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番木瓜环斑病毒PCR检测技术研究 被引量:23
1
作者 肖火根 胡晋生 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2000年第4期367-372,共6页
建立了检测番木瓜环斑病毒 (PRV)的免疫捕捉 PCR (IC PCR)法、ELISA PCR法和巢式 PCR法 ,它们分别能从 10 - 4、10 - 7和 10 - 14 稀释度的番木瓜叶粗汁液 (所含鲜叶组织的量分别 0 .5ug、0 .5ng和 5× 10 - 6ng)中检测出PRV。
关键词 番木瓜环斑病毒 免疫捕捉-PCR法 检测技术
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华南地区番木瓜环斑病毒和畸型花叶病毒调查鉴定研究 被引量:10
2
作者 肖火根 真冈哲夫 骆学海 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期52-53,共2页
调查鉴定了广州、南宁、厦门和福州市番木瓜病毒病病原种类,发现都是由番木瓜环斑病毒引起的,未发现番木瓜畸型花叶病毒。
关键词 番木瓜 环斑病毒 畸型花叶病毒 病毒病
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番木瓜环斑病毒融合基因植物表达载体的构建 被引量:14
3
作者 饶雪琴 李华平 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期325-329,共5页
利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了... 利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进,并对改进的SOE的反应体系进行了优化,其中以Py-robestDNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因VY构建在植物表达载体pCAMBIA2300上,测序结果表明,该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建,可为进一步获得对PRSV广谱抗性的转基因番木瓜奠定基础。 展开更多
关键词 番木瓜 番木瓜环斑病毒 PCR融合基因 SOE法
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转基因番木瓜抗病性测定和纯合系的获得 被引量:9
4
作者 冯黎霞 阮小蕾 +2 位作者 周国辉 张曙光 李华平 《仲恺农业技术学院学报》 CAS 2005年第4期12-15,20,共5页
分别对转番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)复制酶基因(Trp)的T3、T4代番木瓜(Carica pa-payaL.)品系在苗期进行攻毒试验和PCR分子生物学分析.结果表明,在苗期T3、T4代分子检测阳性株均高抗PRSV的Ys株系,证实Trp基因能够在后... 分别对转番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)复制酶基因(Trp)的T3、T4代番木瓜(Carica pa-payaL.)品系在苗期进行攻毒试验和PCR分子生物学分析.结果表明,在苗期T3、T4代分子检测阳性株均高抗PRSV的Ys株系,证实Trp基因能够在后代中稳定遗传.除品系Trp-6-2外,其它所有T3、T4代自交植株仍有基因分离.Trp-6-2的自交株和其T4杂交后代,苗期攻毒试验均表现抗病,PCR检测复制酶基因均为阳性,所转基因没有发生分离,可以初步推定Trp-6-2为转基因的纯合系.大田病情调查结果表明,T3代在定植田间的前5个月内,转基因植株均高抗PRSV.但在定植5个月后发现一个转基因品系38株中有3株表现发病. 展开更多
关键词 番木瓜(Carica papaya L.) 番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus PRSV) 转基因 抗病性测定
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水杨酸对番木瓜环斑病的防治效果 被引量:11
5
作者 张荣萍 麻利豪 +3 位作者 王鹏 刘亚文 张观国 胡宗渊 《热带农业科学》 2007年第6期20-22,共3页
研究了水杨酸对番木瓜环斑病的防治效果。结果显示:水杨酸能有效防治番木瓜环斑病,其中以50mg/L的防治效果最好,平均防效达到70%以上;水杨酸对索罗番木瓜品种比对马来西亚番木瓜品种的环斑病防治效果更好;喷施水杨酸比灌施水杨酸的防治... 研究了水杨酸对番木瓜环斑病的防治效果。结果显示:水杨酸能有效防治番木瓜环斑病,其中以50mg/L的防治效果最好,平均防效达到70%以上;水杨酸对索罗番木瓜品种比对马来西亚番木瓜品种的环斑病防治效果更好;喷施水杨酸比灌施水杨酸的防治效果好。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病 水杨酸 品种 浓度 效果
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基于外壳蛋白基因序列对3种葫芦科作物病毒的分子分析 被引量:10
6
作者 古勤生 田延平 +4 位作者 彭斌 刘丽锋 邓丛良 粱新苗 孟娟 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期357-363,共7页
