紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响

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作者 陈燕 谢雪梅 +1 位作者 张晓林 张晓玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期416-421,共6页

目的:探讨紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响及可能的机制。方法:取对数生长期的人早幼粒细胞白血病细胞NB4,将其分为对照组(未处理的NB4细胞)、紫草素组(0.3μmol/L紫草素处理)、740Y-P组(15μmol/L PI3K/Akt/m TOR通路... 目的:探讨紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响及可能的机制。方法:取对数生长期的人早幼粒细胞白血病细胞NB4,将其分为对照组(未处理的NB4细胞)、紫草素组(0.3μmol/L紫草素处理)、740Y-P组(15μmol/L PI3K/Akt/m TOR通路激活剂740Y-P处理)、紫草素+740Y-P组(0.3μmol/L紫草素与15μmol/L 740Y-P共同处理),处理24 h后,用于后续实验,CCK-8法检测各组细胞活力,单丹磺酰戊二酸染色检测细胞自噬囊泡的聚集情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测各组细胞中Beclin1、LC3、p62、Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2及PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,紫草素组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量升高,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量降低(均P<0.05);与对照组比较,740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高(均P<0.05);与紫草素组比较,紫草素+740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。与对照组比较,紫草素组NB4细胞中PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著降低,而740Y-P组显著升高(均P<0.05);与紫草素组比较,紫草素+740Y-P组NB4细胞中p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著升高(均P<0.05)。结论:紫草素可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路促进NB4细胞自噬与凋亡。 展开更多

关键词 紫草素 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 早幼粒细胞白血病 自噬 细胞凋亡

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刺五加多糖调控PI3K/Akt/mTOR通路改善大鼠抑郁行为的作用 被引量：15

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作者 丁继红 姜春玉 +1 位作者 杨乐 王显艳 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第11期369-375,共7页

为研究刺五加多糖对抑郁行为的改善作用及机制,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸氟西汀组(2.1 mg/kg)及刺五加多糖低、高剂量组(60、120 mg/kg),每组10只。采用单笼孤养及慢性轻度不可知应激刺激28 d建立抑郁模型,并... 为研究刺五加多糖对抑郁行为的改善作用及机制,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸氟西汀组(2.1 mg/kg)及刺五加多糖低、高剂量组(60、120 mg/kg),每组10只。采用单笼孤养及慢性轻度不可知应激刺激28 d建立抑郁模型,并从建模第1 d开始灌胃给药。通过敞箱实验、糖水偏好实验及强迫游泳实验评价抑郁行为,苏木精-伊红染色及尼氏染色检测海马组织病理,并比较各组白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinases,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等指标变化情况。结果发现,与正常对照组比较,模型对照组大鼠的水平活动次数、糖水偏好度极显著降低(P<0.01),游泳不动时间极显著升高(P<0.01),且海马组织出现明显病理变化;与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠水平活动次数、糖水偏好度极显著增加(P<0.01),游泳不动时间显著降低(P<0.05、P<0.01),且海马组织结构病理变化得到缓解。同时,与正常对照组比较,模型对照组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平极显著增加(P<0.01),CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达极显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平显著降低(P<0.05、P<0.01),CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著增加(P<0.05、P<0.01)。上述结果表明,刺五加多糖具有改善抑郁模型大鼠抑郁行为作用,其机制与调控PI3K/Akt/mTOR通路及抗炎、抗氧化应激作用有关。 展开更多

关键词 刺五加多糖 炎症 氧化应激 抑郁 磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶 b/雷帕霉素靶蛋白 (PI3K/Akt/mTOR) 通路

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二甲双胍调控PI3K/Akt/mTOR通路减轻糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡 被引量：10

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作者 张丰姣 毛雨 +6 位作者 何丽 宋利革 刘红梅 许玲玉 孙玲 康志强 王永魁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1323-1328,共6页

目的探讨二甲双胍(Met)调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对糖皮质激素地塞米松(Dex)诱导的成骨细胞凋亡的影响。方法将体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分为对照组(正常培养)... 目的探讨二甲双胍(Met)调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对糖皮质激素地塞米松(Dex)诱导的成骨细胞凋亡的影响。方法将体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分为对照组(正常培养)、Dex组(以Dex处理)、Met组(以Dex和Met共同处理)、Met+IGF-1组(以Dex、Met和PI3K/Akt/mTOR通路活化剂IGF-1共同处理)、Met+NVP-BEZ235组(以Dex、Met和PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂NVP-BEZ235共同处理),采用免疫印迹法(WB)检测MC3T3-E1细胞中PI3K、Akt、磷酸化(p)-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达水平,通过噻唑蓝(MTT)法检测MC3T3-E1细胞存活率、流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡率、实时荧光定量PCR检测MC3T3-E1细胞中Bcl-2和Bax mRNA表达水平、Caspase-3活性测定试剂盒检测MC3T3-E1细胞Caspase-3活性、JC-1探针检测MC3T3-E1细胞线粒体膜电位变化。结果与对照组比较,Dex组细胞中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平和细胞存活率、Bcl-2 mRNA表达水平以及线粒体膜电位均明显降低,而细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平和Caspase-3活性均明显升高(P<0.05);与Dex组比较,Met组细胞中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平和细胞存活率、Bcl-2 mRNA表达水平以及线粒体膜电位均明显升高,而细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平、Caspase-3活性明显降低(P<0.05);给予IGF-1作用后Met对MC3T3-E1细胞的作用效果明显增强,而给予NVP-BEZ235作用后Met对MC3T3-E1细胞的作用效果明显减弱(P<0.05)。结论Met可通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制线粒体凋亡途径,减轻糖皮质激素Dex诱导的成骨细胞凋亡。 展开更多

