RGD功能化多肽纳米纤维的制备及其体内肿瘤靶向性研究 被引量：3

1

作者 杨翠红 张玉民 +3 位作者 刘金剑 刘鉴峰 吴红英 褚丽萍 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期5-8,共4页

目的制备肿瘤靶向RGD多肽纳米纤维,研究其体内分布和肿瘤靶向性。方法通过多肽固相合成法制备靶向多肽Nap-GFFYGRGD(RGD-肽)和对照多肽Nap-GFFYGRGE(RGE-肽),利用核磁和质谱对多肽的分子结构进行表征。多肽溶液经煮沸后冷却可自组装形... 目的制备肿瘤靶向RGD多肽纳米纤维,研究其体内分布和肿瘤靶向性。方法通过多肽固相合成法制备靶向多肽Nap-GFFYGRGD(RGD-肽)和对照多肽Nap-GFFYGRGE(RGE-肽),利用核磁和质谱对多肽的分子结构进行表征。多肽溶液经煮沸后冷却可自组装形成纳米纤维(RGD-纤维和RGE-纤维),通过透射电镜(TEM)对纳米纤维的微观形貌进行观察。采用氯胺-T法对多肽进行125I标记,利用放射性HPLC对标记多肽进行分离纯化。建立BALB/c小鼠皮下乳腺癌肿瘤模型,125I标记的多肽自组装形成纳米纤维后经尾静脉注射,分别于注射后1、3、6、12 h进行眼球取血并处死小鼠,取肿瘤、心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉和脑等,用γ计数仪测量各组织放射性信号强度。结果 RGD-肽和RGE-肽均可自组装形成直径约为10~20 nm的纳米纤维。RGD-纤维和RGE-纤维在注射后各个时间点在体内主要脏器的分布规律相似,主要分布于胃中,其次是肠。但2者在肿瘤组织的分布规律存在显著性差异,RGD-纤维注射后6 h内在肿瘤组织中呈现出一个逐渐积累的过程,而RGE-纤维在3 h时达最高浓度,在6 h 2者差异达到最大,分别为6.25%ID/g和2.79%ID/g(P<0.01)。结论肿瘤靶向肽RGD能明显提高多肽纳米纤维在体内的肿瘤靶向分布,为该载体作为抗肿瘤药物载体用于肿瘤靶向治疗提供了强有力的数据支持。 展开更多

关键词 RGD 同位素标记 肿瘤靶向 多肽纳米纤维

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氨基酸构型对多肽纳米纤维体内分布的影响

2

作者 徐宏艳 张玉民 +5 位作者 杨翠红 刘金剑 褚丽萍 闫玉军 刘鉴峰 宋娜玲 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第2期143-147,共5页

目的比较由L构型和D构型氨基酸自组装形成的纳米纤维在体内分布的差异,为不同构型氨基酸自组装纳米多肽的体内应用提供指导。方法固相合成法合成多肽Nap-GFFYGRGD(L-肽)和Nap-GDFDFDYGRGD(D-肽),利用核磁和质谱对多肽分子进行结构表征... 目的比较由L构型和D构型氨基酸自组装形成的纳米纤维在体内分布的差异,为不同构型氨基酸自组装纳米多肽的体内应用提供指导。方法固相合成法合成多肽Nap-GFFYGRGD(L-肽)和Nap-GDFDFDYGRGD(D-肽),利用核磁和质谱对多肽分子进行结构表征。多肽溶液通过煮沸、冷却、自组装形成纳米纤维(L-纤维和D-纤维),透射电镜观察纳米纤维的微观形貌。125I标记多肽分子后,由其自组装形成的纳米纤维通过尾静脉注射入小鼠体内,分别在1、3、6和12 h采血并处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉、脑等主要器官,用γ计数仪测量其放射性强度。结果 L-肽和D-肽均可自组装形成纳米纤维,纤维直径约为10～20 nm,且两者微观形貌无明显差异。两种纳米纤维在体内的分布差异有统计学意义。D-纤维在注射后1 h的血液浓度为(8.17±0.32)%ID/g,但较迅速地从血液中清除;L-纤维浓度为(5.96±0.30)%ID/g,在注射后6 h基本保持不变。D-纤维主要分布于肝中而L纤维主要分布在胃中。结论氨基酸构型(D/L)对多肽纳米纤维在体内的分布影响显著,在未来的医学应用中考虑氨基酸构型对体内分布的影响有可能更好地指导多肽纳米纤维的应用。 展开更多

