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题名力生长因子对牙周膜干细胞增殖分化的影响
被引量：1
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作者
屠腾
刘艳丽
王惠
赵萤
张旻
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机构
军事口腔医学国家重点实验室
西北大学附属人民医院(西安市人民医院西安市第四医院)
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出处
《口腔疾病防治》
2023年第2期86-93,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(31971248,81901052)。
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文摘
目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克隆形成能力及多向分化能力;CCK8法检测不同浓度MGF功能肽段(MGF⁃Ct24E肽)作用下PDLSCs的增殖活性;Western blot检测MGF⁃Ct24E肽作用下PDLSCs中的增殖细胞核抗原(pro⁃liferating cell nuclear antigen,PCNA)、碱性螺旋环螺旋转录因子Scleraxis、Ⅰ型胶原ɑ1(collagen type I alpha 1,COL1A1)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、Yes相关蛋白(Yes⁃associated protein,YAP)、磷酸化YAP(phosphory⁃lation yes⁃associated protein,P⁃YAP)蛋白表达量;免疫荧光观察YAP的表达情况;siRNA干扰YAP表达后,观察PDLSCs中MGF⁃Ct24E作用下PCNA、Scleraxis和COL1A1的表达。结果免疫磁珠分选的PDLSCs高表达干细胞表面标志物CD29、CD90、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;细胞具有较强的克隆形成能力,成骨诱导茜素红染色后可见红色钙结节,成脂诱导油红O染色后可见红色脂滴;50 ng/mL和100 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,PDLSCs的增殖活性增强(P<0.05);细胞中PCNA、Scleraxis和COL1A1蛋白表达上调,而Osterix蛋白表达量下调(P<0.05);50 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,YAP蛋白357位点磷酸化水平增强(P<0.05),免疫荧光染色观察发现,YAP蛋白在胞核聚集;MGF⁃Ct24E肽作用下,siRNA抑制YAP表达后,细胞中PCNA、Scler⁃axis蛋白表达量下调(P<0.05)。结论MGF通过激活YAP促进PDLSCs增殖及成纤维分化。
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关键词
力生长因子
牙周膜
牙周膜干细胞
牙周膜成纤维细胞
Yes相关蛋白
P⁃Yes相关蛋白
细胞增殖
成纤维分化
成骨分化
再生修复
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Keywords
mechano⁃growth factor
periodontal membrane
periodontal ligament stem cells
periodontal liga⁃ment fibroblasts
Yes⁃associated protein
phosphorylation⁃Yes⁃associated protein
cell proliferation
fibrogene⁃sis
osteogenic differentiation
regeneration and repair
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分类号
R78
[医药卫生—口腔医学]
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