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MiR-4443通过抑制PEBP1的表达促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭 被引量:3
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作者 王金焱 王晋秋 +4 位作者 顾诠 杨艳 马亚军 朱静 张全安 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1712-1719,共8页
目的探讨miR-4443对乳腺癌转移的影响。方法使用高通量测序技术测定检测3例乳腺癌患者原位癌组织及其配对的癌旁组织中miR-4443的表达。使用TCGA数据库验证miR-4443在乳腺癌组织以及正常乳腺组织中的表达水平。以MCF-7细胞(低侵袭性乳... 目的探讨miR-4443对乳腺癌转移的影响。方法使用高通量测序技术测定检测3例乳腺癌患者原位癌组织及其配对的癌旁组织中miR-4443的表达。使用TCGA数据库验证miR-4443在乳腺癌组织以及正常乳腺组织中的表达水平。以MCF-7细胞(低侵袭性乳腺癌细胞)和MDA-MB-231细胞(高侵袭性乳腺癌细胞)为研究对象,采用RT-qPCR验证miR-4443在这两种细胞株中的表达水平。通过电转染法将miR-4443 mimics(miR-4443模拟物)、mimics-NC(miR-4443模拟物的对照物)或miR-4443 inhibitors(miR-4443抑制物)、inhibitors-NC(miR-4443抑制物的对照物)转染至不同的细胞株,利用RT-qPCR检测miR-4443在转染前后的表达水平,使用流式细胞分析仪分析miR-4443表达水平的变化对乳腺癌细胞凋亡的影响,使用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-4443表达水平的变化对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。使用生物信息学软件预测miR-4443潜在的靶基因,并进一步使用双荧光素酶报告基因系统验证。采用RT-qPCR和Western blot分别检测不同细胞株中PEBP1(重组人磷脂酰乙醇胺结合蛋白1)在mRNA和蛋白水平的表达。结果高通量测序技术检测发现在乳腺癌组织中miR-4443的表达远高于癌旁组织(P<0.01)。TCGA数据分析显示,与正常乳腺组织想比,miR-4443在乳腺癌组织中的表达升高(P<0.01)。RT-qPCR显示,与MCF-7细胞相比,MDA-MB-231细胞中miR-4443的表达升高(P<0.01)。与转染mimics-NC相比,MCF-7细胞转染miR-4443 mimics后,miR-4443的表达上调(P<0.01);而转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞,其表达下调(P<0.01)。转染miR-4443 mimics的MCF-7细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照差异无统计学意义(P>0.05),并且转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照亦差异无统计学意义(P>0.05)。划痕实验及Transwell侵袭实验显示转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力减弱(P<0.01)。相� 展开更多
关键词 微小RNA 磷脂酰乙醇胺结合蛋白1 肿瘤转移 乳腺癌
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PEBP4、CR-1在食管癌中表达的临床意义 被引量:3
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作者 罗东 尹杰 柯有力 《广西医学》 CAS 2014年第9期1205-1208,共4页
目的探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)、畸胎瘤衍化生长因子(CR-1)在食管癌组织中表达的临床意义。方法选取食管癌组织(癌组织组)及正常食管黏膜组织(正常组)各30份,分别采用免疫组化法、蛋白质印迹法检测各组PEBP4、CR-1表达水平。结... 目的探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)、畸胎瘤衍化生长因子(CR-1)在食管癌组织中表达的临床意义。方法选取食管癌组织(癌组织组)及正常食管黏膜组织(正常组)各30份,分别采用免疫组化法、蛋白质印迹法检测各组PEBP4、CR-1表达水平。结果癌组织组PEBP4表达阳性率为83.3%,显著高于正常组的20.0%(P<0.05);有淋巴结转移及远处转移的癌灶PEBP4表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶(P<0.05)。癌组织组CR-1表达阳性率为86.7%,显著高于正常组的16.7%(P<0.05);有淋巴结转移及远处转移的癌灶CR-1表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶(P<0.05)。癌组织组CR-1 mRNA及其蛋白相对表达水平均显著高于正常组(P<0.05)。结论食管癌组织中PEBP4、CR-1阳性表达率较高,对食管癌的早期诊断及预后判断有较高临床价值。 展开更多
关键词 食管癌 磷脂酰乙醇胺结合蛋白4 畸胎瘤衍化生长因子 免疫组化法 蛋白质印迹法
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