关键词 肽类 氨基酸序列 同位素标记 组织分布 多肽纳米纤维

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自组装多肽纳米纤维支架的结构特点及应用优势 被引量：6

3

作者 元亮亮 梁鹏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第29期5379-5386,共8页

背景:3D自组装肽纳米纤维凝胶支架能很好模拟体内的微环境,提供一种能促进细胞生长、改善细胞功能、具有合理构成细胞外基质的结构模式。目的:综述自组装多肽纳米纤维支架的基础研究及其在神经组织工程中的研究现状。方法:检索2000至201... 背景:3D自组装肽纳米纤维凝胶支架能很好模拟体内的微环境,提供一种能促进细胞生长、改善细胞功能、具有合理构成细胞外基质的结构模式。目的:综述自组装多肽纳米纤维支架的基础研究及其在神经组织工程中的研究现状。方法:检索2000至2013年PubMed数据库、维普数据库有关自组装多肽纳米纤维支架研究进展的文献,关键词为"自组装多肽,纳米纤维支架,神经组织工程,神经干细胞;self-assembling peptide,nanofiber scaffold,RADA16,Nerve tissue engineering,Neural stem cell"。结果与结论:自组装多肽纳米纤维支架作为新型组织工程支架材料不仅解决了材料与细胞相容性差的问题,而且在维持材料的三维特性、促进细胞活性、模仿细胞外基质等方面均优于其他支架材料,是一种理想的组织工程材料,为神经损伤修复研究提供了新的方法。但自组装多肽领域内仍面临一些挑战,短期的问题包括自组装多肽与新型生物高分子的整合,以及与相对成熟传统移植物的整合;长期问题涉及如何更好地应对体内免疫系统,如何对细胞内的靶点进行治疗,以及如何预测未来高整合支架的发展方向等。 展开更多

关键词 生物材料 生物材料综述 神经组织工程 再生医学 自组装多肽纳米纤维 神经干细胞 凝胶支架

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自组装多肽纳米凝胶支架三维培养前软骨干细胞的实验研究 被引量：5

4

作者 罗文 范建楠 叶川 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1505-1511,共7页

目的构建新型自组装多肽纳米凝胶支架RGDmx,探讨支架的细胞相容性及其对前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs)增殖和向软骨细胞方向分化的影响。方法取新生SD大鼠四肢长骨干骺端组织分离培养PSCs,采用免疫磁珠分选系统分选... 目的构建新型自组装多肽纳米凝胶支架RGDmx,探讨支架的细胞相容性及其对前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs)增殖和向软骨细胞方向分化的影响。方法取新生SD大鼠四肢长骨干骺端组织分离培养PSCs,采用免疫磁珠分选系统分选纯化原代细胞,并进行鉴定。取KLD-12、KLD-12-PRG多肽冻干粉,以体积比1∶1复合构建RGDmx。将纯化后的第3代PSCs接种至KLD-12(对照组)和RGDmx(实验组)培养,1、3、7、14 d用细胞计数(cell counting kit,CCK)-8法检测支架细胞增殖-毒性;制备不同混合比(0、20%、40%、60%、80%、100%)RGDmx,观察其对PSCs增殖的影响;采用无血清软骨形成培养液(complete chondrogenic medium,CCM)诱导两组支架内PSCs向软骨细胞方向分化,培养14 d时行甲苯胺蓝染色法鉴定,并用RT-PCR法检测两组软骨分化特异性基因Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达情况。结果成功分离纯化获得成纤维细胞生长因子受体3表达阳性细胞,免疫组织化学染色及免疫荧光染色鉴定为PSCs。CCK-8检测结果显示,复合培养后实验组细胞吸光度(A)值随培养时间延长逐步提高,7 d达峰值;其中7、14 d时细胞A值高于对照组(P<0.05);复合培养7 d时,混合比为40%组细胞A值较其他混合比组高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCM诱导培养14 d时,两组支架内细胞甲苯胺蓝染色均呈阳性;RT-PCR检测示实验组细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自组装多肽纳米凝胶支架RGDmx具有良好的细胞相容性,可有效促进PSCs增殖及向软骨细胞方向分化,是组织工程较理想的细胞载体系统。 展开更多

