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内源性质粒pXL100的消除影响东方拟无枝酸菌HCCB10007中次级代谢产物的合成
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作者 仲茜 徐莉 +2 位作者 朱丽 戈梅 钱秀萍 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期570-574,共5页
目的利用分子手段获得东方拟无枝酸菌HCCB10007内源环型质粒pXL100消除突变株,探究大质粒pXL100对于HCCB10007次级代谢产物的影响。方法利用同源重组的方法将pXL100上疑似编码与质粒复制相关的基因orf37(par A)阻断,同时引入安普霉素抗... 目的利用分子手段获得东方拟无枝酸菌HCCB10007内源环型质粒pXL100消除突变株,探究大质粒pXL100对于HCCB10007次级代谢产物的影响。方法利用同源重组的方法将pXL100上疑似编码与质粒复制相关的基因orf37(par A)阻断,同时引入安普霉素抗性基因作为后续的筛选标记。通过EB诱导,影印培养筛选pXL100消除突变株。比较突变株与原始菌株生长及主要次级代谢产物的变化。结果通过筛选获得质粒消除突变株HCCB10007-pXL(-),其万古霉素和ECO-0501的产量较原始菌明显下降,分别为原菌株的1/4和1/100。结论东方拟无枝酸菌HCCB10007的质粒pXL100具有调控万古霉素和ECO-0501合成的基因。 展开更多
关键词 东方拟无枝酸菌 质粒消除 pxl100 万古霉素 EC-0501
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