四辊液压轧机P-AGC系统 被引量：5

1

作者 张家冰 韩文秀 《重型机械》 2003年第4期4-7,共4页

本文介绍的P AGC系统应用于2 10 /5 0 0× 80 0四辊铝箔液压轧机上 ,可提高轧机对入口厚度和硬度波动的消差能力 ,并具有消除轧辊偏心干扰的效果 ,因此是现代液压轧机AGC系统的重要环节。

关键词 四辊铝箔液压轧机 厚度自动控制 轧制力 P-AGC

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壳聚糖介导甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC DNA疫苗的构建及其免疫效果 被引量：1

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作者 梁昊宇 任慧梅 +3 位作者 张影 董思国 王斌 曾明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第10期1055-1060,共6页

目的构建壳聚糖(chitosan,CS)介导的甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC的DNA疫苗,并探讨该疫苗的免疫效果。方法按哺乳动物的密码子偏好性对nmpC和pagC的基因序列进行优化,并将优化后的序列克隆至真核表达载体provax中,构建provax-nmpC和prova... 目的构建壳聚糖(chitosan,CS)介导的甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC的DNA疫苗,并探讨该疫苗的免疫效果。方法按哺乳动物的密码子偏好性对nmpC和pagC的基因序列进行优化,并将优化后的序列克隆至真核表达载体provax中,构建provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗。采用复凝聚法制备载DNA疫苗的CS纳米粒,并对CS/DNA纳米粒的特性进行检测。将provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗及其相应的CS纳米粒体外转染BHK细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达。采用活体电击法分别用不同组分的蛋白免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体水平及抗体类型。结果 provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗经双酶切鉴定,构建正确。疫苗可与CS发生有效结合,纳米粒形似球形,粒径均一,包封率均达90%以上,且CS可防止DNA被DNaseⅠ酶降解。provax-nmpC及CS/provax-nmpC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,两组间差异无统计学意义(P>0.05);provax-pagC与CS/provaxpagC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,且provax-pagC组的抗体水平明显高于CS/provax-pagC(P<0.05)。provax-nmpC和provax-pagC组的IgG1及IgG2a抗体水平均高于相应的CS组(P<0.05),且IgG1和IgG2a间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DNA疫苗provax-nmpC和provax-pagC均可诱导有效的免疫反应;载基因CS纳米粒并未增强DNA疫苗的免疫效果;CS未改变DNA疫苗的免疫应答类型,但具有调节Th1和Th2平衡的作用。 展开更多

关键词 壳聚糖 甲型副伤寒沙门菌 nmpC pagc DNA疫苗

原文传递

鼠伤寒沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析

3

作者 郭晓 汪远 +1 位作者 范红结 马喆 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期896-901,共6页

[目的]本试验旨在制备抗鼠伤寒沙门菌Pag C蛋白的单克隆抗体并初步分析其特异性和识别的抗原表位,为沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的建立奠定基础。[方法]原核表达并纯化Pag C蛋白,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体;用生物... [目的]本试验旨在制备抗鼠伤寒沙门菌Pag C蛋白的单克隆抗体并初步分析其特异性和识别的抗原表位,为沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的建立奠定基础。[方法]原核表达并纯化Pag C蛋白,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体;用生物信息学分析法获得Pag C蛋白在沙门菌属内保守的区段,合成相应多肽P1及P2用于单克隆抗体筛选和结合表位鉴定;最后采用免疫印迹方法对单克隆抗体与肠杆菌科其他细菌的交叉反应进行检测,评价其特异性。[结果]纯化后的Pag C蛋白相对分子质量约23×103;免疫小鼠后经2次亚克隆最终得到稳定分泌抗体的细胞株6株,标记为A、B、C、D、I、J;单克隆抗体的反应性试验结果显示6株单克隆抗体均能够识别Pag C蛋白;单克隆抗体的结合表位分析显示,J细胞株分泌的单克隆抗体可特异性识别P1序列;采用免疫印迹方法对J细胞株上清液进行特异性检测,证实该株单克隆抗体与变形杆菌、大肠杆菌O1和宋内志贺菌Pag C蛋白均无结合反应。[结论]成功获得1株与Pag C蛋白有良好结合活性且具有高度特异性的单克隆抗体,该株单克隆抗体的识别表位位于Pag C中沙门菌属内保守区段,可作为建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的候选单克隆抗体。 展开更多

