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蒿甲醚对日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶、醛缩酶、磷酸甘油酸变位酶和烯醇化酶的影响 被引量:7
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作者 翟自立 尤纪青 +3 位作者 郭惠芳 焦佩英 梅静艳 肖树华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期336-338,共3页
[目的 ]观察蒿甲醚 (Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶 (GPM )、醛缩酶 (ALD)、磷酸甘油酸变位酶 (PGM)和烯醇化酶 (ENO)的影响。 [方法 ]小鼠感染血吸虫尾蚴 4~ 5wk后 ,1次灌服Art10 0mg/kg或 30 0mg/kg ,并于 2 4~ 48h后剖... [目的 ]观察蒿甲醚 (Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶 (GPM )、醛缩酶 (ALD)、磷酸甘油酸变位酶 (PGM)和烯醇化酶 (ENO)的影响。 [方法 ]小鼠感染血吸虫尾蚴 4~ 5wk后 ,1次灌服Art10 0mg/kg或 30 0mg/kg ,并于 2 4~ 48h后剖杀 ,收集日本血吸虫雌虫和雄虫 ,按NADPH的生成量或NADH的耗用量测定虫体的上述 4种酶活力。 [结果 ]经Art 10 0mg/kg作用 2 4h后 ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO活力分别较对照组下降 15 %、 19%、 5 0 %和 46 % ,其间差别均具有显著意义 ,而雄虫仅PGM和ENO活力分别下降 2 2 %和 32 % ;48h后 ,雄虫的GPM和ALD活力亦分别下降 2 1%和 18% ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO及雄虫的PGM和ENO活力则进一步下降。经Art 30 0mg/kg作用后 2 4~ 48h ,雌虫和雄虫的上述 4种酶活力均明显下降 ,且呈一定的时间效应关系。 [结论 ]Art对日本血吸虫尤其是雌虫的上述 4种酶有抑制作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 烯醇化酶 蒿甲醚 GPM ALD PGM
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磷酸变位酶遗传表现与结球白菜耐热性的关系 被引量:7
2
作者 郑晓鹰 吴国胜 王永健 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期252-257,共6页
用结球白菜耐热和热敏感品种,研究了种苗中磷酸变位酶(PGM)同工酶表现形式与耐热性的关系。发现PGM-2位点带型的表现形式与耐热性相关。用耐热与不耐热品种杂交后的F1、F2和F3代株系分析了PGM-2位点与耐热性的相... 用结球白菜耐热和热敏感品种,研究了种苗中磷酸变位酶(PGM)同工酶表现形式与耐热性的关系。发现PGM-2位点带型的表现形式与耐热性相关。用耐热与不耐热品种杂交后的F1、F2和F3代株系分析了PGM-2位点与耐热性的相关性,结果表明,PGM-2位点可以作为结球白菜的一个耐热标记位点。 展开更多
关键词 结球白菜 耐热性 磷酸变位酶 遗传表现
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植物葡萄糖磷酸变位酶的研究进展 被引量:7
3
作者 李晓屿 李玉花 +2 位作者 李晗 李治龙 蓝兴国 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期617-622,共6页
葡萄糖磷酸变位酶(PGM)是生物新陈代谢的关键酶,可催化葡萄糖-1-磷酸和葡萄糖-6-磷酸相互转化。在植物中,PGM分为胞质型PGM和质体型PGM。胞质型PGM参与蔗糖的代谢;质体型PGM参与淀粉的合成。近期发现,PGM在植物生长发育中起到重要作用... 葡萄糖磷酸变位酶(PGM)是生物新陈代谢的关键酶,可催化葡萄糖-1-磷酸和葡萄糖-6-磷酸相互转化。在植物中,PGM分为胞质型PGM和质体型PGM。胞质型PGM参与蔗糖的代谢;质体型PGM参与淀粉的合成。近期发现,PGM在植物生长发育中起到重要作用。本文主要对植物中葡萄糖磷酸变位酶的分类、分子性质及功能等方面进行综述。 展开更多
关键词 葡萄糖磷酸变位酶 蔗糖代谢 淀粉合成 植物发育
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微藻葡萄糖磷酸变位酶研究进展
4
作者 汤熙 陈必链 何勇锦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3200-3223,共24页