关键词 二甲双胍 糖皮质激素 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 成骨细胞 细胞凋亡

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雷公藤甲素联合吉非替尼对EGFR突变NSCLC细胞的协同效应分析

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作者 张艺 郭芬 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第18期2219-2225,共7页

目的探讨雷公藤甲素(TPL)联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对EGFR突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的协同效应及潜在机制。方法体外培养人NSCLC细胞系H1975(EGFR T790M/L858R突变的耐药细胞系)和H1299(EGFR野生型的... 目的探讨雷公藤甲素(TPL)联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对EGFR突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的协同效应及潜在机制。方法体外培养人NSCLC细胞系H1975(EGFR T790M/L858R突变的耐药细胞系)和H1299(EGFR野生型的非耐药细胞系),采用MTT法检测细胞存活率并通过联合用药指数(CI)评价TPL和吉非替尼的联用效应。将H1975细胞分为空白组,低、高浓度TPL组(5、15 nmol/L),吉非替尼组(2μmol/L),低浓度TPL+吉非替尼组、高浓度TPL+吉非替尼组(5 nmol/L TPL+2μmol/L吉非替尼、15 nmol/L TPL+2μmol/L吉非替尼),采用流式细胞术检测其凋亡及周期分布情况;利用分子对接技术预测TPL与EGFR的结合能力,并采用流式细胞术检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3α(MAP1LC3A)、MAP1LC3B]的表达情况。结果TPL对H1975和H1299细胞的增殖均有一定的抑制作用,且有浓度、时间依赖趋势;5或15 nmol/L TPL联合吉非替尼作用48 h对H1975细胞的增殖均有协同抑制效应(CI<1),而对H1299细胞则无协同作用(CI>1)。与空白组比较,各药物组的细胞凋亡率和G_(0)/G_(1)期细胞的比例均显著升高,S期、G_(2)/M期(个别TPL组除外)细胞的比例均显著降低,且联用组效果更优(P<0.05)。分子对接结果显示,TPL的羟基可与EGFR T790M/L858R突变编码产物的Thr854残基形成氢键。与空白组比较,各药物组细胞中通路相关蛋白的表达均显著下调,自噬相关蛋白的表达均显著上调,且联用组效果更优(P<0.05)。结论TPL联合吉非替尼可协同抑制EGFR突变NSCLC细胞的增殖活性,其作用机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR通路和诱导细胞自噬有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 吉非替尼 表皮生长因子受体 酪氨酸激酶抑制剂 非小细胞肺癌 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 自噬 耐药

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磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路特异性抑制剂RAD001和LY294002对不同分子特征人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

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作者 马斌 杨乐 +2 位作者 孙刚 董朝 马斌林 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2143-2145,共3页

目的 观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂RAD001和LY294002对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞株增殖与凋亡的影响,探讨PI3 K/蛋白激酶B （Akt）/mTOR信号通路上下游不同靶点联合阻滞对不同亚型人乳... 目的 观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂RAD001和LY294002对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞株增殖与凋亡的影响,探讨PI3 K/蛋白激酶B （Akt）/mTOR信号通路上下游不同靶点联合阻滞对不同亚型人乳腺癌细胞株的抗肿瘤效应及其机制.方法 体外RAD001和LY294002单独或者联合使用,通过噻唑蓝（MTT）实验计算药物半数抑制剂量（IC50）.应用流式细胞仪分析细胞周期分布及凋亡.结果 LY294002和RAD001单药均使能人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231抑制细胞增殖、阻滞周期、诱导细胞凋亡.联合用药后各细胞株的抗肿瘤效应明显增强.结论 针对P13 K/Akt/mTOR信号通路的靶向干预可显著抑制人乳腺癌细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导其凋亡,且通路中不同靶点联合干预的抗肿瘤效应更加显著,尤其是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人类表皮生长因子受体2（Her-2）均阴性的MDA-MB-231细胞株. 展开更多

关键词 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 LY294002 RAD001 细胞增殖 细胞凋亡

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四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 被引量：31

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作者 柳荣 王燕 +3 位作者 朱向东 高艳奎 王欢 钟兴腾 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期16-23,共8页

