的情况。本文对影响巴斯... 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是基因工程研究中广泛使用的外源蛋白表达系统。但外源基因在该系统中表达时,由于受自身特性及环境等诸多因素的影响,在表达过程中出现表达量不够稳定或较低,甚至不表达的情况。本文对影响巴斯德毕赤酵母表达的各种可能因素进行了分析,并就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量的问题进行了简要的综述。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 酵母表达系统 基因表达
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巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 被引量：2
11
作者 王炎林 许崇波 《大连大学学报》 2006年第6期67-71,共5页
巴斯德毕赤酵母表达系统是应用较为成功的外源蛋白表达系统之一,它具有真核生物表达系统的特点,能够对目的蛋白进行类似高等真核生物的信号肽剪切、二硫键形成、糖基化等过程的翻译后蛋白加工,至今已有多种外源蛋白在该表达系统中成功表... 巴斯德毕赤酵母表达系统是应用较为成功的外源蛋白表达系统之一,它具有真核生物表达系统的特点,能够对目的蛋白进行类似高等真核生物的信号肽剪切、二硫键形成、糖基化等过程的翻译后蛋白加工,至今已有多种外源蛋白在该表达系统中成功表达.本文综述了毕赤酵母表达系统的一些特点和优势、毕赤酵母表达载体组成和外源蛋白在毕赤酵母中表达的过程. 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 表达系统 研究进展
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酵母分子生物学理论及应用研究进展 被引量：3
12
作者 宋宏新 李敏康 《陕西科技大学学报（自然科学版）》 2001年第4期78-83,共6页
对酵母分子生物学从基础理论到在食品发酵工业中应用的研究进展进行了综述 ,阐述了酿洒酵母的基因组、基因表达特点以及基因操作技术 。
关键词 酿酒酵母 甲醇酵母 酵母分子生物学 基因表达系统 基因工程
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巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 被引量：1
13
作者 魏凡华 曹瑞兵 +1 位作者 吴润 陈溥言 《农业科学研究》 2007年第1期68-71,共4页
巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是基因工程研究中广泛使用的真核表达系统,对Pichia pastoris基因结构、载体元件以及影响外源基因表达的因素等进行了较为全面的综述.
关键词 巴斯德毕赤酵母 基因表达系统 研究进展
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基于工程化毕赤酵母一锅法合成硫酸软骨素A 被引量：7
14
作者 盛靖雨 金学荣 +2 位作者 胥睿睿 王阳 康振 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2594-2605,共12页
硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是一种线性多糖,广泛应用于医疗和保健等领域。相比于传统动物组织提取法,微生物合成硫酸软骨素具有可控、易规模化放大等优势。为实现硫酸软骨素A(CSA)的高效合成,本研究首先通过整合软骨素合酶编... 硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是一种线性多糖,广泛应用于医疗和保健等领域。相比于传统动物组织提取法,微生物合成硫酸软骨素具有可控、易规模化放大等优势。为实现硫酸软骨素A(CSA)的高效合成,本研究首先通过整合软骨素合酶编码基因kfoC、kfoA以及UDP-葡萄糖脱氢酶编码基因tuaD至毕赤酵母GS115基因组中,构建了以甘油为唯一碳源发酵生产软骨素的毕赤酵母工程菌株。通过进一步优化软骨素合成途径,软骨素分批补料发酵水平达到2.6 g/L。在进一步整合表达软骨素-4-O-磺基转移酶的基础上,本研究通过向生产软骨素毕赤酵母工程菌株破碎液中添加3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸和软骨素-4-O-磺基转移酶,成功建立了CSA的一锅法生物合成体系。通过优化,最终实现0-40%不同磺酸化水平CSA的可控合成。本研究中CSA的一锅法生物合成体系操作简便、易放大,更适用于工业化大规模生产。本研究结果也为肝素等其他糖胺聚糖的合成提供了思路。 展开更多
关键词 软骨素 硫酸软骨素A 一锅法 3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸 毕赤酵母 生物合成体系
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家蚕抗菌肽在毕赤酵母中的表达 被引量：3
15
作者 王芸 刘忠渊 +1 位作者 吕国栋 张富春 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第4期16-18,共3页
目的 :用毕赤酵母真核系统表达有抑菌活性的家蚕抗菌肽 (cecropin -XJ)。将pGEX - 4T - 1-cecropin -XJ上的抗菌肽基因cecropin -XJ克隆至穿梭质粒pSuperY上 ,用BlnI酶切使之线性化后 ,采用电击法转化酵母SMD116 8,转化子用小瓶发酵 ,经... 目的 :用毕赤酵母真核系统表达有抑菌活性的家蚕抗菌肽 (cecropin -XJ)。将pGEX - 4T - 1-cecropin -XJ上的抗菌肽基因cecropin -XJ克隆至穿梭质粒pSuperY上 ,用BlnI酶切使之线性化后 ,采用电击法转化酵母SMD116 8,转化子用小瓶发酵 ,经SDS -PAGE检测 ,表达产物可以在α信号因子的引导下 ,分泌到培养基中 。 展开更多
关键词 家蚕抗菌肽 毕赤酵母 分泌表达 抑菌活性
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源于GAP启动子的毕赤酵母组成型表达系统的研究进展 被引量：6
16
作者 曹东艳 柳倩 +1 位作者 贺晓云 梅晓宏 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第4期1217-1221,共5页
