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β-氨基丁酸诱导烟草产生PR蛋白及对TMV的抑制作用
被引量:
10
1
作者
何永明
丁秀英
+3 位作者
丛林晔
郭光
陈淑君
张军
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期271-277,共7页
本文研究了β-氨基丁酸(BABA)诱导系统侵染寄主烟草NC89产生PR蛋白及其对TMV的抑制作用。用5mmol/LBABA对抗性烟和非抗性烟进行叶面喷施处理均可以抑制烟草叶片中TMV的产生,平均抑制率分别达到59%和49%。BABA和SA处理均可以诱导2种烟草...
本文研究了β-氨基丁酸(BABA)诱导系统侵染寄主烟草NC89产生PR蛋白及其对TMV的抑制作用。用5mmol/LBABA对抗性烟和非抗性烟进行叶面喷施处理均可以抑制烟草叶片中TMV的产生,平均抑制率分别达到59%和49%。BABA和SA处理均可以诱导2种烟草叶片中PR1、PR2和PR5基因的表达,其中对PR1的诱导作用相对较强。分别用BABA和SA处理非抗性烟草,在处理后的不同时间内2种药剂对PR1基因的诱导规律基本相同。用BABA和SA分别预处理非抗性烟草2d后接种TMV,2种药剂对烟草叶片中PR1基因的影响是完全不同的,其中,BABA处理后接种TMV抑制PR1基因的表达,在接种后第72h已经检测不到PR1基因的存在,SA处理后接种TMV对PR1基因的影响呈现弱-强-弱的变化趋势,在接种后第24hPR1的表达量达到最强,以后逐渐减弱。试验结果表明:BABA能够提高非抗性烟草对TMV的抗性,但是BABA诱导烟草产生抗TMV的作用机制可能是一种不同于目前普遍公认的SA的作用机制。
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关键词
β-氨基丁酸(BABA)
烟草花叶病毒(TMV)
诱导抗性
病原相关蛋白(
pr
)
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职称材料
小麦PR-1、PR-2、PR-5基因的白粉菌和水杨酸诱导表达分析及白粉病抗性研究(英文)
被引量:
27
2
作者
牛吉山
刘瑞
郑磊
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1132-1137,共6页
病程相关蛋白基因PR-1、PR-2和PR-5是植物抗病基因介导的抗病反应和系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中的标志基因。为了研究病程相关蛋白基因和水杨酸在小麦(TriticumaestivumL.)抗白粉病反应中所起的作用,以抗白粉病...
病程相关蛋白基因PR-1、PR-2和PR-5是植物抗病基因介导的抗病反应和系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中的标志基因。为了研究病程相关蛋白基因和水杨酸在小麦(TriticumaestivumL.)抗白粉病反应中所起的作用,以抗白粉病和感白粉病小麦品系为材料,在白粉病菌(Blumeria graminisf.sp.tritici,Bgt)诱导不同时间,或水杨酸处理不同时间后,用半定量RT-PCR技术检测了小麦叶片中PR-1、PR-2和PR-5基因的表达变化。结果表明,白粉病菌的侵染激活和显著增强了病程相关蛋白基因PR-1、PR-2和PR-5在周麦18中的转录。与感病品系相比,PR-1和PR-5在抗病品系中转录激活得更快、更强。水杨酸处理显著激活了PR-1和PR-5的转录,但对PR-2的转录影响不大。白粉病菌和水杨酸均能显著激活和增强PR-1和PR-5的表达,但白粉病菌的作用更强,说明PR-1和PR-5基因在小麦抗白粉病反应中起重要作用。PR-1和PR-5可以作为小麦SAR的标志基因。水杨酸处理后周麦18和中国春的白粉病抗性得到提高,提示水杨酸在小麦抗白粉病信号传导途径中起一定作用。
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关键词
小麦
白粉病
水杨酸
病程相关蛋白基因的表达
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职称材料
巴西橡胶树病程相关蛋白基因(HbPR1)的克隆及分析
被引量:
4
3
作者
罗红丽
秦云霞
+1 位作者
闫志烨
向鹏
《热带作物学报》
CSCD
2011年第8期1499-1502,共4页
利用同源克隆技术,在前期课题组对橡胶树转录组进行测序的基础上,根据模式植物中PR1蛋白的氨基酸序列进行同源搜索并设计引物,通过RT-PCR方法扩增巴西橡胶树PR1同源基因的cDNA片段,命名为HbPR1。该片段包含一个450 bp的开放阅读框,编码...