目的:探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关基因mRNA和蛋白以及血清中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-10(IL-10)表达水平的影响... 目的:探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关基因mRNA和蛋白以及血清中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-10(IL-10)表达水平的影响。方法:将120只SPF级Wistar大鼠在SPF级实验室适应性喂养7 d后分为空白组和造模组,造模组大鼠采用二硝基苯磺酸盐(DNBS)/乙醇溶液灌肠+皮下注射氢化可的松+番泻叶灌胃法建立脾肾阳虚型UC大鼠模型。将成功建立模型的大鼠随机分为5组,分别为模型组,美沙拉嗪(0.36 g·kg^(-1))组,四神丸高、中、低剂量(3.2,1.6,0.8 g·kg^(-1))组,灌胃体积均为10 mL·kg^(-1),模型组和空白组灌服等体积蒸馏水,1次/d,连续21 d。每日观察大鼠一般情况,并记录小鼠体质量、粪便性状及隐血情况进行疾病活动指数(DAI)评分。取大鼠结肠组织,观察大体形态及结肠损伤情况,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分。采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠结肠组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织PI3K,Akt,mTOR mRNA的表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清IL-1β,IL-10的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织PI3K,磷酸化(p-)PI3K,Akt,p-Akt,mTOR,p-mTOR蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况相对较差,DAI评分,CMDI评分显著升高(P<0.01);大鼠病理切片见肠黏膜部分消失,腺体消失,有大量的炎性细胞浸润,聚集于黏膜层和基层;PI3K,Akt,mTOR mRNA表达水平显著升高(P<0.01);IL-1β含量显著升高,IL-10含量显著降低(P<0.01);p-PI3K,p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,四神丸高、中剂量组及美沙拉嗪组大鼠DAI评分明显下降(P<0.05);四神丸高、中、低剂量组及美沙拉嗪组大鼠CMDI评分显著降低(P<0.01);大鼠病理切片显示各给药组炎性细胞减少,黏膜� 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 温肾健脾法 四神丸 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素靶蛋白信号通路

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黄芪散微丸对糖尿病肾病大鼠肾脏PI3K/Akt/mTOR通路及自噬的影响 被引量：23

7

作者 列倍锋 程芳 +2 位作者 段婷婷 李敏仪 陈德琪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期11-17,共7页

目的:研究黄芪散微丸(HQS)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响,探讨其对自噬的影响。方法:采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(35 mg·kg^(-1))建立DN... 目的:研究黄芪散微丸(HQS)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响,探讨其对自噬的影响。方法:采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(35 mg·kg^(-1))建立DN大鼠模型。DN大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(0.027 g·kg^(-1))组、HQS低剂量(0.54 g·kg^(-1))组和HQS高剂量(1.08 g·kg^(-1))组。连续给药12周后检测各组大鼠24 h尿蛋白定量(UTP),血清白蛋白(Alb),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;免疫组化检测肾脏组织足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、膜蛋白(Podocin)蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织PI3K/Akt/mTOR信号蛋白表达及其磷酸化水平,以及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 h UTP,血清中SCr、BUN、TG、TC水平均显著升高,Alb水平显著下降(P<0.01);肾皮质中肾小管上皮细胞发生明显的颗粒样变性,毛细血管基底膜明显增厚,系膜细胞增生明显,肾小球发生硬化性改变;足细胞标志蛋白Nephrin、Podocin蛋白表达显著下降(P<0.01);肾组织中磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR及自噬标志物LC3、Beclin1蛋白表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,厄贝沙坦组和HQS各剂量组大鼠24 h UTP,血清中SCr、BUN、TG、TC水平不同程度降低,Alb水平明显升高;肾脏病理损害不同程度减轻;肾小球的足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin、Podocin蛋白表达不同程度升高;肾组织中p-PI3K/p-Akt/p-mTOR及自噬标志物LC3、Beclin1蛋白表达不同程度升高(P<0.05,P<0.01)。结论:HQS可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强足细胞自噬,保护肾小球,减缓了DN的发展进程。 展开更多

关键词 黄芪散微丸 糖尿病肾病 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 自噬

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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对^(60)Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用 被引量：15

8

作者 赵粉琴 安明霞 +4 位作者 丁晓南 刘洁颖 赵艳 谢知慧 李淑萍 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期12-19,共8页

目的以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路为靶点,探讨左归丸对^(60)Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法采用^(60)Co-γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD_(40))性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、... 目的以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路为靶点,探讨左归丸对^(60)Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法采用^(60)Co-γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD_(40))性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、补佳乐组(0.18 g·kg^(-1)·d^(-1))、补佳乐(0.09 g·kg^(-1)·d^(-1))+左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸中剂量(9.45 g·kg^(-1)·d^(-1))组和左归丸低剂量(4.725 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每日1次,治疗21 d,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E_(2))],苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢的组织形态变化,原位末端标记法(TUNEL)检测颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达结果。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FSH显著上升(P<0.01),E2明显下降(P<0.05),卵巢早期卵泡和黄体数量减少(P<0.01);颗粒细胞凋亡率显著增加(P<0.01);卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加,颗粒细胞凋亡率降低,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势,Bax蛋白表达有下降趋势,尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达,增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。 展开更多

