二甲双胍调控PI3K/Akt/mTOR通路减轻糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡 被引量：10

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作者 张丰姣 毛雨 +6 位作者 何丽 宋利革 刘红梅 许玲玉 孙玲 康志强 王永魁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1323-1328,共6页

目的探讨二甲双胍(Met)调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对糖皮质激素地塞米松(Dex)诱导的成骨细胞凋亡的影响。方法将体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分为对照组(正常培养)... 目的探讨二甲双胍(Met)调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对糖皮质激素地塞米松(Dex)诱导的成骨细胞凋亡的影响。方法将体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分为对照组(正常培养)、Dex组(以Dex处理)、Met组(以Dex和Met共同处理)、Met+IGF-1组(以Dex、Met和PI3K/Akt/mTOR通路活化剂IGF-1共同处理)、Met+NVP-BEZ235组(以Dex、Met和PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂NVP-BEZ235共同处理),采用免疫印迹法(WB)检测MC3T3-E1细胞中PI3K、Akt、磷酸化(p)-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达水平,通过噻唑蓝(MTT)法检测MC3T3-E1细胞存活率、流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡率、实时荧光定量PCR检测MC3T3-E1细胞中Bcl-2和Bax mRNA表达水平、Caspase-3活性测定试剂盒检测MC3T3-E1细胞Caspase-3活性、JC-1探针检测MC3T3-E1细胞线粒体膜电位变化。结果与对照组比较,Dex组细胞中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平和细胞存活率、Bcl-2 mRNA表达水平以及线粒体膜电位均明显降低,而细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平和Caspase-3活性均明显升高(P<0.05);与Dex组比较,Met组细胞中PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平和细胞存活率、Bcl-2 mRNA表达水平以及线粒体膜电位均明显升高,而细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平、Caspase-3活性明显降低(P<0.05);给予IGF-1作用后Met对MC3T3-E1细胞的作用效果明显增强,而给予NVP-BEZ235作用后Met对MC3T3-E1细胞的作用效果明显减弱(P<0.05)。结论Met可通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制线粒体凋亡途径,减轻糖皮质激素Dex诱导的成骨细胞凋亡。 展开更多

关键词 二甲双胍 糖皮质激素 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 成骨细胞 细胞凋亡

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雷公藤甲素联合吉非替尼对EGFR突变NSCLC细胞的协同效应分析

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作者 张艺 郭芬 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第18期2219-2225,共7页

目的探讨雷公藤甲素(TPL)联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对EGFR突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的协同效应及潜在机制。方法体外培养人NSCLC细胞系H1975(EGFR T790M/L858R突变的耐药细胞系)和H1299(EGFR野生型的... 目的探讨雷公藤甲素(TPL)联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对EGFR突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的协同效应及潜在机制。方法体外培养人NSCLC细胞系H1975(EGFR T790M/L858R突变的耐药细胞系)和H1299(EGFR野生型的非耐药细胞系),采用MTT法检测细胞存活率并通过联合用药指数(CI)评价TPL和吉非替尼的联用效应。将H1975细胞分为空白组,低、高浓度TPL组(5、15 nmol/L),吉非替尼组(2μmol/L),低浓度TPL+吉非替尼组、高浓度TPL+吉非替尼组(5 nmol/L TPL+2μmol/L吉非替尼、15 nmol/L TPL+2μmol/L吉非替尼),采用流式细胞术检测其凋亡及周期分布情况;利用分子对接技术预测TPL与EGFR的结合能力,并采用流式细胞术检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3α(MAP1LC3A)、MAP1LC3B]的表达情况。结果TPL对H1975和H1299细胞的增殖均有一定的抑制作用,且有浓度、时间依赖趋势;5或15 nmol/L TPL联合吉非替尼作用48 h对H1975细胞的增殖均有协同抑制效应(CI<1),而对H1299细胞则无协同作用(CI>1)。与空白组比较,各药物组的细胞凋亡率和G_(0)/G_(1)期细胞的比例均显著升高,S期、G_(2)/M期(个别TPL组除外)细胞的比例均显著降低,且联用组效果更优(P<0.05)。分子对接结果显示,TPL的羟基可与EGFR T790M/L858R突变编码产物的Thr854残基形成氢键。与空白组比较,各药物组细胞中通路相关蛋白的表达均显著下调,自噬相关蛋白的表达均显著上调,且联用组效果更优(P<0.05)。结论TPL联合吉非替尼可协同抑制EGFR突变NSCLC细胞的增殖活性,其作用机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR通路和诱导细胞自噬有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 吉非替尼 表皮生长因子受体 酪氨酸激酶抑制剂 非小细胞肺癌 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 自噬 耐药

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磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路特异性抑制剂RAD001和LY294002对不同分子特征人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

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作者 马斌 杨乐 +2 位作者 孙刚 董朝 马斌林 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2143-2145,共3页