葡萄糖-1-磷酸是光自养生物淀粉合成的前体物质。葡萄糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase,PGM)属于磷酸己糖变位酶家族,具有较高的保守性,能介导葡萄糖-6-磷酸与葡萄糖-1-磷酸相互转化,调节植物和藻类细胞淀粉合成。与高等植物相比,微藻... 葡萄糖-1-磷酸是光自养生物淀粉合成的前体物质。葡萄糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase,PGM)属于磷酸己糖变位酶家族,具有较高的保守性,能介导葡萄糖-6-磷酸与葡萄糖-1-磷酸相互转化,调节植物和藻类细胞淀粉合成。与高等植物相比,微藻具有独特的光合系统,一些微藻藻株可以利用有机碳源进行异养培养或混养培养,这可能赋予微藻葡萄糖磷酸变位酶特殊的结构和淀粉代谢功能,调节微藻光合固碳、糖类代谢等通路的水平。本文综述了微藻PGM分子特性、生物学功能和调控PGM活性潜在机制及策略,阐明PGM调节微藻淀粉合成对胞内蛋白质、油脂等代谢通路的潜在影响机制,为微藻固碳和高值化开发微藻资源提供理论依据,助力我国“双碳”目标奠定理论基础。 展开更多
关键词 葡萄糖磷酸变位酶 微藻 淀粉合成
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茯苓多糖合成途径磷酸葡萄糖变位酶和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因鉴定
5
作者 夏丽珍 李立志 +1 位作者 张晓俊 张燎原 《化学与生物工程》 CAS 北大核心 2024年第6期44-52,共9页
采用已报道的灵芝磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGPP)基因序列对茯苓基因组进行搜索比对,获得茯苓WcPGM和WcUGPP候选基因序列;以茯苓的cDNA为模板,成功克隆获得WcPGM和WcUGPP基因;随后利用pPIC9K构建2个基因的表达载体... 采用已报道的灵芝磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGPP)基因序列对茯苓基因组进行搜索比对,获得茯苓WcPGM和WcUGPP候选基因序列;以茯苓的cDNA为模板,成功克隆获得WcPGM和WcUGPP基因;随后利用pPIC9K构建2个基因的表达载体,并转化至毕赤酵母进行异源表达。序列分析表明WcPGM和WcUGPP基因全长分别为2021 bp和2144 bp,其中WcPGM基因含有5个外显子和4个内含子,编码564个氨基酸;WcUGPP基因含有11个外显子和10个内含子,编码502个氨基酸。氨基酸序列比对表明,WcPGM和WcUGPP与来源于绣球菌的ScPGM和ScUGPP的同源性分别为87%和91%。酶活测定表明,重组酶WcPGM可转化葡萄糖-1-磷酸(G1P)为葡萄糖-6-磷酸(G6P),酶活达1540 U·mL^(-1);重组酶WcUGPP可催化G1P和尿苷三磷酸(UTP)合成UDP-葡萄糖(UDP-Glc),酶活达660 U·mL^(-1),表明从茯苓中筛选到的2个酶WcPGM和WcUGPP具有PGM和UGPP活性。分子模拟表明,WcPGM在催化可逆反应过程中S114为磷酸供体和受体,R24和K379作为催化酸和碱实现底物的磷酸化和去磷酸化,而E366和S368可实现底物的2种朝向,保障了中间产物葡萄糖-1,6-二磷酸的翻转,确保了WcPGM的可逆反应;而WcUGPP活性中心的核苷酸结合Loop和糖结合Loop保障了底物的正确朝向,K390作为催化碱实现了底物UTP/G1P与UDP-Glc的可逆反应。该研究为茯苓多糖合成途径的解析和代谢工程提升茯苓多糖产量奠定了基础。 展开更多
关键词 茯苓 磷酸葡萄糖变位酶 UDP-葡萄糖焦磷酸化酶 毕赤酵母 异源表达 催化机制 分子模拟
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Comparison of three PCR methods for detection of Helicobacter pylori DNA and detection of cagA gene in gastric biopsy specimens 被引量:5
6
作者 SI Smith KS Oyedeji +7 位作者 AO Arigbabu FCantet FMegraud OOOjo AOUwaifo JAOtegbayo SOOla AO Coker 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第13期1958-1960,共3页
AIM:To comparatively evaluate PCR and other diagnostic methods (the rapid urease test and/or culture) in order to determine which of the three PCR methods (ureA,glmM and 26-kDa,SSA gene) was most appropriate in the di... AIM:To comparatively evaluate PCR and other diagnostic methods (the rapid urease test and/or culture) in order to determine which of the three PCR methods (ureA,glmM and 26-kDa,SSA gene) was most appropriate in the diagnosis of Helicobacterpylori(Hpylori) infection and also to evaluate