关键词 组织工程支架 自组装多肽纳米凝胶支架 前软骨干细胞 关节软骨缺损修复

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自组装肽纳米纤维支架用于骨修复的研究进展 被引量：2

5

作者 何彬 袁霄 +1 位作者 张华 蒋电明 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1303-1306,共4页

目的对自组装肽纳米纤维支架的生物学特性及用于骨修复的研究进展进行综述。方法广泛查阅近年国内外有关自组装肽纳米纤维支架和骨修复研究的文献,并进行综合分析和总结。结果自组装肽纳米纤维支架由氨基酸构成,具有良好的生物相容性,... 目的对自组装肽纳米纤维支架的生物学特性及用于骨修复的研究进展进行综述。方法广泛查阅近年国内外有关自组装肽纳米纤维支架和骨修复研究的文献,并进行综合分析和总结。结果自组装肽纳米纤维支架由氨基酸构成,具有良好的生物相容性,其降解产物无毒性。自组装肽纳米纤维形成的微环境与细胞外基质高度相似,且生长因子的控释和功能基序的修饰显著提高了该材料的生物活性。大量体外细胞复合培养及动物体内骨缺损修复实验结果显示,该支架可促进细胞的黏附、增殖和分化,且有利于体内新骨组织形成。结论自组装肽纳米纤维支架有望成为理想的骨修复材料,但其生物力学性能有待进一步提高。 展开更多

关键词 分子自组装 自组装肽纳米纤维支架 骨修复

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自组装多肽纳米纤维材料在神经组织工程中的应用 被引量：2

6

作者 王佰川 邵增务 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期861-863,共3页

目的综述自组装多肽纳米纤维材料(self-assembling peptide nanofiber scaffold,SAPNS)的基础研究及其在神经组织工程中的研究现状。方法广泛查阅近期国内外SAPNS研究的相关文献,并进行回顾和综合分析。结果SAPNS可促进神经干细胞的黏... 目的综述自组装多肽纳米纤维材料(self-assembling peptide nanofiber scaffold,SAPNS)的基础研究及其在神经组织工程中的研究现状。方法广泛查阅近期国内外SAPNS研究的相关文献,并进行回顾和综合分析。结果SAPNS可促进神经干细胞的黏附、增殖和分化以及神经元轴突向外生长和延伸,促进ECM的合成并能抑制神经胶质细胞的黏附和分化,很好地模拟了细胞在体内的生长环境。结论SAPNS是一种理想的基质材料,为损伤神经组织的修复提供了新的方法。 展开更多

关键词 神经组织工程 自组装多肽纳米纤维 神经干细胞 修复

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自组装肽纳米纤维支架及其在组织工程的应用 被引量：1

7

作者 苏仲春 王圳 +1 位作者 陈晓韵 王跃春 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第8期971-973,共3页

自组装肽纳米纤维支架(SAPNS)是近年来被广泛研究的一种生物支架材料,其在三维细胞培养、组织修复与再生等领域得到了越来越多的应用。本综述在介绍SAPNS研究现状的基础上,按外、中、内3个胚层来源组织的顺序阐述了SAPNS在组织工程中的... 自组装肽纳米纤维支架(SAPNS)是近年来被广泛研究的一种生物支架材料,其在三维细胞培养、组织修复与再生等领域得到了越来越多的应用。本综述在介绍SAPNS研究现状的基础上,按外、中、内3个胚层来源组织的顺序阐述了SAPNS在组织工程中的应用进展、存在问题及展望。 展开更多