目的 观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂RAD001和LY294002对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞株增殖与凋亡的影响,探讨PI3 K/蛋白激酶B （Akt）/mTOR信号通路上下游不同靶点联合阻滞对不同亚型人乳... 目的 观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂RAD001和LY294002对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞株增殖与凋亡的影响,探讨PI3 K/蛋白激酶B （Akt）/mTOR信号通路上下游不同靶点联合阻滞对不同亚型人乳腺癌细胞株的抗肿瘤效应及其机制.方法 体外RAD001和LY294002单独或者联合使用,通过噻唑蓝（MTT）实验计算药物半数抑制剂量（IC50）.应用流式细胞仪分析细胞周期分布及凋亡.结果 LY294002和RAD001单药均使能人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231抑制细胞增殖、阻滞周期、诱导细胞凋亡.联合用药后各细胞株的抗肿瘤效应明显增强.结论 针对P13 K/Akt/mTOR信号通路的靶向干预可显著抑制人乳腺癌细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导其凋亡,且通路中不同靶点联合干预的抗肿瘤效应更加显著,尤其是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人类表皮生长因子受体2（Her-2）均阴性的MDA-MB-231细胞株. 展开更多

关键词 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 LY294002 RAD001 细胞增殖 细胞凋亡

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四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 被引量：31

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作者 柳荣 王燕 +3 位作者 朱向东 高艳奎 王欢 钟兴腾 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期16-23,共8页

目的:探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关基因mRNA和蛋白以及血清中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-10(IL-10)表达水平的影响... 目的:探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关基因mRNA和蛋白以及血清中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-10(IL-10)表达水平的影响。方法:将120只SPF级Wistar大鼠在SPF级实验室适应性喂养7 d后分为空白组和造模组,造模组大鼠采用二硝基苯磺酸盐(DNBS)/乙醇溶液灌肠+皮下注射氢化可的松+番泻叶灌胃法建立脾肾阳虚型UC大鼠模型。将成功建立模型的大鼠随机分为5组,分别为模型组,美沙拉嗪(0.36 g·kg^(-1))组,四神丸高、中、低剂量(3.2,1.6,0.8 g·kg^(-1))组,灌胃体积均为10 mL·kg^(-1),模型组和空白组灌服等体积蒸馏水,1次/d,连续21 d。每日观察大鼠一般情况,并记录小鼠体质量、粪便性状及隐血情况进行疾病活动指数(DAI)评分。取大鼠结肠组织,观察大体形态及结肠损伤情况,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分。采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠结肠组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织PI3K,Akt,mTOR mRNA的表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清IL-1β,IL-10的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织PI3K,磷酸化(p-)PI3K,Akt,p-Akt,mTOR,p-mTOR蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况相对较差,DAI评分,CMDI评分显著升高(P<0.01);大鼠病理切片见肠黏膜部分消失,腺体消失,有大量的炎性细胞浸润,聚集于黏膜层和基层;PI3K,Akt,mTOR mRNA表达水平显著升高(P<0.01);IL-1β含量显著升高,IL-10含量显著降低(P<0.01);p-PI3K,p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,四神丸高、中剂量组及美沙拉嗪组大鼠DAI评分明显下降(P<0.05);四神丸高、中、低剂量组及美沙拉嗪组大鼠CMDI评分显著降低(P<0.01);大鼠病理切片显示各给药组炎性细胞减少,黏膜� 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 温肾健脾法 四神丸 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素靶蛋白信号通路

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黄芪散微丸对糖尿病肾病大鼠肾脏PI3K/Akt/mTOR通路及自噬的影响 被引量：23

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作者 列倍锋 程芳 +2 位作者 段婷婷 李敏仪 陈德琪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期11-17,共7页

目的:研究黄芪散微丸(HQS)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响,探讨其对自噬的影响。方法:采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(35 mg·kg^(-1))建立DN... 目的:研究黄芪散微丸(HQS)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响,探讨其对自噬的影响。方法:采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(35 mg·kg^(-1))建立DN大鼠模型。DN大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(0.027 g·kg^(-1))组、HQS低剂量(0.54 g·kg^(-1))组和HQS高剂量(1.08 g·kg^(-1))组。连续给药12周后检测各组大鼠24 h尿蛋白定量(UTP),血清白蛋白(Alb),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;免疫组化检测肾脏组织足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、膜蛋白(Podocin)蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织PI3K/Akt/mTOR信号蛋白表达及其磷酸化水平,以及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 h UTP,血清中SCr、BUN、TG、TC水平均显著升高,Alb水平显著下降(P<0.01);肾皮质中肾小管上皮细胞发生明显的颗粒样变性,毛细血管基底膜明显增厚,系膜细胞增生明显,肾小球发生硬化性改变;足细胞标志蛋白Nephrin、Podocin蛋白表达显著下降(P<0.01);肾组织中磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR及自噬标志物LC3、Beclin1蛋白表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,厄贝沙坦组和HQS各剂量组大鼠24 h UTP,血清中SCr、BUN、TG、TC水平不同程度降低,Alb水平明显升高;肾脏病理损害不同程度减轻;肾小球的足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin、Podocin蛋白表达不同程度升高;肾组织中p-PI3K/p-Akt/p-mTOR及自噬标志物LC3、Beclin1蛋白表达不同程度升高(P<0.05,P<0.01)。结论:HQS可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强足细胞自噬,保护肾小球,减缓了DN的发展进程。 展开更多