从山西运城的南瓜(Cucurbita moschata)、河南开封和孟津的西葫芦(Cucurbita pepo)上通过ELISA分别检测到南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)和番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papa-ya ringsp... 从山西运城的南瓜(Cucurbita moschata)、河南开封和孟津的西葫芦(Cucurbita pepo)上通过ELISA分别检测到南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)和番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papa-ya ringspot virus-Watermelon type,PRSV-W),通过接种分离纯化获得其病毒毒原(CH99/211,CH99/113,CH99/69)。本研究克隆了这3个分离物的外壳蛋白基因,应用DNAStar、Clustal X、Phylip等分析软件将这些序列同已报道的相应序列进行分析并构建系统树。结果发现SqMV可以分为两个组,CH99/211分离物与美国的Arizona分离物接近,应属于Z组;WMV分为两个组,CH99/69同国内黑龙江分离物(WMV-HLJ)和云南分离物(WMV-CHN)最接近,成一小簇;PRSV分成两个组,CH99/113属于Ⅱ组,与国内SP、MZ和BN分离物接近。序列分析表明PRSV和WMV在进化上具有地理相关性。SqMV和PRSV-W外壳蛋白基因序列分析属国内首次报道。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 西瓜花叶病毒 南瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 分子分析
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dsRNA介导的番木瓜环斑病毒(PRSV)的抗病性研究 被引量:10
7
作者 张帆 姜玲 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期385-391,共7页
以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotiana tabacum)及PRSV寄主植物番木瓜(CaricapapayaL.)作为试验材料,开展了番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因dsRNA介导的PRSV病原抗性的研究。利用农杆菌介导法将番木瓜环斑病毒外... 以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotiana tabacum)及PRSV寄主植物番木瓜(CaricapapayaL.)作为试验材料,开展了番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因dsRNA介导的PRSV病原抗性的研究。利用农杆菌介导法将番木瓜环斑病毒外壳蛋白CP基因反向重复表达载体pHellsgate12-CPIR(简称PHG12-CPIR)分别转化到烟草和拟南芥中,获得阳性植株,并利用渗透法和农杆菌介导的瞬时表达体系将pHG12-CPIR载体导入到番木瓜中。对转基因植株进行攻毒试验并分析了其抗病性。在接种3~7d内,在拟南芥和番木瓜上转基因植株的发病情况较轻,而野生型植株叶片与转基因植株相比,均表现出不同程度的黄化、皱缩和枯斑等症状。在接种PRSV后,番木瓜和拟南芥转化植株表现症状的叶片的比例与对照相比,结果显著低于对照,而在烟草植株上症状表现的差异不明显。在3种植物上RT-PCR检测结果显示,在接种番木瓜环斑病毒PRSV后,野生型植株中有高浓度的病毒积累,而转pHG12-CPIR基因植株中几乎没有病毒积累,推测转pHG12-CPIR基因植株中瞬时表达系统已启动RNAi机制抑制了CP基因的表达。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 CP基因 番木瓜 RNAi 抗病性 渗透法
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番木瓜环斑病毒复制酶基因的克隆和序列分析 被引量:8
8
作者 叶长明 陈谷 +2 位作者 黄俊潮 于湄 李宝健 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第6期125-127,共3页
用RT-PCR技术从PRV-AL中分离到复制酶(RP)基因,将基因克隆进载体pUC18,用双脱氧链终止法测定了基因序列,表明其全长为1602bp,与国内外报道的HA5-1、YK和Sm的RP基因相比,同源性分别达82.... 用RT-PCR技术从PRV-AL中分离到复制酶(RP)基因,将基因克隆进载体pUC18,用双脱氧链终止法测定了基因序列,表明其全长为1602bp,与国内外报道的HA5-1、YK和Sm的RP基因相比,同源性分别达82.80%,95.07%和91.83%. 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 复制酶 基因 无性系 序列分析
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番木瓜环斑病毒畸叶株系的CP基因克隆和序列分析 被引量:6
9
作者 贺国安 肖火根 +2 位作者 张曙光 李华平 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2001年第4期369-372,共4页
采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt... 采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt,推导其编码 2 87个氨基酸。与番木瓜环斑病毒 (PRSV)美国夏威夷HA株系和澳大利亚W株系的CP基因相比 ,在第 6 6nt处开始连续缺失 3个核苷酸。与PRSV的华南Ys、Sm和G株系以及夏威夷的HA和澳大利亚的W株系相比 ,其CP基因序列同源率分别为 96 %、98%、95 %、89%和 89%。其推导的氨基酸序列同源率分别为 98%、97%、97%、96 %和 95 %。此结果表明 ,PMaLV属于PRSV的一个株系 ,不是一种新病毒。因此 ,我们称其为番木瓜环斑病毒畸叶株系 (ML株系 )。 展开更多