the detection of a putative virulence marker of H pylori,the cage,gene,by PCR in biopsy specimens. METHODS:One hundred and eighty-nine biopsy specimens were collected from 63 patients (three biopsies each) undergoing upper gastroduodenal endoscopy for various dyspeptic symptoms.The PCR methods used to detect H pylori DNA directly from biopsies were the glmM,26-kDa, ureA and then cagA was used to compare the culture technique and CLO for urease with the culture technique being used as the gold standard. RESULTS:Thirty-five percent of the biopsies were positive for H pylori DNA using the 3 PCR methods,while 68% of these were positive for the cagA gene.Twenty-four percent of the biopsies were negative for H pylori DNA in all PCR methods screened.The remaining 41% were either positive for ureA gene only,glmM only,26-kDa only,or ureA+glmM, ureA+26-kDa,glmM+26-kDa.Out of the 35% positive biopsies,41% and 82% were positive by culture and CLO respectively,while all negative biopsies were also negative by culture and cagA.Cag A+ infection was also predominantly found in H pylori DNA of the biopsies irrespective of the clinical diagnosis. CONCLUSION:This method is useful for correctly identifying infections caused by H pylori and can be easily applied in our laboratory for diagnostic purposes. 展开更多
关键词 Antigens Bacterial Bacterial Proteins Biopsy Comparative Study Gastric Mucosa Helicobacter Infections Helicobacter pylori purification Humans phosphoglucomutase Polymerase Chain Reaction Research Support Non-U.S. Gov't Sensitivity and Specificity UREASE Virulence
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胶质芽孢杆菌葡萄糖磷酸变位酶基因的克隆、表达与酶学性质研究 被引量:3
7
作者 唐家毅 蓝东明 +1 位作者 王永华 杨博 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第3期38-42,37,共6页
胶质芽孢杆菌所产胞外多糖作为絮凝剂在食品工业废水处理方面比传统的工业絮凝剂具有更好应用效果而引起了广泛的关注。葡萄糖磷酸变位酶(PGM,EC5.4.2.2)能将葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸而被认为是多糖合成路径上的关键酶之一... 胶质芽孢杆菌所产胞外多糖作为絮凝剂在食品工业废水处理方面比传统的工业絮凝剂具有更好应用效果而引起了广泛的关注。葡萄糖磷酸变位酶(PGM,EC5.4.2.2)能将葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸而被认为是多糖合成路径上的关键酶之一。本研究克隆获得来源于自胶质芽孢杆菌GIM1.16编码PGM的基因pgm。序列分析表明,该基因包含一个1710bp的读码框。在大肠杆菌中表达了pgm基因并纯化了重组蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示重组的PGM分子量约为63kDa。重组的PGM最适反应温度为40℃,但当反应温度超过55℃时,PGM基本丧失活性,PGM在酸性(pH4-6)及碱性溶液(pH8.5-10)中均表现出低活性,其最适合反应pH值为7.5。PGM对底物葡萄糖-1-磷酸的Kcat和Km值分别为684min-1和0.24mM-1。本研究为胶质芽孢杆菌菌株的基因工程改造和代谢工程研究奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 胞外多糖 胶质芽孢杆菌 葡萄糖磷酸变位酶