关键词 黄芪散微丸 糖尿病肾病 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 自噬

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桦木酸通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导人结肠癌细胞SW620凋亡及自噬 被引量：12

6

作者 卓清缘 陈美先 王羚郦 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期99-106,共8页

目的:研究桦木酸对人结肠癌细胞SW620凋亡和自噬的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,确定最佳给药时间及给药浓度,用于后... 目的:研究桦木酸对人结肠癌细胞SW620凋亡和自噬的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,确定最佳给药时间及给药浓度,用于后续实验;设置空白组、桦木酸低、中、高浓度组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察桦木酸对SW620细胞形态的影响。采用Annexin-V/碘化丙啶(PI)双染法检测SW620细胞凋亡率。分别采用Hoechst33258染色及细胞自噬染色(MDC)观察细胞凋亡和自噬体发生情况。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3),微管相关蛋白Ⅰ轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、p62、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果:桦木酸以浓度、时间依赖性的方式抑制SW620、HT29、HCT116细胞的活性;与桦木酸给药24 h比较,W620、HT29、HCT116细胞给药48 h细胞活性明显降低(P<0.05,P<0.01),给药48 h的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),其中SW620细胞给药48 h的IC;最小。HE染色、Hoechst33258染色显示,桦木酸组可见浓度依赖性细胞凋亡;MDC染色可见细胞自噬体数量增加。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组Bax、Caspase-9、cleaved Caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),桦木酸中、高浓度组Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.01);桦木酸低、中、高浓度组p62、p-Akt、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:桦木酸对SW620细胞活性有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路从而诱导人结肠癌细胞SW620的凋亡及自噬有关。 展开更多

关键词 桦木酸 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 结肠癌细胞 SW620 凋亡 自噬

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当归挥发油影响人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的作用研究 被引量：6

7

作者 朱丽娟 罗建云 +3 位作者 宋润泽 王丽娟 张安平 臧凯宏 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期3253-3256,共4页

目的研究当归挥发油(VOAS)对人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法将SW480细胞分为6组:空白对照组(0μg·mL^(-1))和5个浓度(VOAS:6.25,12.5,25.0,50.0和100.0μg·mL^(-1))实验组(命名为实验-1、-2,-3,-4和-5... 目的研究当归挥发油(VOAS)对人结肠癌SW480细胞凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法将SW480细胞分为6组:空白对照组(0μg·mL^(-1))和5个浓度(VOAS:6.25,12.5,25.0,50.0和100.0μg·mL^(-1))实验组(命名为实验-1、-2,-3,-4和-5组),培养48 h。用噻唑蓝比色法检测VOAS抑制SW480细胞增殖的作用,用流式细胞术和吖啶橙(AO)荧光染色分别观察25, 50μg·mL^(-1)的VOAS作用于SW480细胞后细胞的凋亡和自噬情况,蛋白质印迹法测定细胞凋亡和自噬相关蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/西罗莫司靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号转导通路关键蛋白表达水平。结果空白对照组和实验-1、-2,-3,-4和-5组的细胞抑制率分别为0,(14.07±1.96)%,(19.87±3.42)%,(37.09±2.06)%,(49.15±2.83)%和(77.82±2.48)%,IC;为(49.26±2.33)μg·mL^(-1),表明VOAS能够明显抑制SW480细胞的增殖。空白对照组、实验-3组和实验-4组的细胞凋亡率分别为(6.22±1.28)%,(15.32±3.11)%和(35.68±3.89)%;这3组的凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3的相对表达量分别为(50.05±2.78)%,(74.10±5.80)%和(114.55±5.26)%;这3组的自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的相对表达量分别为(10.56±2.33)%,(51.11±2.82)%和(83.93±10.15)%;这3组的p-mTOR的相对表达量分别为(111.40±3.97)%,(76.37±6.52)%和(59.52±1.99)%。实验-3组和实验-4组的上述指标与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);同时,实验-3组和实验-4组与空白对照组比较,细胞内红色荧光强度明显增强。结论 VOAS能够抑制人结肠癌SW480细胞增殖,诱导细胞凋亡及自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。 展开更多

关键词 当归挥发油 SW480细胞 凋亡 自噬 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/西罗莫司靶蛋白信号转导通路

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姜黄素调节PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响

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作者 钟云峰 肖愉洁 +1 位作者 夏淦 袁思敏 《天津中医药大学学报》 CAS 2024年第8期701-707,共7页