关键词 辐射损伤 卵巢早衰(POF) 左归丸 原位末端标记法(TUNEL) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素的哺乳动物靶标(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax)

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桦木酸通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导人结肠癌细胞SW620凋亡及自噬 被引量：12

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作者 卓清缘 陈美先 王羚郦 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期99-106,共8页

目的:研究桦木酸对人结肠癌细胞SW620凋亡和自噬的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,确定最佳给药时间及给药浓度,用于后... 目的:研究桦木酸对人结肠癌细胞SW620凋亡和自噬的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,确定最佳给药时间及给药浓度,用于后续实验;设置空白组、桦木酸低、中、高浓度组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察桦木酸对SW620细胞形态的影响。采用Annexin-V/碘化丙啶(PI)双染法检测SW620细胞凋亡率。分别采用Hoechst33258染色及细胞自噬染色(MDC)观察细胞凋亡和自噬体发生情况。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3),微管相关蛋白Ⅰ轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、p62、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果:桦木酸以浓度、时间依赖性的方式抑制SW620、HT29、HCT116细胞的活性;与桦木酸给药24 h比较,W620、HT29、HCT116细胞给药48 h细胞活性明显降低(P<0.05,P<0.01),给药48 h的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),其中SW620细胞给药48 h的IC;最小。HE染色、Hoechst33258染色显示,桦木酸组可见浓度依赖性细胞凋亡;MDC染色可见细胞自噬体数量增加。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组Bax、Caspase-9、cleaved Caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),桦木酸中、高浓度组Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.01);桦木酸低、中、高浓度组p62、p-Akt、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:桦木酸对SW620细胞活性有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路从而诱导人结肠癌细胞SW620的凋亡及自噬有关。 展开更多

关键词 桦木酸 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 结肠癌细胞 SW620 凋亡 自噬

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基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护作用机制 被引量：8

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作者 唐丽 牟珍妮 +1 位作者 申思楠 雷磊 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期52-59,共8页

目的:观察助卵汤对环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢储备功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护机制。方法:60只雌性SD... 目的:观察助卵汤对环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢储备功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分为正常组10只,模型组50只,模型组采用环磷酰胺(第1天50 mg·kg^(-1)负荷剂量+第2~15天8 mg·kg^(-1)小剂量维持)腹腔注射进行造模,造模成功后随机分为模型组、阳性药物补佳乐组(0.1 mg·kg^(-1)·d^(-1))、助卵汤低、中、高剂量组(14、28、56 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,模型组与正常组予以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续给药21 d。检测各组大鼠动情周期、体质量,计算卵巢脏器指数与子宫脏器指数,苏木素-伊红(HE)染色检测卵巢组织病理情况及卵巢切面各级卵泡计数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清抗苗勒激素(AMH)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抑制素-B(INH-B)激素含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达,免疫组化检测大鼠卵巢组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,体质量及卵巢脏器指数与子宫脏器指数减少,原始卵泡数量减少,次级卵泡和闭锁卵泡数量增多,FSH升高(P<0.01),LH升高(P<0.05),AMH水平下降(P<0.05),卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均降低(P<0.01),LC3B蛋白表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,补佳乐和助卵汤各剂量组上述指标均改善,AMH含量升高(P<0.05),FSH降低(P<0.05),LC3B蛋白表达量显著降低(P<0.01),PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均有升高趋势,且补佳乐组和助卵汤低、中剂量组升高差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:助卵汤可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制卵巢颗粒细胞过度自噬的发生,从而逆转造模对大鼠卵巢储备功能的影响。 展开更多

关键词 早发性卵巢功能不全(POI) 助卵汤 冰山论 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 自噬

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补肾健脾方对再生障碍性贫血患者细胞自噬的影响 被引量：3

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作者 王文儒 丁晓庆 +3 位作者 杨秀鹏 许勇钢 王洪志 唐旭东 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期80-87,共8页

目的:探索补肾健脾方改善再生障碍性贫血(AA)患者细胞自噬水平,以及对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响。方法:收集2020年9月至2021年8月期间就诊于西苑医院的AA患者30例及304医院预备... 目的:探索补肾健脾方改善再生障碍性贫血(AA)患者细胞自噬水平,以及对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响。方法:收集2020年9月至2021年8月期间就诊于西苑医院的AA患者30例及304医院预备行外周血造血干细胞移植的健康供者6例,分为AA组和对照组。AA组予以3个月的补肾健脾方联合环孢素A(CsA)、雄激素治疗,收集AA组(治疗前后)骨髓及对照组外周血的单个核细胞,采用透射电子显微镜检测自噬小体、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、mTOR、Akt、PI3K mRNA水平及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、mTOR、磷酸化(p)-mTOR、Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白水平。结果:AA组实际完成29例,总有效率为51.72%(15/29)。(1)与对照组比较,AA患者治疗前外周血中白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、中性粒细胞绝对计数(ANC)均显著降低(P<0.01),自噬小体偏少,LC3 mRNA水平显著降低(P<0.01),mTOR、Akt和PI3KαmRNA水平显著升高(P<0.01),LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白水平均显著降低(P<0.01),Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K、mTOR和p-mTOR蛋白水平均显著升高(P<0.01);(2)与本组治疗前比较,AA患者治疗后,血红蛋白(HGB)和血小板计数(PLT)水平均明显升高(P<0.05),自噬小体增多,LC3 mRNA水平显著升高(P<0.01),mTOR、Akt和PI3KαmRNA水平均显著降低(P<0.01),LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白水平显著增高(P<0.01),Akt、p-PI3K蛋白水平显著降低(P<0.01),p-Akt、PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:AA患者细胞自噬水平降低,补肾健脾方能有效改善AA患者低水平细胞自噬状态,降低PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达。 展开更多