关键词 番木瓜畸叶病毒 番木瓜环斑病毒 番木瓜环斑病毒畸叶株系 CP基因克隆 序列分析
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番木瓜环斑病的空间分布及流行动态模糊聚类分析 被引量:9
10
作者 张德雍 王振中 范怀忠 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1995年第4期27-31,共5页
以病样方率、平均样方病株数、扩散系数和聚块性指标等多数分析了番木瓜环斑病病株的田间分布类型,并利用模糊聚类方法初步探讨了此病的流行特征。结果表明病株在田间的分布随着时间的发展而变化。在流行初期,病株呈随机分布,随后呈... 以病样方率、平均样方病株数、扩散系数和聚块性指标等多数分析了番木瓜环斑病病株的田间分布类型,并利用模糊聚类方法初步探讨了此病的流行特征。结果表明病株在田间的分布随着时间的发展而变化。在流行初期,病株呈随机分布,随后呈聚集分布,到后期则趋于均匀分布。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病 病害 流行 空间分布 模糊聚类分
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番木瓜环斑病毒复制酶(亚基)基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建 被引量:8
11
作者 刘俊君 彭学贤 莽克强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期283-287,共5页
近二年报道,在TMV、PVX、PEBV和CMV等病毒中,利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草,工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为:马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(NIb)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基),... 近二年报道,在TMV、PVX、PEBV和CMV等病毒中,利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草,工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为:马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(NIb)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基),NIb与上述病毒的复制酶有广泛的同源保守区。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 复制酶基因
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基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究
12
作者 吴清铧 贾瑞宗 +5 位作者 郭静远 杨牧之 胡玉娟 郝志刚 赵辉 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期837-846,共10页
番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistanc... 番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。 展开更多
关键词 番木瓜 番木瓜环斑病毒 Nib基因 RNA介导的病毒抗性
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番木瓜环斑病毒的提纯研究 被引量:4
13
作者 高文通 高乔婉 范怀忠 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1996年第1期15-20,共6页
详细报道了影响番木瓜环斑病毒(PRV)粗提纯效果的几个主要因素(繁殖寄主种类、有机澄清剂、分散剂、病毒浓缩前的去渣离心力、浓缩病毒的超离心力等)的最佳选择.繁殖寄主以角葫瓜(Cucumissmetulifenis)最... 详细报道了影响番木瓜环斑病毒(PRV)粗提纯效果的几个主要因素(繁殖寄主种类、有机澄清剂、分散剂、病毒浓缩前的去渣离心力、浓缩病毒的超离心力等)的最佳选择.繁殖寄主以角葫瓜(Cucumissmetulifenis)最好。该研究综合上述最佳选择而拟定的一次差速离心和一次30%蔗糖硫酸艳连续密度梯度离心3h的简单程序较好地提纯了PRY,提纯的病毒有典型核蛋白紫外吸收曲线,A260/A280=1.68,提纯产量为2.56mg/100g西葫芦病叶。所得病责制剂可满足血清学、分子生物学等方面的深入研究。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 线状病毒提纯
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番木瓜环斑病毒甜瓜分离物的基因组及其侵染性克隆
14
作者 刘莉铭 彭斌 +3 位作者 康保珊 吴会杰 刘茜 古勤生 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第2期8-14,共7页