关键词 自组装多肽纳米纤维支架 组织工程 应用

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脂肪间充质干细胞在功能化自组装纳米多肽水凝胶三维培养下旁分泌的研究 被引量：1

8

作者 凌建民 田爱玲 +5 位作者 范鲁峰 邵闻冲 武涵 焦阳 胡三元 孙念峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期250-252,共3页

目的探讨脂肪间充质干细胞（ADMSCs）在自组装纳米多肽水凝胶介导的三维培养条件下旁分泌促血管生成激素及其影响因素。方法分离、培养人ADMSCs，并合成RADAI-16、RGD、KLT 3种多肽且按体积比2∶1∶1制备RADAI-16∶KLT∶RGD多肽混合溶... 目的探讨脂肪间充质干细胞（ADMSCs）在自组装纳米多肽水凝胶介导的三维培养条件下旁分泌促血管生成激素及其影响因素。方法分离、培养人ADMSCs，并合成RADAI-16、RGD、KLT 3种多肽且按体积比2∶1∶1制备RADAI-16∶KLT∶RGD多肽混合溶液，原子力显微镜（AFM）下观察多肽水凝胶形态（n＝4）。使用水凝胶对ADMSCs进行三维培养，并设置ADMSCs普通培养组（37 ℃、5%CO2细胞培养箱）和缺氧培养组（37 ℃、10%CO2、1%O2乏氧培养箱）作为对照。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清内血管内皮生长因子（VEGF）（n＝3）、肝细胞生长因子（HGF）（n＝3）浓度；Western blot检测细胞内血红素氧合酶-1（HO-1）（n＝3）的表达。结果分离培养的ADMSCs为长梭形，呈＂漩涡式＂生长。RADA16-I、RGD、KLT及自组装多肽溶液在AFM下均为纳米纤维状，直径10～20 nm，长度100～500 nm。ELISA法测得普通培养1 d、缺氧培养1 d及三维培养1 d后细胞培养上清中HGF浓度分别为（47.31±6.75）、（247.86±17.59）、（297.25±17.95） ng/L；VEGF浓度分别为（218.30±3.03）、（267.13±4.27）、（289.14±3.11） ng/L，缺氧及三维培养条件下细胞旁分泌HGF、VEGF均增高，但三维培养条件下增高更明显（P＝0.000）。Western blot结果显示三维培养组细胞内HO-1的表达量约为普通培养组2倍（P＝0.000），为缺氧培养组1.2倍（P＝0.033）。结论功能性自组装纳米多肽水凝胶介导ADMSCs的三维培养能明显促进其旁分泌作用，且缺氧是其重要影响因素之一。 展开更多

关键词 脂肪间充质干细胞 三维培养 功能性自组装纳米多肽 旁分泌 缺氧

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自聚肽纳米纤维支架承载骨髓源性心肌干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究 被引量：2

9

作者 崔晓军 谭玉珍 +4 位作者 谢华 国海东 王存 张剑凯 郭金华 《生物医学工程与临床》 CAS 2011年第4期303-307,F0003,共6页

目的探讨自聚肽纳米纤维支架承载骨髓源性心肌干细胞(MCSC)移植对大鼠心肌梗死后心功能恢复的影响,寻找一种更适合承载心肌干细胞治疗心肌梗死的可注射性生物材料。方法通过单细胞克隆培养技术,从骨髓间充质干细胞中筛选具有心肌特异分... 目的探讨自聚肽纳米纤维支架承载骨髓源性心肌干细胞(MCSC)移植对大鼠心肌梗死后心功能恢复的影响,寻找一种更适合承载心肌干细胞治疗心肌梗死的可注射性生物材料。方法通过单细胞克隆培养技术,从骨髓间充质干细胞中筛选具有心肌特异分化潜能的MCSC,固相合成自聚多肽。将雌性大鼠心肌梗死模型随机分为3组:对照组、MCSC移植组、支架承载MCSC移植组。细胞移植后4周,用M型超声心动图检测心功能恢复情况;对心脏组织切片进行Masson染色,利用图像分析检测胶原纤维比率;用原位荧光杂交法标记心肌组织中Y染色体细胞,并检测其心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果支架承载MCSC移植组与MCSC移植组相比,大鼠的心功能指数明显提高,胶原纤维比率明显减小,Y染色体阳性细胞数明显增多,差异均具有统计学意义。结论支架承载MCSC移植治疗心肌梗死,有利于移植细胞在受损心肌内的存活和向功能性心肌分化,并促进心功能恢复,其疗效优于单纯干细胞移植。 展开更多