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微生物磷酸葡萄糖变位酶的研究进展 被引量:2
8
作者 刘连 《安徽农业科学》 CAS 2013年第7期2821-2822,2825,共3页
从磷酸葡萄糖变位酶对碳代谢和细菌细胞形态的影响、细菌致病性、在细菌高效产氢中的作用、细菌脂多糖生物合成中的作用和维持酵母细胞内Ca2+平衡的作用等方面,介绍了微生物磷酸葡萄糖变位酶的研究进展。
关键词 磷酸葡萄糖变位酶 葡萄糖-1-磷酸 葡萄糖-6-磷酸
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大白菜葡萄糖磷酸变位酶同工酶的纯化及其分子性质 被引量:1
9
作者 崔洪昌 刘敬梅 Samuel S. Sun 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1999年第1期134-140,共7页
首先对影响葡萄糖磷酸变位酶(PGM)稳定性的因素进行了比较研究,结果发现,在所有被检测的因子中,磷酸根对酶的保护作用最强,而Tris-盐酸则效果极差。在磷酸缓冲液中添加二硫苏糖醇、PMSF、葡萄糖和镁离子等可能的保持... 首先对影响葡萄糖磷酸变位酶(PGM)稳定性的因素进行了比较研究,结果发现,在所有被检测的因子中,磷酸根对酶的保护作用最强,而Tris-盐酸则效果极差。在磷酸缓冲液中添加二硫苏糖醇、PMSF、葡萄糖和镁离子等可能的保持试剂未能进一步提高酶的稳定性。另外,pH对PGM酶的稳定性有较大影响,酸性pH不利于酶活性的保持,在pH8.0时酶最为稳定。因此,本实验对PGM同工酶的纯化均在pH8.0的磷酸缓冲液中进行。依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、SephadexG75柱层析以及二乙氨乙基纤维素柱高效液相色谱(DEAE-HPLC)等分离步骤,我们纯化了大白菜品种“白阳”黄化种苗中的3个葡萄糖磷酸变位酶(PGM)同工酶,并分别测定了同耐热相关PGM同工酶和与其自然电泳迁移率相近的另一同工酶的米氏常数(Km),比较了它们对37℃热处理的稳定性。结果表明,在米氏常数和热稳定性方面它们没有显著差别。 展开更多
关键词 同工酶 耐热性 大白菜 PGM
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小桐子磷酸葡萄糖变位酶cPGM与pPGM基因的克隆及原核表达分析 被引量:1
10
作者 王海波 李芙蓉 +2 位作者 杨金翠 高永 郭俊云 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第4期23-30,共8页
为了探究磷酸葡萄糖变位酶(PGM)在植物蔗糖与淀粉代谢中的重要作用,基于同源序列比对的方法,在小桐子基因组中鉴定到1个细胞质型PGM基因(命名为JccPGM)与1个叶绿体型PGM基因(命名为JcpPGM),利用qRT-PCR方法检测JccPGM与JcpPGM基因在小... 为了探究磷酸葡萄糖变位酶(PGM)在植物蔗糖与淀粉代谢中的重要作用,基于同源序列比对的方法,在小桐子基因组中鉴定到1个细胞质型PGM基因(命名为JccPGM)与1个叶绿体型PGM基因(命名为JcpPGM),利用qRT-PCR方法检测JccPGM与JcpPGM基因在小桐子不同器官与低温条件下的表达特性,同时,构建了pGEX-4T-1-JccPGM与pGEX-4T-1-JcpPGM原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了表达分析。结果表明:两者分别编码582,637 aa的蛋白质。聚类分析表明,小桐子pPGM在其N端包含叶绿体定位信号肽,而cPGM较pPGM多4段肽链序列-^(108)VGVDGS^(113)-、-^(183)SGPE^(186)-、-^(283)GKSNSE^(288)-、-^(470)SLGEVN^(475)-。qRT-PCR表达分析显示,小桐子cPGM与pPGM基因都在叶片中高表达,而在根与种子中表达量较低。通过BL21(DE3)诱导表达,分别得到90.7,97.0 ku的蛋白条带,与理论融合蛋白的分子量一致。综上所述,本研究为开展小桐子cPGM与pPGM基因表达蛋白的功能分析以及其在蔗糖与淀粉积累、逆境应答中的机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 小桐子 磷酸葡萄糖变位酶 基因克隆 原核表达
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β2-微球蛋白、糖化血红蛋白、脂蛋白相关磷脂酶A2和磷酸葡萄糖变位酶联合检测在冠心病诊断中的价值 被引量:1
11
作者 蒋淑娟 《长治医学院学报》 2020年第3期222-226,共5页