关键词 再生障碍性贫血 补肾健脾方 细胞自噬 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 临床研究

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姜黄素调节PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响

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作者 钟云峰 肖愉洁 +1 位作者 夏淦 袁思敏 《天津中医药大学学报》 CAS 2024年第8期701-707,共7页

[目的]探讨姜黄素(Cur)调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。[方法]将MGC-803细胞分为对照组、Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组、Cur高剂量+7... [目的]探讨姜黄素(Cur)调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。[方法]将MGC-803细胞分为对照组、Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组、Cur高剂量+740Y-P组,用于MGC-803细胞增殖、凋亡行为的检测。将MGC-803/DDP细胞分为空白组、Cur组、顺铂(DDP)组、Cur+DDP组、Cur+DDP+740Y-P组,用于MGC-803/DDP细胞化疗耐药性的检测。克隆形成实验、CCK-8检测MGC-803或MGC-803/DDP细胞增殖;流式细胞术检测MGC-803或MGC-803/DDP细胞凋亡;Western blot检测细胞中抗增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、多药耐药关联蛋白1(MRP1)、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达。[结果]与对照组比较,Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组MGC-803细胞增殖能力、克隆形成率及PCNA、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,细胞凋亡率及Bax蛋白表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05),表明Cur可抑制PI3K/AKT/mTOR通路及MGC-803细胞增殖,并诱导细胞凋亡;与Cur高剂量组比较,Cur高剂量+740Y-P组MGC-803细胞活性、克隆形成率及PCNA、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达升高,细胞凋亡率及Bax蛋白表达降低(P<0.05),表明Cur可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路抑制MGC-803细胞增殖,诱导细胞凋亡。与空白组比较,Cur组、DDP组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,凋亡率升高(P<0.05),表明MGC-803/DDP细胞的耐药性及PI3K/AKT/mTOR通路的激活程度高于MGC-803细胞;与Cur组、DDP组比较,Cur+DDP组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,凋亡率升高(P<0.05),表明Cur可抑制PI3K/AKT/mTOR通路并降低MGC-803/DDP细胞耐药性;与Cur+DDP组比较,Cur+DDP+740Y-P组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达升高,凋亡率降低(P<0.05),表明Cur可能通过 展开更多

关键词 姜黄素 胃癌 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 凋亡 增殖 化疗耐药性

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当归挥发油影响人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的作用研究 被引量：6

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作者 朱丽娟 罗建云 +3 位作者 宋润泽 王丽娟 张安平 臧凯宏 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期3253-3256,共4页

目的研究当归挥发油(VOAS)对人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法将SW480细胞分为6组:空白对照组(0μg·mL^(-1))和5个浓度(VOAS:6.25,12.5,25.0,50.0和100.0μg·mL^(-1))实验组(命名为实验-1、-2,-3,-4和-5... 目的研究当归挥发油(VOAS)对人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法将SW480细胞分为6组:空白对照组(0μg·mL^(-1))和5个浓度(VOAS:6.25,12.5,25.0,50.0和100.0μg·mL^(-1))实验组(命名为实验-1、-2,-3,-4和-5组),培养48 h。用噻唑蓝比色法检测VOAS抑制SW480细胞增殖的作用,用流式细胞术和吖啶橙(AO)荧光染色分别观察25, 50μg·mL^(-1)的VOAS作用于SW480细胞后细胞的凋亡和自噬情况,蛋白质印迹法测定细胞凋亡和自噬相关蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/西罗莫司靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号转导通路关键蛋白表达水平。结果空白对照组和实验-1、-2,-3,-4和-5组的细胞抑制率分别为0,(14.07±1.96)%,(19.87±3.42)%,(37.09±2.06)%,(49.15±2.83)%和(77.82±2.48)%,IC;为(49.26±2.33)μg·mL^(-1),表明VOAS能够明显抑制SW480细胞的增殖。空白对照组、实验-3组和实验-4组的细胞凋亡率分别为(6.22±1.28)%,(15.32±3.11)%和(35.68±3.89)%;这3组的凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3的相对表达量分别为(50.05±2.78)%,(74.10±5.80)%和(114.55±5.26)%;这3组的自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的相对表达量分别为(10.56±2.33)%,(51.11±2.82)%和(83.93±10.15)%;这3组的p-mTOR的相对表达量分别为(111.40±3.97)%,(76.37±6.52)%和(59.52±1.99)%。实验-3组和实验-4组的上述指标与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);同时,实验-3组和实验-4组与空白对照组比较,细胞内红色荧光强度明显增强。结论 VOAS能够抑制人结肠癌SW480细胞增殖,诱导细胞凋亡及自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。 展开更多