利用同源克隆技术,在前期课题组对橡胶树转录组进行测序的基础上,根据模式植物中PR1蛋白的氨基酸序列进行同源搜索并设计引物,通过RT-PCR方法扩增巴西橡胶树PR1同源基因的cDNA片段,命名为HbPR1。该片段包含一个450 bp的开放阅读框,编码150个氨基酸的多肽。生物信息学分析结果表明,该氨基酸序列与杨树(Populus tomentosa)、葡萄(Vitis vinifera)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的PR1蛋白高度同源,同源性分别为76%,74%和72%,并含有SCP_PR1_like结构域。半定量分析结果表明,该基因表达受水杨酸的诱导。以上结果暗示该基因为橡胶树的PR1同源基因,可作为橡胶树系统获得性抗性产生的标签基因。
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关键词
巴西橡胶树
系统获得性抗性
病程相关蛋白1(
pr
1)
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职称材料
新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定
被引量:
2
4
作者
宁秀哲
寇志华
+7 位作者
孙维来
朱青
杨裔
邱洪杰
郭晶晶
郭彦
于虹
周育森
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期294-299,共6页
目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生...
目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株,经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1,采用ELISA法筛选阳性菌株后,SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确;重组蛋白以分泌形式表达,相对分子质量约16&#215;103。结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白,为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。
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关键词
佐剂
致病相关蛋白
毕赤酵母系统
分泌表达
pathogenesis
related
protein
1
(
pr
-1)
原文传递
病程相关蛋白-1a多克隆抗体的制备与应用
5
作者
陈卓
刘开兴
+5 位作者
刘家驹
王贞超
毕亮
李向阳
杨松
宋宝安
《中国农学通报》
CSCD
2012年第21期174-182,共9页
为获得效价高和选择性强的PR-1a抗体。根据NCBI GenBank中普通烟PR-1a一级结构信息,采用Blastn、Blastx和Expasy等软件进行序列同源性分析,获得1段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得目的多肽,采用HPLC和LC-MS测定目的多肽...
为获得效价高和选择性强的PR-1a抗体。根据NCBI GenBank中普通烟PR-1a一级结构信息,采用Blastn、Blastx和Expasy等软件进行序列同源性分析,获得1段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得目的多肽,采用HPLC和LC-MS测定目的多肽的浓度和分子量。结果表明:目的多肽纯度达93.92%、分子量为2088.17;采用碳化二亚胺法制备获得Pep-KLH,并通过免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,采用间接-ELISA和Western blotting测定其抗体效价和特异性,结果表明:抗血清在1:32000条件下,抗血清的吸光值(OD)约为1.0;经Westernblotting试验表明:抗血清和多克隆抗体可特异性识别烟草叶片组织内的PR-1a;同时,试验采用系统性获得性的免疫激活剂-BTH作用普通烟K-326,对作用后的0、6、12、24、48、76、144、96h的烟草叶片总蛋白进行间接-ELISA,发现:BTH作用普通烟K-326144h后,PR-1a蛋白表达呈上调趋势;同时采用半定量RT-PCR试验也同样证实了BTH可诱导PR-1a基因表达上调,其表达上调趋势与间接-ELISA的研究结果相似。表明采用该方法制备的PR-1a多肽抗体具有较高的特异性和灵敏度,可用于免疫诱导剂等方面的研究。
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关键词
病程相关蛋白-1a
序列分析
多肽合成
多克隆抗体
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职称材料
题名
β-氨基丁酸诱导烟草产生PR蛋白及对TMV的抑制作用
被引量:
10
1
作者
何永明
丁秀英
丛林晔
郭光
陈淑君
张军
机构
中国农业大学植物生理学与生物化学国家重点实验室
北京移栽灵科技有限责任公司
中绿华夏有机食品认证中心
出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期271-277,共7页
文摘