番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序... 番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序列一致性分别为74.60%~97.80%和85.30%~98.50%。基于全基因组序列的系统进化分析显示,HaNHK10与来自中国的所有分离物均聚集于II组中,并与中国山东的西葫芦分离物PRSV-SD亲缘关系最近。接种试验显示,HaNHK10分离物的全长cDNA克隆具有侵染性,它能系统侵染甜瓜、黄瓜、西瓜、南瓜、西葫芦和瓠瓜6种作物,经接种产生的病毒后代也能够通过摩擦接种侵染植株。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 甜瓜分离物 基因组 侵染性克隆
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SYBR-Green实时荧光PCR检测转基因番木瓜 被引量:5
15
作者 刘建越 邓欣 +3 位作者 康林 余道坚 高必达 陈冬美 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期371-374,共4页
分别以RBCL基因和PRSV-CP基因、PRSV-RP基因为内源基因和目标基因,设计了3对特异性引物,对转基因番木瓜进行了SYBRGreen实时荧光PCR检测.结果表明,RBCL基因引物对所有供试样品成功扩增,Ct值为15~16,PRSV-CP引物对转PRSV-CP基因番木瓜... 分别以RBCL基因和PRSV-CP基因、PRSV-RP基因为内源基因和目标基因,设计了3对特异性引物,对转基因番木瓜进行了SYBRGreen实时荧光PCR检测.结果表明,RBCL基因引物对所有供试样品成功扩增,Ct值为15~16,PRSV-CP引物对转PRSV-CP基因番木瓜样品成功扩增,Ct值为20~25,PRSV-RP引物对转PRSV-RP基因番木瓜样品成功扩增,Ct值为21~22.运用熔解曲线进行产物分析,验证了试验结果的特异性和准确性. 展开更多
关键词 转基因番木瓜 番木瓜环斑病毒 SYBR-Green实时荧光PCR 检测
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几种化学制剂对番木瓜抗环斑病毒和防御酶活性的影响 被引量:5
16
作者 张荣萍 黄耿磊 +2 位作者 郭漫登 许钟良 余雪标 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2009年第2期129-132,共4页
研究几种化学制剂对番木瓜抗环斑病毒和叶片中防御酶活性影响的结果表明,接种番木瓜环斑病毒后,植株叶中多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性均明显升高,其中PPO和POD总体的升高幅度大,SOD的总体升幅较小;病... 研究几种化学制剂对番木瓜抗环斑病毒和叶片中防御酶活性影响的结果表明,接种番木瓜环斑病毒后,植株叶中多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性均明显升高,其中PPO和POD总体的升高幅度大,SOD的总体升幅较小;病毒必克的升幅较大,83增抗剂和水杨酸的升幅较小。83增抗剂、水杨酸和病毒必克均能使番木瓜叶中PPO、SOD和POD活性持续升高,有效减轻了环斑病的病情,防治效果依次为83增抗剂>水杨酸>病毒必克。 展开更多
关键词 番木瓜坏斑病 化学制剂 防御酶活性 抗病效果
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番木瓜环斑病毒海南分离株全基因组序列分析 被引量:4
17
作者 卢雅薇 沈文涛 +2 位作者 唐清杰 牛艳梅 周鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期152-154,共3页
Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was... Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was assembled,named Hainan-P isolate.The RNA genome sequence of Hainan-P isolate was 10323 nucleotides (nts)in length,excluding the 3’-terminal poly(A) tail. And it was composed of a single open reading frame encoding a polyprotein of 3343 amino acids. The result of homology analysis with twelve GenBank PRSV isolates showed that the polyprotein identity of Hainan-P ranged from 89.8% to 93.2%, that was higher than the complete nt homology of 82.3% to 89.1%. The P1 amino acid was the least conserved( sharing homology only between 65.4% and 80.1%), whereas HC-Pro,CI and CP were the most conserved. Phylogenetic tree were constructed by the Neighbor-joining method in MEGA 3.1, which showed that PRSV isolates were obviously relevant to geographical origin,and it was impossible to delineate host-specific (P type and W type)evolution. 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 全基因组 同源性 系统进化树
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云南番木瓜环斑病毒的发生及遗传多样性 被引量:5