关键词 沙门菌 pagc 单克隆抗体 合成肽 特异性

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迟缓爱德华菌外膜蛋白PagC原核表达及免疫保护作用

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作者 张志强 杨楠 +6 位作者 李永慧 苏硕青 冯东青 吴同垒 高桂生 钱爱东 史秋梅 《动物医学进展》 北大核心 2020年第9期1-4,共4页

为研究迟缓爱德华菌外膜蛋白PagC的免疫原性,用PCR方法扩增迟缓爱德华菌pagC基因,构建重组载体pET-32a-pagC,将其转化大肠埃希菌BL21后进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析显示,重组蛋白大小约40 ku;将纯化的重组蛋白免... 为研究迟缓爱德华菌外膜蛋白PagC的免疫原性,用PCR方法扩增迟缓爱德华菌pagC基因,构建重组载体pET-32a-pagC,将其转化大肠埃希菌BL21后进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析显示,重组蛋白大小约40 ku;将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以迟缓爱德华菌强毒株ET-13攻毒,结果该重组蛋白对免疫组小鼠具有95%的保护率。研究结果为重组PagC蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 迟缓爱德华菌 外膜蛋白 pagc 原核表达 免疫保护

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甲型副伤寒沙门菌PagC蛋白在乳酸乳球菌中的表达研究

5

作者 许泽仰 洪愉 +9 位作者 贾静 冯梦蝶 毛普加 赵继华 杨洪文 宋武战 王纪爱 黄芬 井申荣 曾韦锟 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期753-756,760,共5页

目的构建能够表达甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白(Pag C)的乳酸乳球菌。方法 PCR扩增pag C基因,亚克隆至p MD18-T载体并测序,从亚克隆载体中酶切回收pag C基因,插入p MG36e并命名为p MG36e-pag C,转化乳酸乳球菌MG1363。溶菌酶加超声的方法... 目的构建能够表达甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白(Pag C)的乳酸乳球菌。方法 PCR扩增pag C基因,亚克隆至p MD18-T载体并测序,从亚克隆载体中酶切回收pag C基因,插入p MG36e并命名为p MG36e-pag C,转化乳酸乳球菌MG1363。溶菌酶加超声的方法破碎重组乳酸乳球菌,SDS-PAGE以及Western blot检测Pag C蛋白的表达。结果 p MG36e-pag C鉴定正确,Western blot检测到p MG36e-pag C/MG1363表达的Pag C蛋白。结论成功构建能组成型表达Pag C蛋白的乳酸乳球菌。 展开更多

关键词 乳酸乳球菌 黏膜免疫 pagc Western BLOT

原文传递

鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析 被引量：7

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作者 王宏卫 赵平 +2 位作者 张珉 朱诗应 戚中田 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期308-314,共7页

从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,M... 从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,Mg2 +浓度小于50mmol L时培养的重组菌经SDS PAGE和Westernblot检测能高水平表达HGVNS3蛋白。Mg2 +浓度升至 50mmol L时 ,NS3蛋白表达量明显降低。收集以 50mmol LMg2 +的培养基扩增的重组菌 ,灌胃接种C57小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子 ,为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 pagc启动子 克隆 活性 镁离子 庚型肝炎病毒 表达质粒

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Logistic回归分析中的一些应用问题 被引量：4

7

作者 赵宁 俞顺章 《山西医学院学报》 1994年第1期26-30,共5页

多元Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型是当代流行病学研究中广泛使用的分析工具之一。但其有一定的适用条件和局限性。本文就应用方面的一些问题做一扼要讨论。

关键词 流行病学 回归模型 LOGISTIC

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甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用 被引量：4

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作者 张佳 范欣丽 +2 位作者 葛玉梅 严杰 孙爱华 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期171-176,231,共7页