本文研究了β-氨基丁酸(BABA)诱导系统侵染寄主烟草NC89产生PR蛋白及其对TMV的抑制作用。用5mmol/LBABA对抗性烟和非抗性烟进行叶面喷施处理均可以抑制烟草叶片中TMV的产生,平均抑制率分别达到59%和49%。BABA和SA处理均可以诱导2种烟草叶片中PR1、PR2和PR5基因的表达,其中对PR1的诱导作用相对较强。分别用BABA和SA处理非抗性烟草,在处理后的不同时间内2种药剂对PR1基因的诱导规律基本相同。用BABA和SA分别预处理非抗性烟草2d后接种TMV,2种药剂对烟草叶片中PR1基因的影响是完全不同的,其中,BABA处理后接种TMV抑制PR1基因的表达,在接种后第72h已经检测不到PR1基因的存在,SA处理后接种TMV对PR1基因的影响呈现弱-强-弱的变化趋势,在接种后第24hPR1的表达量达到最强,以后逐渐减弱。试验结果表明:BABA能够提高非抗性烟草对TMV的抗性,但是BABA诱导烟草产生抗TMV的作用机制可能是一种不同于目前普遍公认的SA的作用机制。
关键词
β-氨基丁酸(BABA)
烟草花叶病毒(TMV)
诱导抗性
病原相关蛋白(
pr
)
Keywords
β-amino-butyric
acid
(BABA)
Tobacco
mosaic
virus
(TMV)
induced-resistance
pathogenesis
-
related
protein
(
pr
)
分类号
S432.26 [农业科学—植物病理学]
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
小麦PR-1、PR-2、PR-5基因的白粉菌和水杨酸诱导表达分析及白粉病抗性研究(英文)
被引量:
27
2
作者
牛吉山
刘瑞
郑磊
机构
河南农业大学国家小麦工程技术研究中心
出处
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1132-1137,共6页
基金
This project was supported by The Innovation Fund for Outstanding Scholar of Henan Province(0621001700)
the Tackle Key Problem Project in Henan(0523010700)
The Innovation Fund of Henan Agricultural University (2006).
文摘
病程相关蛋白基因PR-1、PR-2和PR-5是植物抗病基因介导的抗病反应和系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中的标志基因。为了研究病程相关蛋白基因和水杨酸在小麦(TriticumaestivumL.)抗白粉病反应中所起的作用,以抗白粉病和感白粉病小麦品系为材料,在白粉病菌(Blumeria graminisf.sp.tritici,Bgt)诱导不同时间,或水杨酸处理不同时间后,用半定量RT-PCR技术检测了小麦叶片中PR-1、PR-2和PR-5基因的表达变化。结果表明,白粉病菌的侵染激活和显著增强了病程相关蛋白基因PR-1、PR-2和PR-5在周麦18中的转录。与感病品系相比,PR-1和PR-5在抗病品系中转录激活得更快、更强。水杨酸处理显著激活了PR-1和PR-5的转录,但对PR-2的转录影响不大。白粉病菌和水杨酸均能显著激活和增强PR-1和PR-5的表达,但白粉病菌的作用更强,说明PR-1和PR-5基因在小麦抗白粉病反应中起重要作用。PR-1和PR-5可以作为小麦SAR的标志基因。水杨酸处理后周麦18和中国春的白粉病抗性得到提高,提示水杨酸在小麦抗白粉病信号传导途径中起一定作用。
关键词
小麦
白粉病
水杨酸
病程相关蛋白基因的表达
Keywords
Wheat,Resistance
to
powdery
mildew,Salicylic
acid(SA),ex
pr
ession
of
pathogenesis
-
related
protein
gene(
pr
)
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
S435.12
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职称材料
题名
巴西橡胶树病程相关蛋白基因(HbPR1)的克隆及分析
被引量:
4
3
作者
罗红丽
秦云霞
闫志烨
向鹏
机构
海南大学海南省热带作物资源可持续利用重点实验室
中国热带农业科学院橡胶研究所
出处
《热带作物学报》
CSCD
2011年第8期1499-1502,共4页
基金
农业部橡胶树生物学重点实验室--海南省热带作物栽培生理学重点实验室开放课题项目(No.KLOF1101)
海南省自然科学基金项目(No.311030)
文摘
利用同源克隆技术,在前期课题组对橡胶树转录组进行测序的基础上,根据模式植物中PR1蛋白的氨基酸序列进行同源搜索并设计引物,通过RT-PCR方法扩增巴西橡胶树PR1同源基因的cDNA片段,命名为HbPR1。该片段包含一个450 bp的开放阅读框,编码150个氨基酸的多肽。生物信息学分析结果表明,该氨基酸序列与杨树(Populus tomentosa)、葡萄(Vitis vinifera)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的PR1蛋白高度同源,同源性分别为76%,74%和72%,并含有SCP_PR1_like结构域。半定量分析结果表明,该基因表达受水杨酸的诱导。以上结果暗示该基因为橡胶树的PR1同源基因,可作为橡胶树系统获得性抗性产生的标签基因。
关键词
巴西橡胶树
系统获得性抗性
病程相关蛋白1(
pr
1)
Keywords
Hevea
brasiliensis
System
acquired
resistance
(SAR)
pathogenesis
-
related
protein
1
(
pr
1)
分类号
S794.1 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定
被引量:
2
4
作者
宁秀哲
寇志华
孙维来
朱青
杨裔
邱洪杰
郭晶晶
郭彦
于虹
周育森
机构
生命科学学院、温州医科大学检验医学院