关键词 当归挥发油 SW480细胞 凋亡 自噬 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/西罗莫司靶蛋白信号转导通路

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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探究虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺损伤及炎症反应的影响 被引量：1

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作者 牛磊 刘建 +1 位作者 张磊 杨静 《中国医院用药评价与分析》 2023年第7期815-819,共5页

目的:探讨虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠肺损伤、炎症反应及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、虫草素低剂量(80 mg/kg)组、... 目的:探讨虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠肺损伤、炎症反应及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、虫草素低剂量(80 mg/kg)组、虫草素高剂量(160 mg/kg)组和地塞米松(0.09 mg/kg)组。除对照组(14只)外,其余各组大鼠采用烟熏法联合脂多糖制备AECOPD模型,建模结束后,各组大鼠(各14只)给予对应药物干预14 d。采用全自动血气分析仪检测大鼠腹主动脉血氧分压(PaO_(2))水平;采用苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织病理学变化并进行肺损伤评分;采用酶联免疫吸附试验检测肺组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法分别检测大鼠肺组织中PI3K、Akt、mTOR信使RNA(mRNA)和蛋白水平。结果:对照组大鼠肺组织细胞排列规则,结构正常;与对照组相比,模型组大鼠肺组织肺泡破裂,有明显中性粒细胞浸润,并且可见肺泡壁增厚,且有胶原蛋白沉淀,动脉血PaO_(2)水平显著降低(P<0.05),肺损伤评分、肺组织中IL-6、TNF-α、PI3K、Akt及mTOR的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,虫草素低、高剂量组大鼠肺组织肺泡壁逐渐变薄,中性粒细胞浸润程度逐渐减轻,肺泡结构逐渐趋于正常,动脉血PaO_(2)水平依次升高(P<0.05),肺损伤评分、肺组织中IL-6、TNF-α、PI3K、Akt及mTOR的mRNA和蛋白水平依次降低(P<0.05),上述差异均有统计学意义。地塞米松组与虫草素高剂量组大鼠肺组织病理学变化及各项指标水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:虫草素可减轻AECOPD大鼠的肺损伤,抑制炎症反应,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 虫草素 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 肺损伤 炎症反应

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小豆蔻素对黑色素瘤细胞的作用及机制 被引量：1

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作者 张芬 戴耕武 +2 位作者 罗东升 赖小梅 杨镓宁 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第22期3286-3290,共5页

目的探究小豆蔻素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素(mTOR)信号通路的影响。方法B16-F10细胞分为对照组(B16-F10细胞未做任何处理),低、中、高剂量实验组(10、20和4... 目的探究小豆蔻素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素(mTOR)信号通路的影响。方法B16-F10细胞分为对照组(B16-F10细胞未做任何处理),低、中、高剂量实验组(10、20和40μmol·L^(-1)小豆蔻素),LY294002组(20μmol·L^(-1)LY294002),高剂量+740Y-P组(40μmol·L^(-1)小豆蔻素+20μmol·L^(-1)740Y-P)。噻唑蓝(MTT)法检验B16-F10细胞的增殖能力;Annexin-V-FITC/PI双染法检测B16-F10细胞的凋亡率;划痕愈合实验检测B16-F10细胞的迁移能力;Transwell实验检测B16-F10细胞的侵袭能力;蛋白印迹法检测蛋白表达。结果对照组、高剂量实验组、LY294002组和高剂量+740Y-P组的细胞增殖率分别为(100.00±1.95)%、(39.59±3.75)%、(42.34±4.02)%和(91.32±11.34)%,细胞凋亡率分别为(6.97±0.59)%、(19.21±1.95)%、(19.02±2.02)%和(7.68±0.74)%,划痕愈合率分别为(67.85±5.29)%、(21.35±3.48)%、(24.02±3.70)%和(63.56±5.12)%,侵袭细胞数分别为(150.48±14.32)、(53.12±5.01)、(52.34±5.14)和(128.32±11.89)个,p-PI3K/PI3K分别为0.80±0.08、0.49±0.06、0.50±0.04和0.73±0.09,p-Akt/Akt分别为0.81±0.08、0.46±0.04、0.45±0.05和0.71±0.08,p-mTOR/mTOR分别为0.77±0.05、0.35±0.03、0.36±0.04和0.69±0.07。上述指标,高剂量实验组、LY294002组与对照组比较,高剂量+740Y-P组与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论豆蔻素可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制黑色素瘤B16-F10细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 小豆蔻素 黑色素瘤 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 增殖 迁移 侵袭

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微小RNA-199R-3p及磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在结肠癌的表达及临床意义 被引量：3

