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红霉素抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果研究
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作者 孙雪皎 陈琳 +2 位作者 陈慧 李程 蓝官引 《重庆医学》 CAS 2023年第4期486-490,共5页
目的研究红霉素通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达从而减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果。方法以人单核细胞株(U937)为研究对象,采用烟草烟雾提取物(CSE)制造细胞氧化应激模型,分为空白对照(NC)组、CSE组(CSE刺激细胞)、... 目的研究红霉素通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达从而减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果。方法以人单核细胞株(U937)为研究对象,采用烟草烟雾提取物(CSE)制造细胞氧化应激模型,分为空白对照(NC)组、CSE组(CSE刺激细胞)、红霉素组(红霉素预孵育+CSE刺激细胞)、抑制剂组(PI3K通路抑制剂LY294002预孵育+CSE刺激细胞)等4组。根据转染Nrf2-siRNA干扰细胞中Nrf2蛋白的表达,分为siRNA NC对照组、siRNA NC+CSE组、NC+CSE+红霉素组、Nrf2-siRNA组、Nrf2-siRNA+CSE组、Nrf2-siRNA+CSE+红霉素组等6组。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组细胞中Akt mRNA、Nrf2 mRNA的表达。采用Western blotting检测各组细胞内Akt、PAkt、Nrf2、核因子(NF)-κB p65蛋白的水平。结果与空白对照组比较,CSE组白细胞介素-8(IL-8)水平明显升高,PAkt及NF-κB p65蛋白的表达水平上升,Nrf2蛋白及Nrf2 mRNA的表达水平下降。红霉素组和抑制剂组IL-8水平较CSE组下降,PAkt及NF-κB p65蛋白的表达水平下降,Nrf2蛋白及Nrf2 mRNA的表达水平有所升高。不同细胞氧化应激模型组Akt mRNA水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Nrf2-siRNA组Nrf2的表达水平较siRNA NC组明显降低,但与Nrf2-siRNA+CSE组、Nrf2-siRNA+CSE+红霉素组比较无明显差异;siRNA NC-CSE组Nrf2表达水平下降,而NC-CSE+红霉素组表达水平上升;siRNA NC-CSE组及Nrf2-siRNA+CSE组NF-κB p65及PAkt表达水平上升,但siRNA NC-CSE+红霉素组、NC-CSE+红霉素组表达水平下降。Nrf2-siRNA组与siRNA NC组NF-κB p65及PAkt表达水平无明显差异。不同干扰组间Akt蛋白的表达水平无明显差异。结论红霉素可通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白的表达减轻烟草烟雾暴露下单核细胞的炎性反应。 展开更多
关键词 红霉素 烟草烟雾提取物 单核细胞 Nrf2蛋白 PI3K/akt通路炎症
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