[目的]探讨姜黄素(Cur)调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。[方法]将MGC-803细胞分为对照组、Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组、Cur高剂量+7... [目的]探讨姜黄素(Cur)调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。[方法]将MGC-803细胞分为对照组、Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组、Cur高剂量+740Y-P组,用于MGC-803细胞增殖、凋亡行为的检测。将MGC-803/DDP细胞分为空白组、Cur组、顺铂(DDP)组、Cur+DDP组、Cur+DDP+740Y-P组,用于MGC-803/DDP细胞化疗耐药性的检测。克隆形成实验、CCK-8检测MGC-803或MGC-803/DDP细胞增殖;流式细胞术检测MGC-803或MGC-803/DDP细胞凋亡;Western blot检测细胞中抗增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、多药耐药关联蛋白1(MRP1)、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达。[结果]与对照组比较,Cur低剂量组、Cur中剂量组、Cur高剂量组MGC-803细胞增殖能力、克隆形成率及PCNA、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,细胞凋亡率及Bax蛋白表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05),表明Cur可抑制PI3K/AKT/mTOR通路及MGC-803细胞增殖,并诱导细胞凋亡;与Cur高剂量组比较,Cur高剂量+740Y-P组MGC-803细胞活性、克隆形成率及PCNA、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达升高,细胞凋亡率及Bax蛋白表达降低(P<0.05),表明Cur可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路抑制MGC-803细胞增殖,诱导细胞凋亡。与空白组比较,Cur组、DDP组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,凋亡率升高(P<0.05),表明MGC-803/DDP细胞的耐药性及PI3K/AKT/mTOR通路的激活程度高于MGC-803细胞;与Cur组、DDP组比较,Cur+DDP组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低,凋亡率升高(P<0.05),表明Cur可抑制PI3K/AKT/mTOR通路并降低MGC-803/DDP细胞耐药性;与Cur+DDP组比较,Cur+DDP+740Y-P组MGC-803/DDP细胞增殖能力、克隆形成率及MRP1、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达升高,凋亡率降低(P<0.05),表明Cur可能通过 展开更多

关键词 姜黄素 胃癌 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 凋亡 增殖 化疗耐药性

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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探究虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺损伤及炎症反应的影响 被引量：1

9

作者 牛磊 刘建 +1 位作者 张磊 杨静 《中国医院用药评价与分析》 2023年第7期815-819,共5页

目的:探讨虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠肺损伤、炎症反应及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、虫草素低剂量(80 mg/kg)组、... 目的:探讨虫草素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠肺损伤、炎症反应及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、虫草素低剂量(80 mg/kg)组、虫草素高剂量(160 mg/kg)组和地塞米松(0.09 mg/kg)组。除对照组(14只)外,其余各组大鼠采用烟熏法联合脂多糖制备AECOPD模型,建模结束后,各组大鼠(各14只)给予对应药物干预14 d。采用全自动血气分析仪检测大鼠腹主动脉血氧分压(PaO_(2))水平;采用苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织病理学变化并进行肺损伤评分;采用酶联免疫吸附试验检测肺组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法分别检测大鼠肺组织中PI3K、Akt、mTOR信使RNA(mRNA)和蛋白水平。结果:对照组大鼠肺组织细胞排列规则,结构正常;与对照组相比,模型组大鼠肺组织肺泡破裂,有明显中性粒细胞浸润,并且可见肺泡壁增厚,且有胶原蛋白沉淀,动脉血PaO_(2)水平显著降低(P<0.05),肺损伤评分、肺组织中IL-6、TNF-α、PI3K、Akt及mTOR的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,虫草素低、高剂量组大鼠肺组织肺泡壁逐渐变薄,中性粒细胞浸润程度逐渐减轻,肺泡结构逐渐趋于正常,动脉血PaO_(2)水平依次升高(P<0.05),肺损伤评分、肺组织中IL-6、TNF-α、PI3K、Akt及mTOR的mRNA和蛋白水平依次降低(P<0.05),上述差异均有统计学意义。地塞米松组与虫草素高剂量组大鼠肺组织病理学变化及各项指标水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:虫草素可减轻AECOPD大鼠的肺损伤,抑制炎症反应,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 虫草素 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 肺损伤 炎症反应

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小豆蔻素对黑色素瘤细胞的作用及机制 被引量：1

10

作者 张芬 戴耕武 +2 位作者 罗东升 赖小梅 杨镓宁 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第22期3286-3290,共5页