目的:探讨β2-微球蛋白(β2M)、糖化血红蛋白(HbA1c)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)联合检测诊断冠心病(CHD)的价值。方法:选择135例CHD患者为CHD组,另选择本院同期健康体检者70例作为对照组,收集血液样本,放射... 目的:探讨β2-微球蛋白(β2M)、糖化血红蛋白(HbA1c)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)联合检测诊断冠心病(CHD)的价值。方法:选择135例CHD患者为CHD组,另选择本院同期健康体检者70例作为对照组,收集血液样本,放射免疫法检测β2M,免疫比浊法检测HbA1c,酶联免疫吸附法检测Lp-PLA2、PGM,采用Logistics回归分析CHD发生的相关因素,采用ROC分析诊断试验的灵敏度和特异度。结果:CHD组血清β2M、HbA1c、Lp-PLA2、PGM水平均显著高于对照组(P<0.05);Logistics回归分析显示,高水平β2M、HbA1c、Lp-PLA2、PGM是发生CHD的危险因素;β2M(临界值2.65μg·mL^-1)、HbA1c(临界值5.00%)、Lp-PLA2(临界值197.20 ng·mL^-1)、PGM(临界值34.52 U·L^-1)联合检测诊断CHD的AUC为0.949,准确度为95.12%,灵敏度为95.56%,特异度为94.29%,均明显高于单项检测。结论:CHD患者β2M、HbA1c、Lp-PLA2、PGM水平显著升高,联合检测诊断CHD的准确度和灵敏度更高。 展开更多
关键词 Β2-微球蛋白 糖化血红蛋白 脂蛋白相关磷脂酶A2 磷酸葡萄糖变位酶 冠心病
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我国几个民族中毛发根葡糖磷酸变位酶—1的亚型分布 被引量:1
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作者 陈良忠 颜永杉 《人类学学报》 1984年第3期285-289,共5页
本文报道了利用等电聚焦的方法,从毛发根鞘细胞分析了我国汉、苗、土家、撒拉、土、达斡尔和赫哲等民族的葡糖磷酸变位酶-1(PGM_1)10亚型的分布,并且与其他人群的基因频率作了比较。
关键词 毛发根 葡糖磷酸变位酶 等电聚焦 遗传多态性 基因频率 不同民族
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Genetic polymorphism and natural fertility in women
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作者 Fulvia Gloria-Bottini Neri A +2 位作者 Pietropolli A Magrini A Bottini E 《Asian pacific Journal of Reproduction》 2018年第1期19-21,共3页
Objective: To investigate the cooperative interaction among five genetic systems (phosphoglucomutase locus 1, adenosine deaminase locus 1, acid phosphatase locus 1, adenylate kinase locus 1, and haptoglobin) concernin... Objective: To investigate the cooperative interaction among five genetic systems (phosphoglucomutase locus 1, adenosine deaminase locus 1, acid phosphatase locus 1, adenylate kinase locus 1, and haptoglobin) concerning their effects on natural fertility in humans. Natural fertility has been evaluated by a model of age related differences between the distributions of types among pregnant women. Methods: A total of 137 nonsmoking consecutive puerperaes from the white population who had delivered their first born baby in the Maternity Department of S. Massimo Hospital of Penne were studied. The phenotypes of the five systems studied were determined by starch gel electrophoresis. Statistical analysis was performed using the statistical package for the social science. Results: There was a highly significant negative correlation between maternal age and the number of genetic factors showing a lower maternal age at the birth of the first child, which suggested a positive cooperative interaction among these factors concerning