目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲... 目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rPagC。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测rPagC表达情况及其产量。采用免疫扩散法、ELISA和Western Blot鉴定其抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rPagC对甲型副伤寒杆菌感染的免疫保护效果,微量肥达试验检测rPagC免疫小鼠血清凝集伤寒和副伤寒沙门菌的效果。结果:所有被检测的甲型副伤寒沙门菌临床菌株均携带pagC基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.1%～100%和98.4%～100%。所构建的原核表达系统能高效表达rPagC。rPagC免疫家兔可产生高效价抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号。ELISA结果显示,97.1%(66/68)甲型副伤寒患者血清标本rPagC抗体阳性。100μg和200μg rPagC对感染小鼠的免疫保护率分别为73.3%(11/15)和86.7%(13/15)。rPagC免疫小鼠血清对甲型副伤寒沙门菌和伤寒沙门菌H抗原凝集效价高达1∶10～1∶40。结论:pagC基因在甲型副伤寒沙门菌株中分布广泛。rPagC有良好的免疫原性及较强的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原。 展开更多

关键词 沙门菌 甲型副伤寒 免疫学 沙门菌 甲型副伤寒 遗传学 基因表达调控 细菌 重组 遗传 基因表达 pagc基因 重组表达 免疫原性 免疫保护性

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福建省不同来源沙门菌中pagC-msgA毒力小岛分布特征 被引量：3

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作者 黄梦颖 陈建辉 +3 位作者 邱玉锋 李曲文 徐海滨 杨劲松 《实验与检验医学》 CAS 2021年第1期15-18,共4页

目的通过对福建省沙门菌腹泻患者与健康人群分离株中毒力小岛pagC-msgA分布特征的研究,进一步探索本省沙门菌的毒力特点,为有效防控本省沙门菌爆发提供科学可靠的依据。方法收集166株从腹泻患者(121株)与健康人群(45株)中分离到的沙门... 目的通过对福建省沙门菌腹泻患者与健康人群分离株中毒力小岛pagC-msgA分布特征的研究,进一步探索本省沙门菌的毒力特点,为有效防控本省沙门菌爆发提供科学可靠的依据。方法收集166株从腹泻患者(121株)与健康人群(45株)中分离到的沙门菌菌株。对毒力基因pagC和msgA进行常规PCR检测。采用SPSS17.0对实验结果进行数据统计。结果福建省166株沙门菌中均检出一定比例的毒力基因msgA与pagC,检出率分别为40.36%和55.42%。但是,腹泻患者分离株和健康人群分离株中这两个毒力基因的分布情况无统计学差异(χ^(2)_(pagC)=0.089,P=0.766;χ^(2)_(msgA)=1.915,P=0.166);基因携带模式也无统计学差异(χ^(2)_(VP1)=1.255,P=0.263;χ^(2)_(VP2)=1.519,P=0.218;χ^(2)_(VP3)=0.134,P=0.714;χ^(2)_(VP4)=0.488,P=0.485)。VP3:pagC+msgA+及VP4:pagC-msgA-为最常见的基因携带模式。结论福建省沙门菌pagC-msgA毒力小岛在腹泻患者与健康人群分离株中的分布特征相似,不存在差异性。所以健康人群分离株与腹泻患者分离株一样都具有一定的致病潜能。 展开更多

关键词 沙门菌 pagc-msgA毒力小岛 腹泻患者 健康人群

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鸡白痢沙门菌pagC缺失株的构建及菌蜕制备 被引量：2

10

作者 路佳兴 李联悦 +1 位作者 潘飞 马喆 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第6期86-91,共6页

为了开发具有鉴别诊断功能的鸡白痢沙门菌疫苗,通过λ-Red同源重组敲除鸡白痢沙门菌CVCC1800的pagC基因,成功获得ΔpagC菌株;合成细胞穿透肽(cell penetrating peptide,CPP)制备菌蜕并对处理条件进行了优化。结果显示:作用浓度为50μmol... 为了开发具有鉴别诊断功能的鸡白痢沙门菌疫苗,通过λ-Red同源重组敲除鸡白痢沙门菌CVCC1800的pagC基因,成功获得ΔpagC菌株;合成细胞穿透肽(cell penetrating peptide,CPP)制备菌蜕并对处理条件进行了优化。结果显示:作用浓度为50μmol/L,ΔpagC菌液OD600 nm=0.4左右时CPP灭活效果最好。本研究制备的基于ΔpagC鸡白痢沙门菌菌蜕,在保留抗原性的同时为鉴别诊断提供了靶点,为后续开发针对鸡白痢沙门菌的鉴别诊断菌蜕疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡白痢沙门菌 菌蜕 细胞穿透肽 pagc缺失