18
作者 朱静 谭冠林 +4 位作者 包改丽 刘芳 李晓静 吴祖建 李凡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1142-1151,共10页
【目的】明确云南省番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)发生情况,并对其进行遗传多样性分析。【方法】利用RT-PCR技术,于2011-2012年对采自云南省昆明市、楚雄州、保山市、德宏州、西双版纳州、临沧市、玉溪市、红河州、文山... 【目的】明确云南省番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)发生情况,并对其进行遗传多样性分析。【方法】利用RT-PCR技术,于2011-2012年对采自云南省昆明市、楚雄州、保山市、德宏州、西双版纳州、临沧市、玉溪市、红河州、文山州等地的24个番木瓜、南瓜和罗汉果疑似病样进行扩增、测序,对样品中获得的940 bp PRSV部分cp基因及3′端非编码区的序列应用分子生物学软件MEGA 5进行系统发育分析。【结果】从17个样品中检测到了PRSV,检出率为70.8%,表明该病毒在云南的发生较为普遍。云南PRSV不同分离物间的核苷酸序列变异较大,与其他已报道的PRSV分离物之间的基因组3′端核苷酸序列一致性为81.7%-100%。基于PRSV的CP部分氨基酸序列及基因组3′端核苷酸的系统进化分析结果表明,来自亚洲、北美洲、南美洲和大洋洲的PRSV分离物可以分为2个组,其中第Ⅰ组均为来自中国的分离物,包括了大部分的PRSV云南分离物,第Ⅰ组内分离物间的差异较第Ⅱ组大;第Ⅱ组的分离物来源较为复杂,亚洲、北美洲、南美洲和大洋洲均有分布。基于PRSV CP部分氨基酸序列构建的系统进化树中,各分离物之间没有明显的地理和寄主相关性,而基于PRSV基因组3′端核苷酸序列构建的系统进化树中,除中国大陆分离物和印度分离物外,其他地区的PRSV在进化上与其地理来源有明显的相关性。【结论】PRSV在云南的昆明市、楚雄州、保山市、德宏州、西双版纳州、临沧市、玉溪市、红河州和文山州等地都有不同程度发生,且为害寄主植物涉及番木瓜、南瓜及罗汉果,PRSV侵染罗汉果为云南首次发现。云南PRSV分离物的分子变异很大,但是关于PRSV的分子变异是否与其地理分布及症状表现有关,以及P型和W型的分子区分特征还有待进一步研究。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 CP基因 分子变异 多样性分析
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番木瓜环斑病毒单克隆抗体的制备及在病毒分型上的初步应用 被引量:3
19
作者 林壁润 李英杰 +1 位作者 欧阳明辉 范怀忠 《病毒学杂志》 CAS CSCD 1989年第2期172-175,共4页
本试验是用番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus, PRV)提纯制剂免疫的BALB/c小白鼠脾细胞与Sp^2/o-Ag14骨髓瘤细胞融合,获得三个能稳定传代并分泌抗番木瓜环斑病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞系。其中23H1 McAb的效价较高,用ELISA检测,... 本试验是用番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus, PRV)提纯制剂免疫的BALB/c小白鼠脾细胞与Sp^2/o-Ag14骨髓瘤细胞融合,获得三个能稳定传代并分泌抗番木瓜环斑病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞系。其中23H1 McAb的效价较高,用ELISA检测,腹水抗体效价高达1:76800,能被PRV兔抗血清所阻断。这3个杂交瘤细胞系产生的单抗与TMV和CMV无血清交叉反应。它们可把PRV四个毒株初步区分为三个血清型。 展开更多
关键词 环斑病毒 单克隆抗体 病毒分型
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番木瓜环斑病毒Ys CP基因的序列分析和植物表达载体的构建 被引量:4
20
作者 叶长明 范怀忠 +1 位作者 叶寅 田波 《中国病毒学》 CAS CSCD 1997年第1期54-60,共7页
用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒(PRV)Ys株系外壳蛋白(CP)基因的序列,结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现,YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高(94.44%~97.68... 用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒(PRV)Ys株系外壳蛋白(CP)基因的序列,结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现,YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高(94.44%~97.68%),而与国外株系或分离物CP基因的同源性较低(88.88%~92.70%)。CP基因之间的差异主要靠近基因5’端,特别是在YSCP基因第63nt后连续缺失6nt,SmGTHAI和SRI的CP基因也在此处缺失3nt。将YsCP基因插入中间质粒pRokⅡ的CaMV35S启动于和nos终止序列之间形成CP基因的植物表达载体pRPCY,通过三亲交配使pRPCY进入农杆菌LBA4404,与其中的pAL4404构成双元载体系统。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 外壳蛋白基因 植物表达载体
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