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作者 李华驰 杨铁成 +4 位作者 王华侨 杨丽洁 王丹雯 石丽稳 熊斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期212-216,共5页

目的检测在结肠癌组织和对应癌旁组织微小RNA(miRNA,miR)-199a-3p和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,探讨两者与结肠癌临床病理特征的关系。方法选择2016年1月至2019年7月武汉大学中南医院经病... 目的检测在结肠癌组织和对应癌旁组织微小RNA(miRNA,miR)-199a-3p和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,探讨两者与结肠癌临床病理特征的关系。方法选择2016年1月至2019年7月武汉大学中南医院经病理学确诊的67例结肠癌患者,其中男性28例,女性37例,平均年龄63.2岁,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测其结肠癌组织及对应癌旁组织中miR-199a-3p和PI3K/Akt/mTOR表达,分析miR-199a-3p的表达与各临床病理学参数的关系,分析结肠癌肿瘤组织中miR-199a-3p、PI3K、Akt、mTOR蛋白表达之间的关系。应用SPSS 22.0统计软件分析,各组间比较采用χ^2检验。结果结肠癌肿瘤组织miR-199a-3p表达(1.107±0.041)明显高于癌旁正常组织(0.613±0.034),差异有统计学意义(t=2.611,P<0.05);结肠癌患者肿瘤组织miR-199a-3p表达与淋巴管侵袭(χ^2=8.111,P<0.05)、血管侵袭(χ^2=5.550,P<0.05)、淋巴结转移(χ^2=4.189,P<0.05)、肝转移(χ^2=12.320,P<0.05)、临床分期(χ^2=4.300,P<0.05)等临床病理因素明显相关,而与年龄(χ^2=0.069,P>0.05)、性别(χ^2=0.238,P>0.05)、肿瘤位置(χ^2=0.321,P>0.05)、病理分级(χ^2=0.013,P>0.05)、腹膜转移(χ^2=0.109,P>0.05)等临床病理因素无明显相关;mTOR在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为80.60%(54/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率23.88%(16/67),差异有统计学意义(χ^2=43.191,P<0.05);Akt在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为74.63%(50/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率28.36%(19/67),差异有统计学意义(χ^2=28.711,P<0.05);PI3K在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为68.66%(46/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率25.37%(17/67),差异有统计学意义(χ^2=25.191,P<0.05);结肠癌肿瘤组织中miR-199a-3p表达与PI3K、Akt、mTOR均呈正相关(r=0.632、0.605、0.689,P<0.05),结肠癌肿瘤组织中PI3K表达与Akt、mTOR均呈正相关(r=0.707、0.705,P<0.05),结� 展开更多

关键词 结肠癌 微小RNA 微小RNA-199a-3p 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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NVP-BEZ235对裸鼠胃癌移植瘤的作用

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作者 李良庆 谢狄亚 +4 位作者 郑建涛 潘敦 陈辉 郑雪兰 张盛伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期442-445,共4页

目的观察NVP-BEZ235单用及联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对NCI-N87裸鼠移植瘤的影响。方法制备人胃癌细胞株NCI-N87荷瘤鼠。分为对照组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、5-Fu组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g... 目的观察NVP-BEZ235单用及联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对NCI-N87裸鼠移植瘤的影响。方法制备人胃癌细胞株NCI-N87荷瘤鼠。分为对照组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、5-Fu组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射5-Fu 0.025 mg/g）、NVP-BEZ235组（每3 d灌胃NVP-BEZ235 0.04 mg/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、联合用药组（每3 d灌胃NVP-BEZ235 0.04 mg/g，每3 d腹腔注射5-Fu 0.025 mg/g）。记录肿瘤体积、重量。Western blot法检测凋亡相关蛋白、磷酸肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白、侵袭相关蛋白的改变。结果构建裸鼠NCI-N87胃癌移植瘤模型，肿瘤相对体积比较：联合用药组（6.84±0.98）小于5-Fu组（8.47±1.44），差异有统计学意义（t＝2.303，P＝0.044）。肿瘤重量（g）比较：联合用药组（0.83±0.16）小于5-Fu组（1.20±0.32），差异有统计学意义（t＝2.524，P＝0.038）。Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR相对表达量NVP-BEZ235组（0.56±0.05、0.23±0.04、0.50±0.03）显著低于对照组（0.96±0.11、0.68±0.03、0.64±0.12；t＝9.739、21.823、3.366，P＝0.000、0.000、0.006），联合用药组（0.53±0.06、0.20±0.03、0.51±0.07）显著低于5-Fu组（0.93±0.10、0.51±0.05、0.67±0.04；t＝8.234、12.489、4.628，P＝0.000、0.000、0.002），4组之间差异有统计学意义（F＝46.457、263.318、6.678，P＝0.000、0.000、0.002）。凋亡相关蛋白活化型半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）、抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）相对表达量，NVP-BEZ235组（1.28±0.06、1.39±0.08、0.59±0.04）显著高于对照组（0.94±0.10、0.99±0.11、1.07±0.07；t＝8.660、8.077、17.456，P＝0.000、0.000、0.000），联合用药组（1.57±0.09、1.70±0.10、0.37±0.07� 展开更多