目的探究小豆蔻素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素(mTOR)信号通路的影响。方法B16-F10细胞分为对照组(B16-F10细胞未做任何处理),低、中、高剂量实验组(10、20和4... 目的探究小豆蔻素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素(mTOR)信号通路的影响。方法B16-F10细胞分为对照组(B16-F10细胞未做任何处理),低、中、高剂量实验组(10、20和40μmol·L^(-1)小豆蔻素),LY294002组(20μmol·L^(-1)LY294002),高剂量+740Y-P组(40μmol·L^(-1)小豆蔻素+20μmol·L^(-1)740Y-P)。噻唑蓝(MTT)法检验B16-F10细胞的增殖能力;Annexin-V-FITC/PI双染法检测B16-F10细胞的凋亡率;划痕愈合实验检测B16-F10细胞的迁移能力;Transwell实验检测B16-F10细胞的侵袭能力;蛋白印迹法检测蛋白表达。结果对照组、高剂量实验组、LY294002组和高剂量+740Y-P组的细胞增殖率分别为(100.00±1.95)%、(39.59±3.75)%、(42.34±4.02)%和(91.32±11.34)%,细胞凋亡率分别为(6.97±0.59)%、(19.21±1.95)%、(19.02±2.02)%和(7.68±0.74)%,划痕愈合率分别为(67.85±5.29)%、(21.35±3.48)%、(24.02±3.70)%和(63.56±5.12)%,侵袭细胞数分别为(150.48±14.32)、(53.12±5.01)、(52.34±5.14)和(128.32±11.89)个,p-PI3K/PI3K分别为0.80±0.08、0.49±0.06、0.50±0.04和0.73±0.09,p-Akt/Akt分别为0.81±0.08、0.46±0.04、0.45±0.05和0.71±0.08,p-mTOR/mTOR分别为0.77±0.05、0.35±0.03、0.36±0.04和0.69±0.07。上述指标,高剂量实验组、LY294002组与对照组比较,高剂量+740Y-P组与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论豆蔻素可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制黑色素瘤B16-F10细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 小豆蔻素 黑色素瘤 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 增殖 迁移 侵袭

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微小RNA-199R-3p及磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在结肠癌的表达及临床意义 被引量：3

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作者 李华驰 杨铁成 +4 位作者 王华侨 杨丽洁 王丹雯 石丽稳 熊斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期212-216,共5页

目的检测在结肠癌组织和对应癌旁组织微小RNA(miRNA,miR)-199a-3p和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,探讨两者与结肠癌临床病理特征的关系。方法选择2016年1月至2019年7月武汉大学中南医院经病... 目的检测在结肠癌组织和对应癌旁组织微小RNA(miRNA,miR)-199a-3p和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,探讨两者与结肠癌临床病理特征的关系。方法选择2016年1月至2019年7月武汉大学中南医院经病理学确诊的67例结肠癌患者,其中男性28例,女性37例,平均年龄63.2岁,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测其结肠癌组织及对应癌旁组织中miR-199a-3p和PI3K/Akt/mTOR表达,分析miR-199a-3p的表达与各临床病理学参数的关系,分析结肠癌肿瘤组织中miR-199a-3p、PI3K、Akt、mTOR蛋白表达之间的关系。应用SPSS 22.0统计软件分析,各组间比较采用χ^2检验。结果结肠癌肿瘤组织miR-199a-3p表达(1.107±0.041)明显高于癌旁正常组织(0.613±0.034),差异有统计学意义(t=2.611,P<0.05);结肠癌患者肿瘤组织miR-199a-3p表达与淋巴管侵袭(χ^2=8.111,P<0.05)、血管侵袭(χ^2=5.550,P<0.05)、淋巴结转移(χ^2=4.189,P<0.05)、肝转移(χ^2=12.320,P<0.05)、临床分期(χ^2=4.300,P<0.05)等临床病理因素明显相关,而与年龄(χ^2=0.069,P>0.05)、性别(χ^2=0.238,P>0.05)、肿瘤位置(χ^2=0.321,P>0.05)、病理分级(χ^2=0.013,P>0.05)、腹膜转移(χ^2=0.109,P>0.05)等临床病理因素无明显相关;mTOR在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为80.60%(54/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率23.88%(16/67),差异有统计学意义(χ^2=43.191,P<0.05);Akt在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为74.63%(50/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率28.36%(19/67),差异有统计学意义(χ^2=28.711,P<0.05);PI3K在结肠癌肿瘤组织中的阳性表达率为68.66%(46/67),明显高于癌旁正常组织阳性表达率25.37%(17/67),差异有统计学意义(χ^2=25.191,P<0.05);结肠癌肿瘤组织中miR-199a-3p表达与PI3K、Akt、mTOR均呈正相关(r=0.632、0.605、0.689,P<0.05),结肠癌肿瘤组织中PI3K表达与Akt、mTOR均呈正相关(r=0.707、0.705,P<0.05),结� 展开更多

关键词 结肠癌 微小RNA 微小RNA-199a-3p 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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NVP-BEZ235对裸鼠胃癌移植瘤的作用

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作者 李良庆 谢狄亚 +4 位作者 郑建涛 潘敦 陈辉 郑雪兰 张盛伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期442-445,共4页