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肠炎沙门菌pagC基因缺失株构建及其相关生物学特性研究 被引量：2

11

作者 李永慧 苏硕青 +2 位作者 李巧玲 吴同垒 张志强 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期3378-3382,共5页

目的研究肠炎沙门菌外膜蛋白PagC的生物学功能以及在肠炎沙门菌致病过程中的作用。方法利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)pagC基因缺失突变(C50336Δhtra),在此基础上构建基因回补菌株。测定肠炎沙门菌各菌株在培养基中... 目的研究肠炎沙门菌外膜蛋白PagC的生物学功能以及在肠炎沙门菌致病过程中的作用。方法利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)pagC基因缺失突变(C50336Δhtra),在此基础上构建基因回补菌株。测定肠炎沙门菌各菌株在培养基中的生长曲线;利用生化鉴定系统测定各菌株的生化特性;分析肠炎沙门菌各菌株在酸性、碱性和高渗环境下的存活能力;利用K-B纸片法测定肠炎沙门菌各菌株的耐药性。结果成功构建了肠炎沙门菌pagC基因缺失株C50336ΔpagC。生长曲线显示,与野生型菌株和回补菌株相比,C50336ΔpagC缺失株生长速度、生化特性无明显差异,表明pagC不影响肠炎沙门菌的生长特性。应激实验结果显示,pagC基因缺失后,肠炎沙门菌应对酸碱应激和高盐应激能力显著下降,表明pagC影响肠炎沙门菌应激条件下生存。药物敏感性试验结果显示,pagC基因缺失后,肠炎沙门菌对多种抗菌药物敏感性增高,表明pagC参与肠炎沙门菌耐药过程。结论PagC蛋白与细菌抗环境应激和耐药性相关,为进一步阐释肠炎沙门菌致病机制和耐药机理奠定基础。 展开更多

关键词 肠炎沙门菌 基因缺失 pagc基因 生物学特性

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84K杨PagC3H3基因表达模式分析 被引量：2

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作者 樊二勤 刘彩霞 +2 位作者 付鹏跃 杨传平 曲冠证 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期521-528,共8页

木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成... 木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成中的关键控制酶类,探究PagC3H3基因表达模式,对于进一步了解该基因功能具有重要意义。该研究通过定量PCR对PagC3H3基因的组织特异性表达进行分析;克隆得到了长度为2035bp的PagC3H3的启动子序列,预测含有多个顺式作用元件;同时,将获得的PagC3H3的启动子序列构建植物表达载体pBI121-PagC3H3pro::GUS,进行拟南芥瞬时转化,结果显示PagC3H3基因在84K杨的根、中部茎节和基部茎节中的表达量较高;瞬时转化拟南芥,GUS染色表明:在下胚轴和根中GUS活性较强,由此推测PagC3H3基因在木质素合成过程中发挥作用。 展开更多

关键词 84K杨 pagc3H3 启动子 拟南芥 瞬时转化 GUS检测

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浅谈教育网站中网页背景的设计

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作者 刘国银 李良宾 宋建云 《计算机光盘软件与应用》 2011年第6期176-176,共1页

网页的背景直接影响着网站的形象。如何进行背景设计，应遵循什么原则是每一个网页设计者必须要了解的一个基本问题。面对因特网上各种各样的网站，教育网站作为其中一类特殊的网站，它的背景设计在遵循其基本原则的前提下，同时又要体... 网页的背景直接影响着网站的形象。如何进行背景设计，应遵循什么原则是每一个网页设计者必须要了解的一个基本问题。面对因特网上各种各样的网站，教育网站作为其中一类特殊的网站，它的背景设计在遵循其基本原则的前提下，同时又要体现其自身的教育风格特点，使其具有更高的教育内涵。 展开更多

关键词 网站 网页背景 设计

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