关键词 自聚肽纳米纤维支架 骨髓源性心肌干细胞 心肌梗死 移植

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自聚肽纳米纤维支架对骨髓源性心肌干细胞的作用研究 被引量：1

10

作者 崔晓军 谭玉珍 +3 位作者 李少华 国海东 王存 张剑凯 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2011年第4期428-432,共5页

目的研究白聚肽纳米纤维支架对骨髓源性心肌干细胞（MCSCs）生长和存活的作用。方法设计和同相合成自聚肽，扫描电镜和原子力显微镜下观察其白组装后的形态结构和与MCSCs的相互关系；通过CCK-8法和免疫荧光染色检测纳米纤维支架对MCSCs... 目的研究白聚肽纳米纤维支架对骨髓源性心肌干细胞（MCSCs）生长和存活的作用。方法设计和同相合成自聚肽，扫描电镜和原子力显微镜下观察其白组装后的形态结构和与MCSCs的相互关系；通过CCK-8法和免疫荧光染色检测纳米纤维支架对MCSCs增殖和分化情况。结果1％多肽溶液自组装成直径约10nm，长度为100～300nm纳米纤维，并相互交织成孔径为50～200nm的网状结构；MCSCs在纤维支架中培养1d后，可见细胞呈长梭形，位于三维纳米纤维支架的网孔中，生长状态良好；生长曲线显示细胞在纤维支架中的增殖能力明显高于对照组；MCSCs在纤维支架中诱导培养4周时，形态和排列方式均发生明显改变。结论纤维支架与MCSCs有良好生物相容性，纤维支架有利于MCSCs的生长和定向分化。 展开更多

关键词 自聚肽纳米纤维支架 骨髓源性心肌干细胞 生物相容性 分化

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自组装多肽纳米纤维支架诱导骨髓间充质干细胞定向分化 被引量：1

11

作者 何丁文 徐艳杰 +1 位作者 廖新根 殷明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期100-106,共7页

组织工程是现代修复重建医学领域的新思路,生物支架和种子细胞是组织工程两大关键要素。自组装多肽纳米纤维支架(SAPNS)是两亲性多肽(PAs)分子在一定条件下自组装成的一类具有三维网状结构的新型生物支架,其结构、生物功能、机械力学等... 组织工程是现代修复重建医学领域的新思路,生物支架和种子细胞是组织工程两大关键要素。自组装多肽纳米纤维支架(SAPNS)是两亲性多肽(PAs)分子在一定条件下自组装成的一类具有三维网状结构的新型生物支架,其结构、生物功能、机械力学等特性类似天然细胞外基质(ECM),其内部经功能化修饰的抗原表位以高浓度呈递在纳米纤维表面并高效选择性地调控种子细胞生物学行为。种子细胞是组织成功再生的必需条件,骨髓间充质干细胞(BMSCs)因其良好的自我更新和多向分化潜能成为了组织工程最佳候选细胞。体外实验表明经特异功能化修饰的SAPNS在有/无辅助因子条件下可促进BMSCs黏附、增殖、迁移和定向分化,动物模型体内实验发现SAPNS结合BMSCs构建的组织工程移植物可修复缺损部位的组织结构和功能,故其在修复重建医学中有良好的应用前景。对SAPNS、自组装、BMSCs、SAPNS诱导BMSCs定向分化等方面进行了综述。 展开更多

关键词 自组装多肽纳米纤维支架 自组装BMSCs定向分化

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