目的探讨上调磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphate and tension homology deleted on chromsometen,PTEN)基因表达对三阴性乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响及其作用机制。方法对数期人三阴性乳腺癌ZR-75-细胞株随机分为PTEN组、突变型PTEN(mut...目的探讨上调磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphate and tension homology deleted on chromsometen,PTEN)基因表达对三阴性乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响及其作用机制。方法对数期人三阴性乳腺癌ZR-75-细胞株随机分为PTEN组、突变型PTEN(mutated PTEN,M-PTEN)组和对照组,PTEN组、M-PTEN组分别转染人野生型PTEN真核表达质粒(pBP-PTEN)、突变型PTEN质粒(pBP-M-PTEN),对照组未作处理。转染后24、48、72h,MTT法检测3组ZR-75-1细胞生长抑制率,转染后72h,Transwell法检测3组侵袭细胞比率,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot法检测磷酸化局部黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,P-FAK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-Akt)表达水平。结果 PTEN组PTEN蛋白相对表达量(8.49±2.92)高于M-PTEN组(0.77±0.24)(P<0.05),对照组无PTEN蛋白表达;转染后24、48、72h,PTEN组细胞生长抑制率[(27.33±21.49)%、(37.20±11.48)%、(48.11±8.14)%]均高于M-PTEN组[(5.98±1.44)%、(6.98±2.84)%、(10.83±3.11)%]和对照组[(1.09±0.33)%、(2.10±0.83)%、(4.20±2.71)%](P<0.05),M-PTEN组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后72h,PTEN组侵袭细胞数目[(24.29±5.82)%]低于M-PTEN组[(56.30±11.84)%]和对照组[(89.29±10.49)%](P<0.05),M-PTEN组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);PTEN组G1期细胞比率[(54.89±2.67)%]低于M-PTEN组[(57.02±1.33)%]和对照组[(63.98±1.09)%],S期细胞比率[(36.56±2.10)%]高于M-PTEN组[(35.98±2.67)%]和对照组[(30.78±0.99)%](P<0.05),G2/G1期细胞比率[(1.85±0.33)%]与M-PTEN组[(1.90±1.10)%]和对照组[(1.91±1.00)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05),M-PTEN组G1、S、G2/G1细胞比率与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);PTEN组P-FAK蛋白相对表达水平(0.75±0.12)低于M-PTEN组(2.19±0.82)与对照组(3.23±0.62)(P<0.05),P-Akt蛋白相对表达(2.11±0.42)与M-PTEN组(1.83±0.74)和对照组(1.94±0.53)比较差异均无统计学意义(P>0.05);M-PTEN组P-FAK�展开更多
目的探讨安石榴苷(Punicalagin,PUN)通过靶向磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)基因逆转结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞LoVo对奥沙利铂(Oxaliplatin,Oxa)耐药性的作用。方...目的探讨安石榴苷(Punicalagin,PUN)通过靶向磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)基因逆转结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞LoVo对奥沙利铂(Oxaliplatin,Oxa)耐药性的作用。方法首先诱导和建立耐Oxa的LoVo细胞系LoVo/Oxa;本研究的实验分为0μmol·L^(-1)PUN组(无预处理)、100μmol·L^(-1)PUN组(用100μmol·L^(-1)PUN处理细胞)、200μmol·L^(-1)PUN组(用200μmol·L^(-1)PUN处理细胞)和对照组(转染空载载体)、PTEN组(转染PTEN过表达质粒)以及PTEN+200μmol·L^(-1)PUN组(先转染PTEN过表达质粒,再使用200μmol·L^(-1)PUN处理细胞)。用CCK-8法、EdU实验和Western blot分别检测细胞活力、增殖能力、耐药相关蛋白和PTEN蛋白的表达。结果LoVo/Oxa细胞和LoVo细胞中PTEN的表达分别为1.00±0.15和0.52±0.06,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、PTEN组和PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组中PTEN表达分别为1.00±0.14,2.61±0.29和4.41±0.48,PTEN组较对照组升高(P<0.05);PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组较PTEN组升高(P<0.05)。0,100,200μmol·L^(-1)安石榴苷组细胞阳性染色率分别为(50.91±5.62)%,(35.12±3.83)%,(20.54±2.43)%,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、PTEN组和PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组的增殖率分别为(43.41±5.23)%,(27.94±3.62)%和(17.12±3.14)%,PTEN组较对照组降低(P<0.05);PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷较PTEN组降低(P<0.05)。结论安石榴苷能通过上调PTEN的表达逆转LoVo/Oxa细胞对Oxa的耐药性。展开更多
文摘目的探讨安石榴苷(Punicalagin,PUN)通过靶向磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)基因逆转结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞LoVo对奥沙利铂(Oxaliplatin,Oxa)耐药性的作用。方法首先诱导和建立耐Oxa的LoVo细胞系LoVo/Oxa;本研究的实验分为0μmol·L^(-1)PUN组(无预处理)、100μmol·L^(-1)PUN组(用100μmol·L^(-1)PUN处理细胞)、200μmol·L^(-1)PUN组(用200μmol·L^(-1)PUN处理细胞)和对照组(转染空载载体)、PTEN组(转染PTEN过表达质粒)以及PTEN+200μmol·L^(-1)PUN组(先转染PTEN过表达质粒,再使用200μmol·L^(-1)PUN处理细胞)。用CCK-8法、EdU实验和Western blot分别检测细胞活力、增殖能力、耐药相关蛋白和PTEN蛋白的表达。结果LoVo/Oxa细胞和LoVo细胞中PTEN的表达分别为1.00±0.15和0.52±0.06,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、PTEN组和PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组中PTEN表达分别为1.00±0.14,2.61±0.29和4.41±0.48,PTEN组较对照组升高(P<0.05);PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组较PTEN组升高(P<0.05)。0,100,200μmol·L^(-1)安石榴苷组细胞阳性染色率分别为(50.91±5.62)%,(35.12±3.83)%,(20.54±2.43)%,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、PTEN组和PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷组的增殖率分别为(43.41±5.23)%,(27.94±3.62)%和(17.12±3.14)%,PTEN组较对照组降低(P<0.05);PTEN+200μmol·L^(-1)安石榴苷较PTEN组降低(P<0.05)。结论安石榴苷能通过上调PTEN的表达逆转LoVo/Oxa细胞对Oxa的耐药性。