their effects on fertility. Conclusions:In the relationship of mother-fetus, besides nutritional factors, genetic factors involved in immunological interaction of the embryo with the mother are of paramount importance. Haptoglobin and adenosine deaminase locus 1 polymorphisms are involved in immune reactions and our data indicate that genetic variability within these systems gives a more important contribution to variation of human fertility as compared to acid phosphatase locus 1, phosphoglucomutase locus 1 and adenylate kinase locus 1 that are mainly involved in metabolic functions. 展开更多
关键词 WOMEN FERTILITY Genetic polymorphism phosphoglucomutase LOCUS 1 Adenosine DEAMINASE LOCUS 1 Acid phosphatase LOCUS 1 ADENYLATE kinase LOCUS 1 HAPTOGLOBIN
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酵母UDP-葡萄糖合成途径的优化及黄酮葡萄糖苷的合成
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作者 王惠敏 杨燕 +2 位作者 田雷瑜 周文龙 王伟 《中国医药生物技术》 2016年第3期229-235,共7页
目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵... 目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵母;同时共表达具有催化黄酮葡萄糖苷化的UDP-葡萄糖转移酶,研究摇瓶培养条件下PGM和Gal U基因的表达对工程细胞生物催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的影响。结果在酵母细胞内表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶PGM和Gal U,提高了组合表达UDP-葡萄糖转移酶的工程菌生物催化合成野黄芩素-7-O-葡萄糖苷的效率,表明PGM和Gal U基因的高表达能促进UDP-葡萄糖的合成;所构建的工程菌也能催化木犀草素、柚皮素、白杨素、汉黄芩素、木蝴蝶素A、黄芩素、槲皮素以及大豆黄酮等黄酮类化合物的葡萄糖苷化。结论组合表达大肠杆菌PGM和Gal U基因能促进酵母细胞内UDP-葡萄糖的合成,进而提高了工程细胞催化合成黄酮葡萄糖苷的效率。 展开更多
关键词 黄酮类 尿苷二磷酸葡糖 酿酒酵母菌 葡糖磷酸变位酶 葡糖转移酶类
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田菁胶生物合成中的甘露糖磷酸变位酶
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作者 单雪琴 张宝田 +2 位作者 范明娟 荆玉祥 王文卓 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第5期361-367,共7页
用 DE-52和磷酸纤维素亲和层析分离和纯化了甘露糖磷酸变位酶(PMM),非 SDS 凝胶电泳为一条带,但 SDS 凝胶电泳则有三条带,分子量为41500,66000和74000。测定了田菁(Sesbania cannabina)种子的子叶和胚乳中的甘露糖磷酸变位酶和葡萄糖磷... 用 DE-52和磷酸纤维素亲和层析分离和纯化了甘露糖磷酸变位酶(PMM),非 SDS 凝胶电泳为一条带,但 SDS 凝胶电泳则有三条带,分子量为41500,66000和74000。测定了田菁(Sesbania cannabina)种子的子叶和胚乳中的甘露糖磷酸变位酶和葡萄糖磷酸变位酶(PGM)的活性,并进行了比较,讨论了两种酶的耐温性与田菁胶合成生理活动的相关性。 展开更多
关键词 田菁 田菁胶 生物合成 PMM
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菌株TP-3中基因pgmG的克隆、表达及酶活性分析
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作者 王生秀 黄海东 +1 位作者 李晓雁 刘梦虹 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期20-24,共5页