目的观察NVP-BEZ235单用及联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对NCI-N87裸鼠移植瘤的影响。方法制备人胃癌细胞株NCI-N87荷瘤鼠。分为对照组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、5-Fu组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g... 目的观察NVP-BEZ235单用及联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对NCI-N87裸鼠移植瘤的影响。方法制备人胃癌细胞株NCI-N87荷瘤鼠。分为对照组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、5-Fu组（每3 d灌胃生理盐水0.02 ml/g，每3 d腹腔注射5-Fu 0.025 mg/g）、NVP-BEZ235组（每3 d灌胃NVP-BEZ235 0.04 mg/g，每3 d腹腔注射生理盐水0.02 ml/g）、联合用药组（每3 d灌胃NVP-BEZ235 0.04 mg/g，每3 d腹腔注射5-Fu 0.025 mg/g）。记录肿瘤体积、重量。Western blot法检测凋亡相关蛋白、磷酸肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白、侵袭相关蛋白的改变。结果构建裸鼠NCI-N87胃癌移植瘤模型，肿瘤相对体积比较：联合用药组（6.84±0.98）小于5-Fu组（8.47±1.44），差异有统计学意义（t＝2.303，P＝0.044）。肿瘤重量（g）比较：联合用药组（0.83±0.16）小于5-Fu组（1.20±0.32），差异有统计学意义（t＝2.524，P＝0.038）。Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR相对表达量NVP-BEZ235组（0.56±0.05、0.23±0.04、0.50±0.03）显著低于对照组（0.96±0.11、0.68±0.03、0.64±0.12；t＝9.739、21.823、3.366，P＝0.000、0.000、0.006），联合用药组（0.53±0.06、0.20±0.03、0.51±0.07）显著低于5-Fu组（0.93±0.10、0.51±0.05、0.67±0.04；t＝8.234、12.489、4.628，P＝0.000、0.000、0.002），4组之间差异有统计学意义（F＝46.457、263.318、6.678，P＝0.000、0.000、0.002）。凋亡相关蛋白活化型半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）、抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）相对表达量，NVP-BEZ235组（1.28±0.06、1.39±0.08、0.59±0.04）显著高于对照组（0.94±0.10、0.99±0.11、1.07±0.07；t＝8.660、8.077、17.456，P＝0.000、0.000、0.000），联合用药组（1.57±0.09、1.70±0.10、0.37±0.07� 展开更多

关键词 胃癌 NVP-bEZ235 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 凋亡 侵袭

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黄芪多糖对肺癌A549细胞自噬的作用及机制研究 被引量：15

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作者 杨琪 段俊颖 +4 位作者 王雪林 梁乾坤 王彦君 陈彦文 明海霞 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1329-1333,共5页

目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(... 目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(-1) XOD处理24 h)、低、中、高3个浓度实验组(在模型组基础上分别使用100,200和400 mg·L^(-1) APS进行处理)及3-MA抑制组(在模型组基础上使用2 mmol·L^(-1)3-甲基腺嘌呤进行处理)。以免疫荧光法检测自噬相关蛋白,以蛋白质印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测mRNA的表达水平。结果正常组、模型组、高浓度实验组及3-MA抑制组的微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白荧光强度分别为6368.50±17.90,2.57×10^(4)±224.03,7443.00±19.20和8356.50±18.52;抗坏死骨片1(P62)的蛋白荧光强度分别为2.86×10^(4)±194.85,3225.50±12.69,1.04×10^(4)±209.50和1.04×10^(4)±96.78。这4组的PI3K的蛋白相对表达水平分别1.11±0.05,1.93±0.06,1.30±0.04和1.40±0.08;这4组的Akt蛋白表达水平为0.64±0.06,0.27±0.06,0.50±0.09和0.66±0.03;这4组的mTOR蛋白表达水平为1.94±0.06,0.93±0.06,1.28±0.03和0.91±0.04;这4组的Beclin1蛋白表达水平为0.48±0.04,1.03±0.04,0.77±0.09和0.65±0.09。mRNA表达的趋势与蛋白一致。自噬相关调节因子(LC3B、P62、Beclin1)及PI3K、Akt、mTOR信号因子,模型组与正常组相比,或高浓度实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪多糖防治肺癌的分子机制之一可能是通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制肺癌A549细胞自噬而发挥作用。 展开更多

关键词 黄芪多糖 自噬 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 微管相关蛋白1轻链3b

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槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞自噬及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响 被引量：14

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作者 宋静 白吉祥 +2 位作者 王书惠 刘伦翠 赵志轩 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期578-584,共7页

目的观察槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞活力、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法体外培养PC-3细胞,采用CCK-8法检测PC-3细胞活力,TUNEL染色检测PC-3细胞凋亡,吖啶橙染... 目的观察槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞活力、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法体外培养PC-3细胞,采用CCK-8法检测PC-3细胞活力,TUNEL染色检测PC-3细胞凋亡,吖啶橙染色观察PC-3细胞自噬小泡,GFP-LC3质粒转染分析观察PC-3细胞自噬小体,Western blot分析检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(LC3)、Beclin-1和PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的表达。结果槲皮素以浓度-时间依赖性的方式抑制PC-3细胞活力,并诱导细胞凋亡;能够增加PC-3细胞自噬小泡和自噬小体的数量;能够升高PC-3细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin-1表达,同时降低磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt和磷酸化-mTOR的表达。结论槲皮素可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导PC-3细胞发生自噬。 展开更多

关键词 槲皮素 前列腺癌 自噬 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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黄芪皂苷对病毒性心肌炎大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路和心肌细胞凋亡的影响 被引量：11

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作者 郑恒 张聪子 +3 位作者 徐金军 章登政 甘露珍 饶志威 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期3521-3526,共6页