军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期294-299,共6页
基金
国家重点实验室基金课题(SKPBS1416)
国家传染病重大专项课题(2012ZX10004502)
文摘
目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株,经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1,采用ELISA法筛选阳性菌株后,SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确;重组蛋白以分泌形式表达,相对分子质量约16&#215;103。结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白,为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。
关键词
佐剂
致病相关蛋白
毕赤酵母系统
分泌表达
pathogenesis
related
protein
1
(
pr
-1)
Keywords
Adjuvant
pathogenesis
related
protein
1(
pr
-1
)
Pichia
pastoris
Secretory
ex
pr
ession
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
病程相关蛋白-1a多克隆抗体的制备与应用
5
作者
陈卓
刘开兴
刘家驹
王贞超
毕亮
李向阳
杨松
宋宝安
机构
贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地
贵州大学精细化工研究开发中心
出处
《中国农学通报》
CSCD
2012年第21期174-182,共9页
基金
国家重点基础研究发展"973"计划"病毒及菌害调控的候选药物与分子靶标"(2010CB-126105)
农业科技成果转化资金项目"防治稻飞虱及其传媒病毒药剂中试与转化"(2009GB2F200330)
+2 种基金
贵州省教育厅自然科学研究项目重点项目"新型抗植物病毒药物的化学生物学研究"[黔科教(2009)0132号]
贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目"新型抗植物病毒药物-病毒星与靶标分子的化学生物学研究"[黔省专合字(2009)104号]
贵州省科技厅农业攻关项目"新型氨基膦酸酯类抗病毒剂与harpin binding protein的作用机制研究"[黔科合NY字[2011]3052号]
文摘
为获得效价高和选择性强的PR-1a抗体。根据NCBI GenBank中普通烟PR-1a一级结构信息,采用Blastn、Blastx和Expasy等软件进行序列同源性分析,获得1段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得目的多肽,采用HPLC和LC-MS测定目的多肽的浓度和分子量。结果表明:目的多肽纯度达93.92%、分子量为2088.17;采用碳化二亚胺法制备获得Pep-KLH,并通过免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,采用间接-ELISA和Western blotting测定其抗体效价和特异性,结果表明:抗血清在1:32000条件下,抗血清的吸光值(OD)约为1.0;经Westernblotting试验表明:抗血清和多克隆抗体可特异性识别烟草叶片组织内的PR-1a;同时,试验采用系统性获得性的免疫激活剂-BTH作用普通烟K-326,对作用后的0、6、12、24、48、76、144、96h的烟草叶片总蛋白进行间接-ELISA,发现:BTH作用普通烟K-326144h后,PR-1a蛋白表达呈上调趋势;同时采用半定量RT-PCR试验也同样证实了BTH可诱导PR-1a基因表达上调,其表达上调趋势与间接-ELISA的研究结果相似。表明采用该方法制备的PR-1a多肽抗体具有较高的特异性和灵敏度,可用于免疫诱导剂等方面的研究。
关键词
病程相关蛋白-1a
序列分析
多肽合成
多克隆抗体
Keywords
pathogenesis
related
protein
-la
(
pr
-la)
sequence
analysis
polypeptide
synthetizing
polyclonal
antibody
分类号
S1 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
β-氨基丁酸诱导烟草产生PR蛋白及对TMV的抑制作用
何永明
丁秀英
丛林晔
郭光
陈淑君
张军
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
10
下载PDF
职称材料
2
小麦PR-1、PR-2、PR-5基因的白粉菌和水杨酸诱导表达分析及白粉病抗性研究(英文)
牛吉山
刘瑞
郑磊
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
27
下载PDF
职称材料
3
巴西橡胶树病程相关蛋白基因(HbPR1)的克隆及分析
罗红丽
秦云霞
闫志烨
向鹏
《热带作物学报》
CSCD
2011
4
下载PDF
职称材料
4
新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定
宁秀哲
寇志华
孙维来
朱青
杨裔
邱洪杰
郭晶晶
郭彦
于虹
周育森
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
原文传递
5
病程相关蛋白-1a多克隆抗体的制备与应用
陈卓
刘开兴
刘家驹
王贞超
毕亮
李向阳
杨松
宋宝安
《中国农学通报》
CSCD
2012
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