关键词 胃癌 NVP-bEZ235 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 凋亡 侵袭

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黄芪多糖对肺癌A549细胞自噬的作用及机制研究 被引量：15

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作者 杨琪 段俊颖 +4 位作者 王雪林 梁乾坤 王彦君 陈彦文 明海霞 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1329-1333,共5页

目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(... 目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(-1) XOD处理24 h)、低、中、高3个浓度实验组(在模型组基础上分别使用100,200和400 mg·L^(-1) APS进行处理)及3-MA抑制组(在模型组基础上使用2 mmol·L^(-1)3-甲基腺嘌呤进行处理)。以免疫荧光法检测自噬相关蛋白,以蛋白质印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测mRNA的表达水平。结果正常组、模型组、高浓度实验组及3-MA抑制组的微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白荧光强度分别为6368.50±17.90,2.57×10^(4)±224.03,7443.00±19.20和8356.50±18.52;抗坏死骨片1(P62)的蛋白荧光强度分别为2.86×10^(4)±194.85,3225.50±12.69,1.04×10^(4)±209.50和1.04×10^(4)±96.78。这4组的PI3K的蛋白相对表达水平分别1.11±0.05,1.93±0.06,1.30±0.04和1.40±0.08;这4组的Akt蛋白表达水平为0.64±0.06,0.27±0.06,0.50±0.09和0.66±0.03;这4组的mTOR蛋白表达水平为1.94±0.06,0.93±0.06,1.28±0.03和0.91±0.04;这4组的Beclin1蛋白表达水平为0.48±0.04,1.03±0.04,0.77±0.09和0.65±0.09。mRNA表达的趋势与蛋白一致。自噬相关调节因子(LC3B、P62、Beclin1)及PI3K、Akt、mTOR信号因子,模型组与正常组相比,或高浓度实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪多糖防治肺癌的分子机制之一可能是通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制肺癌A549细胞自噬而发挥作用。 展开更多

关键词 黄芪多糖 自噬 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 微管相关蛋白1轻链3b

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槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞自噬及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响 被引量：14

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作者 宋静 白吉祥 +2 位作者 王书惠 刘伦翠 赵志轩 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期578-584,共7页

目的观察槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞活力、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法体外培养PC-3细胞,采用CCK-8法检测PC-3细胞活力,TUNEL染色检测PC-3细胞凋亡,吖啶橙染... 目的观察槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞活力、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法体外培养PC-3细胞,采用CCK-8法检测PC-3细胞活力,TUNEL染色检测PC-3细胞凋亡,吖啶橙染色观察PC-3细胞自噬小泡,GFP-LC3质粒转染分析观察PC-3细胞自噬小体,Western blot分析检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(LC3)、Beclin-1和PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的表达。结果槲皮素以浓度-时间依赖性的方式抑制PC-3细胞活力,并诱导细胞凋亡;能够增加PC-3细胞自噬小泡和自噬小体的数量;能够升高PC-3细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin-1表达,同时降低磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt和磷酸化-mTOR的表达。结论槲皮素可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导PC-3细胞发生自噬。 展开更多

关键词 槲皮素 前列腺癌 自噬 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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黄芪皂苷对病毒性心肌炎大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路和心肌细胞凋亡的影响 被引量：11

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作者 郑恒 张聪子 +3 位作者 徐金军 章登政 甘露珍 饶志威 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期3521-3526,共6页

目的分析黄芪皂苷(SA)对病毒性心肌炎(VMC)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和心肌细胞凋亡的影响。方法制备VMC大鼠模型,随机分成正常组、模型组、SA低(40 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高剂量(160 m... 目的分析黄芪皂苷(SA)对病毒性心肌炎(VMC)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和心肌细胞凋亡的影响。方法制备VMC大鼠模型,随机分成正常组、模型组、SA低(40 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高剂量(160 mg/kg)组,每组15只,造模成功后灌胃给药,连续15 d。超声心动图检测大鼠心功能。HE染色检测大鼠心肌组织病理变化。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA表达。生化仪检测血清心肌酶含量。酶联免疫吸附法检测大鼠血清炎症因子。蛋白免疫印迹检测蛋白。结果经SA干预可改善VMC大鼠心肌病理损伤,降低CVB3病毒表达量,提高短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF)水平,降低左室舒张末内径(LVEDd)和左室收缩末内径(LVESd)水平;减少血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平;降低肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-7(IL-7)和白细胞介素-6(IL-6)水平;下调大鼠心肌组织中磷酸化磷酸肌醇3激酶(p-PI3K)/PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)/AKT、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR、Bcl-2相关X蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)比值。结论SA可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活降低血清心肌酶、炎症因子水平,抑制CVB3基因复制,改善心肌损伤,增强心功能,抑制心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄芪皂苷 病毒性心肌炎 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素靶蛋白 信号通路 凋亡

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