目的:克隆得到鞘氨醇单胞菌TP-3的葡萄糖磷酸变位酶基因全长,表达并验证其酶活性,为下一步菌株TP-3的基因工程改造奠定基础。方法:利用Tail PCR的方法扩增得到菌株TP-3的pgmG基因全长,通过pET-28a(+)大肠杆菌表达系统表达目的基因,优化... 目的:克隆得到鞘氨醇单胞菌TP-3的葡萄糖磷酸变位酶基因全长,表达并验证其酶活性,为下一步菌株TP-3的基因工程改造奠定基础。方法:利用Tail PCR的方法扩增得到菌株TP-3的pgmG基因全长,通过pET-28a(+)大肠杆菌表达系统表达目的基因,优化诱导表达条件,并测定酶活性。结果:扩增得到1 383bp的pgmG基因全长,编码460个氨基酸,诱导表达后得到一个分子量约为49.8kDa的目的蛋白,纯化后的酶活为5 985 U/g。结论:首次得到新菌Sphingomonas sanxanigenenssp.nov.TP-3的pgmG基因全长,其编码蛋白PgmG与温轮胶合成菌Sphingomonas sp.NX-3的葡萄糖磷酸变位酶同源性最高,达81%,在大肠杆菌中表达目的基因并验证了葡萄糖磷酸变位酶活性,经Ni-NTA纯化后酶收率为29.3%。 展开更多
关键词 鞘氨醇单胞菌 鞘氨醇胶 葡萄糖磷酸变位酶 克隆表达
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酶法测定1-磷酸葡萄糖的含量
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作者 陆婷婷 吕浩 +1 位作者 魏秀丽 应汉杰 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第6期78-80,共3页
建立反应液中1-磷酸葡萄糖(G-1-P)的测定方法.分别在样品中加入PGluM(EC5.4.2.2)、G6P-DH(ECl.1.1.49)和氧化型辅酶Ⅱ(β-NADP),通过测定还原型辅酶Ⅱ(β-NADPH)吸光值的变化(△A)来确定样品中G-1-P的含量.G-1-P在0~400 mg/L范围内与△... 建立反应液中1-磷酸葡萄糖(G-1-P)的测定方法.分别在样品中加入PGluM(EC5.4.2.2)、G6P-DH(ECl.1.1.49)和氧化型辅酶Ⅱ(β-NADP),通过测定还原型辅酶Ⅱ(β-NADPH)吸光值的变化(△A)来确定样品中G-1-P的含量.G-1-P在0~400 mg/L范围内与△A呈线性关系,r2=0.999 8,其平均回收率为100.88%(RSD=0.52%).该法快速、灵敏、准确. 展开更多
关键词 1-磷酸葡萄糖 葡萄糖磷酸变位酶 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 酶法测定
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Role of two phosphohexomutase genes in glycogen synthesis in Synechocystis sp. PCC6803
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作者 LIU Lian HU HanHua +1 位作者 GAO Hong XU XuDong 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2013年第36期4616-4621,共6页
Phosphohexomutases catalyze the interconversion between hexose-6-phosphate and hexose-1-phosphate and play important roles in polysaccharide synthesis.In Synechocystis sp.PCC 6803,sll0726 is predicted to encode PGM(ph... Phosphohexomutases catalyze the interconversion between hexose-6-phosphate and hexose-1-phosphate and play important roles in polysaccharide synthesis.In Synechocystis sp.PCC 6803,sll0726 is predicted to encode PGM(phosphoglucomutase),slr1334is predicted to encode a PGM/PMM(phosphomannomutase)bifunction enzyme.In comparison to the wild type,a sll0726-null mutant showed 3.4%PGM activity but 45%–69%glycogen content.Down-regulation of slr1334,an essential gene,by using a copper regulated promoter further decreased the PGM activity in the sll0726::KmrPpetE-slr1334 double mutant to 0.3%of the wild type level.However,the glycogen content was not further decreased in parallel.In vitro,recombinant Sll0726 or Slr1334 showed predicted enzyme activities.Our results indicate that a relatively high level of glycogen can be maintained in Synechocystis mutants with low levels of PGM activity.The high PGM activity in the cyanobacterium may be required for turnover of glycogen or synthesis of other polysaccharides or oligosaccharides. 展开更多