目的分析黄芪皂苷(SA)对病毒性心肌炎(VMC)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和心肌细胞凋亡的影响。方法制备VMC大鼠模型,随机分成正常组、模型组、SA低(40 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高剂量(160 m... 目的分析黄芪皂苷(SA)对病毒性心肌炎(VMC)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和心肌细胞凋亡的影响。方法制备VMC大鼠模型,随机分成正常组、模型组、SA低(40 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高剂量(160 mg/kg)组,每组15只,造模成功后灌胃给药,连续15 d。超声心动图检测大鼠心功能。HE染色检测大鼠心肌组织病理变化。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA表达。生化仪检测血清心肌酶含量。酶联免疫吸附法检测大鼠血清炎症因子。蛋白免疫印迹检测蛋白。结果经SA干预可改善VMC大鼠心肌病理损伤,降低CVB3病毒表达量,提高短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF)水平,降低左室舒张末内径(LVEDd)和左室收缩末内径(LVESd)水平;减少血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平;降低肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-7(IL-7)和白细胞介素-6(IL-6)水平;下调大鼠心肌组织中磷酸化磷酸肌醇3激酶(p-PI3K)/PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)/AKT、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR、Bcl-2相关X蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)比值。结论SA可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活降低血清心肌酶、炎症因子水平,抑制CVB3基因复制,改善心肌损伤,增强心功能,抑制心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄芪皂苷 病毒性心肌炎 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素靶蛋白 信号通路 凋亡

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肝豆扶木汤对CuCl_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用和机制 被引量：9

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作者 唐露露 张静 +5 位作者 魏涛华 江海林 董婷 杨悦 钱南南 杨文明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期48-56,共9页

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨肝豆扶木汤(GDFMD)对氯化铜(CuCl2)诱导的人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。方法:HepG2细胞分为空白组,模型组,GDFMD组,PI3K/mTOR抑制剂... 目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨肝豆扶木汤(GDFMD)对氯化铜(CuCl2)诱导的人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。方法:HepG2细胞分为空白组,模型组,GDFMD组,PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235(10 nmol·L-1)组,GDFMD+NVP-BEZ235(10 nmol·L-1)组。采用200μmol·L-1CuCl2构建模型组铜负荷HepG2细胞,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察细胞超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫荧光观察细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K,磷酸化Akt(p-Akt)/Akt,磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,p62表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞PI3K,Akt,mTOR,Beclin-1,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ,p62 mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组细胞SOD,GSH-Px活性下降,MDA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD含药血清组SOD,GSH-Px活性升高,MDA含量下降(P<0.05,P<0.01);NVP-BEZ235组GSH-Px活性下降,MDA含量升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR,p62表达水平显著降低,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD组p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR,p62表达水平升高,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平下降(P<0.05,P<0.01);NVP-BEZ235组p-PI3K/PI3K,p-mTOR/mTOR表达水平下调,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。与10%GDFMD组比较,10%GDFMD+NVP-BEZ235组p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR表达水平下降,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组LC3Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD组LC3Ⅱ蛋白表达降低,与10%GDFMD组比较,10%GDFMD+NVP-BEZ235组LC3Ⅱ蛋白表达升高。各组PI3K,Akt,mTOR mRNA相对表达量差异无统计学意义,与空白组比较,模型组p62 mRNA相对表达量显著降低,Beclin-1,LC3Ⅰ,LC3ⅡmRNA相对� 展开更多

关键词 肝豆扶木汤 肝豆状核变性 人肝癌细胞 自噬 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶b(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

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PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂在转移性结直肠癌中的研究进展 被引量：7

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作者 刘琦 郝朗松 +3 位作者 张东兴 王超宇 李沁宇 何奎 《医学综述》 2019年第14期2721-2725,共5页

转移性结直肠癌(mCRC)一直是临床治疗的难点,而分子靶向药物的出现,有效改善了mCRC患者的生存期,但是已在临床推广应用的分子靶向药物耐药性的产生却阻碍了基因靶向治疗的进一步发展。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋... 转移性结直肠癌(mCRC)一直是临床治疗的难点,而分子靶向药物的出现,有效改善了mCRC患者的生存期,但是已在临床推广应用的分子靶向药物耐药性的产生却阻碍了基因靶向治疗的进一步发展。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路抑制剂作为近年来新出现的靶向药物,为各种常见肿瘤提供了新的治疗方案。目前PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂的抗肿瘤特性已得到临床认可,但由于信号通路相互交联的特点,特别是针对信号通路中的突变或过表达的情况,联合多细胞毒性药物或多通路抑制方案有可能解决mCRC耐药的局面。 展开更多

关键词 转移性结直肠癌 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 信号通路抑制剂 耐药性 靶向治疗

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癌症治疗中PI3K/AKT/mTOR通路及靶向抑制剂研究进展 被引量：3

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作者 周慧 海广范 +1 位作者 张涛 邓智建 《中国药业》 CAS 2023年第5期127-128,I0001-I0007,共9页