巴斯德毕赤酵母表达系统是目前应用非常广泛的外源基因真核表达系统。与源于醇氧化酶启动子(pAOX1)的诱导型表达系统相比,源于三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pGAP)的毕赤酵母组成型表达系统在表达外源蛋白时不需使用甲醇,表达时间短,并且在... 巴斯德毕赤酵母表达系统是目前应用非常广泛的外源基因真核表达系统。与源于醇氧化酶启动子(pAOX1)的诱导型表达系统相比,源于三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pGAP)的毕赤酵母组成型表达系统在表达外源蛋白时不需使用甲醇,表达时间短,并且在高密度发酵时采用连续发酵模式,因此成为近年研究的热点。本文分别从pGAP表达载体的构建、碳源、基因拷贝数、信号序列、高密度发酵等方面对该表达系统进行了综述,以期为其在蛋白生产中的深入研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 表达系统 GAP启动子 外源蛋白 组成型表达
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毕赤酵母高效表达外源蛋白的分子水平策略 被引量：5
17
作者 张欣然 凌焱 杨英 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期321-328,共8页
毕赤酵母表达系统具有许多优异特性,并且是目前最成功的外源蛋白表达系统之一。通过近几十年的快速发展,该系统已引起各界的广泛关注,并产生了巨大的经济和社会价值。与其他现有表达系统相比,毕赤酵母在目的蛋白翻译后修饰上有着极大优... 毕赤酵母表达系统具有许多优异特性,并且是目前最成功的外源蛋白表达系统之一。通过近几十年的快速发展,该系统已引起各界的广泛关注,并产生了巨大的经济和社会价值。与其他现有表达系统相比,毕赤酵母在目的蛋白翻译后修饰上有着极大优势,已被广泛应用于表达外源蛋白。但是另一方面,由于该系统受包括外源基因的特性、菌种、表达环境和发酵技术等多种因素的影响,,其在不同外源蛋白的表达上也表现出很大差异。该文着眼于分子水平上的基因转录、蛋白质加工、蛋白质降解以及转运分泌4个模块,介绍了利用毕赤酵母表达系统通过优化密码子、高拷贝数外源基因、引导肽筛选、敲除蛋白酶基因、共表达促折叠因子等途径提高外源蛋白表达效率的相关策略,并简要展望了该系统的发展前景,以期为构建高效毕赤酵母细胞工厂提供指导。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 酵母表达系统 高效表达 分子水平 外源蛋白
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Pichia pastoris表达系统提高表达量的几个关键点 被引量：1
18
作者 周细南 张爱联 +2 位作者 张添元 罗进贤 谭燕华 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第1期68-73,共6页
Pichia pastoris是近年来迅速发展的一种真核生物表达宿主,有着广阔的应用前景.本文从提高P.pastoris表达重组蛋白产量的角度,就启动子、高拷贝重组子、密码子偏爱、宿主菌和高密度发酵等方面的优化进行了综述.
关键词 pichia pastoris 表达系统 产量
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α-mating factor在毕赤酵母中引导蛋白分泌表达研究进展
19
作者 林钰煊 黄义德 《生物技术》 CAS 2024年第1期102-107,共6页
毕赤酵母表达系统广泛用于外源蛋白分泌表达,如何提高外源蛋白的表达效率在毕赤酵母中的表达量是该系统的研究重点,分泌蛋白通过分泌途径的效率是限制外源蛋白表达的一个重要制约因素。α-mating factor信号序列常用于毕赤酵母中,酿酒... 毕赤酵母表达系统广泛用于外源蛋白分泌表达,如何提高外源蛋白的表达效率在毕赤酵母中的表达量是该系统的研究重点,分泌蛋白通过分泌途径的效率是限制外源蛋白表达的一个重要制约因素。α-mating factor信号序列常用于毕赤酵母中,酿酒酵母α-mating factor信号序列是毕赤酵母表达系统应用最早的一条信号序列,可引导大部分蛋白在毕赤酵母中的分泌表达,同时存在其他物种的α-mating factor信号序列能够在毕赤酵母中引导蛋白分泌表达。基于α-mating factor信号序列在毕赤酵母表达系统中的重要性,该文系统阐述了其在毕赤酵母中的研究进展,并描述了其结构和功能特点,提出了分析与思考,对α-mating factor信号序列的未来研究进行展望。 展开更多
关键词 毕赤酵母 酿酒酵母 α-mating factor 信号肽 酵母表达系统 外源蛋白 分泌表达 信号序列
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HPV16(新疆株)E6在Pichia pastoris酵母中的分泌表达 被引量：3
20
作者 刘忠渊 张富春 +2 位作者 赵干 蔡伦 张爱莲 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第1期4-6,共3页
目的 :利用酵母Pichiapastoris真核蛋白表在系统 ,表达HPV16 (新疆株 )E6 (HPV16XJE6 )蛋白。方法 :根据HPV16XJE6基因序列设计引物 ,并分别在 5′引物和 3′引物中引入了EcoRI和XbaI酶切位点 ,经PCR扩增后与pMD18-T载体相连 ,再将HPV16... 目的 :利用酵母Pichiapastoris真核蛋白表在系统 ,表达HPV16 (新疆株 )E6 (HPV16XJE6 )蛋白。方法 :根据HPV16XJE6基因序列设计引物 ,并分别在 5′引物和 3′引物中引入了EcoRI和XbaI酶切位点 ,经PCR扩增后与pMD18-T载体相连 ,再将HPV16XJE6从T载体上切下并克隆至穿梭质粒pGAPZαA上 ,获得的重组穿梭质粒pGAPZαA -E6经线性化后 ,采用LiCl法将重组穿梭质粒转入酵母细胞内 ,Zeocin+筛选鉴定 ,经小瓶发酵后 ,取上清作SDSPAGE检测。结果 :HPV16XJE6成功地在酵母真核表达系统获得表达 ,表达产物的分子量为 2 0kD ,为深入研究HPV16XJE6蛋白功能奠定了理论基础。 展开更多
关键词 HPV16 E6 新疆株 穿梭质粒 pGAPZαA 酵母菌SMD1168 分泌表达
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