关键词 糖原合成 集胞藻 E基因 铂族金属 多糖合成 金属活性 调控启动子 突变体
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灵芝细胞中异源表达透明颤菌血红蛋白基因提高胞外多糖的产量 被引量:5
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作者 刘柯 李焕军 +3 位作者 张德怀 岳同辉 李娜 徐军伟 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期35-41,共7页
在灵芝(Ganoderma lingzhi)中异源表达透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因,采用一氧化碳差异波谱分析的方法检测转基因菌株的生物活性,并对野生型菌株和工程菌株进行发酵,通过荧光定量PCR对灵芝多糖生物合成途径上的葡... 在灵芝(Ganoderma lingzhi)中异源表达透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因,采用一氧化碳差异波谱分析的方法检测转基因菌株的生物活性,并对野生型菌株和工程菌株进行发酵,通过荧光定量PCR对灵芝多糖生物合成途径上的葡萄糖磷酸变位酶(α-phosphoglucomutase,PGM)、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(uridinediphosphate glucose pyrophosphorylase,UGP)和β-1,3-葡聚糖合酶(β-1,3-glucan synthase,GLS)3个基因的转录水平进行分析。研究表明:透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)在灵芝中能够成功表达,并且具有生物活性;工程菌株中胞外多糖的最高产量达0.83g/L,比野生型菌株提高了88.6%;与野生型菌株相比,工程菌株中多糖生物合成途径上PGM、UGP和GLS基因的相对表达量分别是1.52、1.55和3.85。异源表达透明颤菌血红蛋白基因是提高灵芝胞外多糖产量的一种有效方法。 展开更多
关键词 灵芝 葡萄糖磷酸变位酶 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶
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pH值对普鲁兰多糖发酵的影响及其机理分析 被引量:5
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作者 谈梦飞 高谦 +1 位作者 王建梓 乔长晟 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第5期89-94,共6页
探究不同pH值条件对出芽短梗霉CGMCCNO.7055合成普鲁兰多糖的影响。同时通过测定合成普鲁兰多糖的前体尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDPG)含量及其相关酶磷酸葡萄糖变位酶(phosphoglucomutase,PGM)和UDPG焦磷酸化酶(Ur... 探究不同pH值条件对出芽短梗霉CGMCCNO.7055合成普鲁兰多糖的影响。同时通过测定合成普鲁兰多糖的前体尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDPG)含量及其相关酶磷酸葡萄糖变位酶(phosphoglucomutase,PGM)和UDPG焦磷酸化酶(Uridine diphosphate glucose pyrophosphorylase,UGPase)活性来分析普鲁兰多糖合成机理。结果发现一种双阶段调控pH值的方法,即第一阶段,发酵开始后24 h(OD620<0.5)控制初始pH 6.0;第二阶段,发酵24 h后(OD620>0.5)调控pH值到5.0并维持恒定,此阶段磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDPG焦磷酸化酶(UGPase)活性最高。采用该方法使普鲁兰多糖产量达到(92.5±2.41)g/L,生物量达到(13.87±0.89)g/L,经相关性检验发现该发酵条件下普鲁兰多糖产量与尿苷二磷酸葡萄糖含量呈显著负相关关系。 展开更多
关键词 出芽短梗霉 普鲁兰多糖 PH值 磷酸葡萄糖变位酶(PGM) UDPG焦磷酸化酶(UGPase) 尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)
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