目的为磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路抑制剂的开发、临床应用提供参考。方法归纳PI3K/AKT/mTOR通路在多类型癌症进展中的作用,比较该通路靶向抑制剂的治疗作用。结果PI3K/AKT/mTOR通路可促进肿... 目的为磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路抑制剂的开发、临床应用提供参考。方法归纳PI3K/AKT/mTOR通路在多类型癌症进展中的作用,比较该通路靶向抑制剂的治疗作用。结果PI3K/AKT/mTOR通路可促进肿瘤细胞增殖、迁移,促进耐药性产生。该通路抑制剂有PI3K靶向抑制剂、AKT靶向抑制剂、mTOR靶向抑制剂和PI3K/mTOR双靶向抑制剂,可延长患者的生存期,具有一定的肿瘤抑制作用。其中,PI3K和mTOR靶向抑制剂较AKT靶向抑制剂发展相对较好,多用于乳腺癌的治疗、延缓耐药性产生等。结论PI3K/AKT/mTOR通路促进癌症发展,其靶向抑制剂具有良好的靶向抗肿瘤效果,但应进一步增强特异性和选择性,减少不良反应。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕毒霉靶蛋白通路 靶向抑制剂 癌症 靶向治疗

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复方芩柏颗粒剂通过靶向干预miR-199-3p对溃疡性结肠炎的改善作用 被引量：7

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作者 肖佑 肖超 +2 位作者 肖戈 赵建政 王真权 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1100-1103,共4页

目的观察复方芩柏颗粒剂通过靶向干预miR-199-3p抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PK3K)/蛋白激酶B(AKT)-雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路激活对溃疡性结肠炎(UC)的作用。方法用5%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)与无水乙醇按1∶1体积制成TNBS/乙醇混合液... 目的观察复方芩柏颗粒剂通过靶向干预miR-199-3p抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PK3K)/蛋白激酶B(AKT)-雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路激活对溃疡性结肠炎(UC)的作用。方法用5%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)与无水乙醇按1∶1体积制成TNBS/乙醇混合液,建立溃疡性结肠炎模型。用随机数字表法将大鼠随机分为3组:正常组、模型组和实验组,每组19只。正常组和模型组给予0. 9%Na Cl 2 m L灌肠,实验组给16%复方芩柏颗粒2 m L灌肠,2次/天,连续3周。以免疫组化法检测结肠组织中m TOR表达,以蛋白质印迹法检测结肠组织PI3K/AKT相关蛋白表达,以实时荧光定量-PCR法测定结肠组织miR-199-3p基因表达。结果正常组、模型组和实验组的m TOR阳性表达(平均光密度)分别为0. 18±0. 06,0. 67±0. 09和0. 40±0. 06;上述3组的PI3KP85蛋白相对表达量分别为0. 18±0. 04,0. 83±0. 09和0. 58±0. 08;上述3组的PI3KP100蛋白相对表达量分别为0. 19±0. 05,0. 71±0. 11和0. 54±0. 08;上述3组的p-AKT蛋白相对表达量分别为0. 21±0. 06,0. 79±0. 05和0. 49±0. 08;上述3组大鼠结肠组织miR-199-3p基因相对表达量分别为0. 62±0. 09,0. 19±0. 0和0. 38±0. 09。上述指标:模型组和正常组相比较差异均有统计学意义(均P <0. 05);实验组与模型组比较差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论增加miR-199-3p表达和抑制PI3K/AKT-m TOR信号通路激活可能是复方芩柏颗粒剂治疗UC的重要机制。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 复方芩柏颗粒剂 微小RNA-199-3p 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b-雷帕霉素靶蛋白信号通路

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磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白自噬通路在支气管肺发育不良中的作用 被引量：2

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作者 成小蓉 刘蕊蕊 +1 位作者 潘飞飞 黄栋 《中国医药》 2023年第8期1165-1169,共5页

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。方法将A549细胞(腺癌人类肺泡基底上皮细胞)一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组。支气... 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。方法将A549细胞(腺癌人类肺泡基底上皮细胞)一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组。支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组高氧环境培养,置于37℃、85%氧气孵化箱中培养48 h,前者不加药剂、后者加10μmol/L的雷帕霉素干预;对照组常规环境培养,置于37℃、5%二氧化碳孵化箱中培养48 h,不加药剂。利用高氧构建支气管肺发育不良的细胞模型,利用蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验验证自噬对高氧处理后A549细胞肺泡表面标志物合成蛋白复合物(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)的影响,利用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测自噬对高氧处理后A549细胞增殖的影响,利用蛋白质印迹实验验证PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。结果蛋白质印迹实验和RT-qPCR实验表明自噬激活剂雷帕霉素挽救了高氧处理后A549细胞SPC、AQP5表达的下调。EdU实验表明雷帕霉素显著促进了高氧处理后A549细胞的增殖,EdU阳性细胞百分比高于支气管肺发育不良组[(0.48±0.06)比(0.36±0.02)](P<0.05)。蛋白质印迹实验显示雷帕霉素干预后的A549细胞中的磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt、磷酸化-mTOR、自噬选择性底物P62的表达水平显著降低,微管相关蛋白1轻链3的表达水平显著上升(均P<0.05)。结论PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 支气管肺发育不良 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 自噬 雷帕霉素

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