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变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
被引量:
3
1
作者
童忠春
马丽芳
+1 位作者
倪龙兴
侯波
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期182-185,共4页
目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到...
目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到luxS基因上下游序列,最后将这3段DNA片断分别按顺序插入到pMD19-T载体的多克隆酶切位点中,转化大肠杆菌的感受态中,通过在卡那霉素和氨苄青霉素的培养基进行筛选。结果:kana+基因和luxS基因两侧同源序列成功连入到pMD19-T载体相应酶切位点,酶切、测序结果正确。结论:成功构建变异链球菌luxS基因敲除重组质粒,为将来构建变异链球菌luxS突变株打下基础。
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关键词
变异链球菌
LUXS基因
pmd
19
-T载体
pEGFP-N1质粒
pmd
19
-
tukd
下载PDF
职称材料
变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜形成的影响研究
被引量:
5
2
作者
童忠春
倪龙兴
+3 位作者
马丽芳
周琳
侯波
赵秀
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期386-389,共4页
目的敲除变异链球菌中的luxS基因,构建luxS突变株,测试变异链球菌失去luxS基因后形成牙菌斑生物膜的能力。方法把luxS基因敲除重组质粒转入变异链球菌UA159中,得到转化菌,在含有卡拉霉素的培养基中进行筛选,得到变异链球菌luxS基因突变...
目的敲除变异链球菌中的luxS基因,构建luxS突变株,测试变异链球菌失去luxS基因后形成牙菌斑生物膜的能力。方法把luxS基因敲除重组质粒转入变异链球菌UA159中,得到转化菌,在含有卡拉霉素的培养基中进行筛选,得到变异链球菌luxS基因突变株,并利用聚合酶链式反应(PCR)和哈氏弧菌发光实验对变异链球菌luxS突变株进行检测,通过扫描电镜,对不同时间段变异链球菌luxS突变株和变异链球菌UA159在BHIS培养液(含1%蔗糖的脑心浸液)和BHIG培养液(含1%葡萄糖的脑心浸液)中形成的生物膜进行比较。结果成功的构建了变异链球菌luxS突变株,在BHIS培养液中,变异链球菌luxS突变株形成生物膜的能力比变异链球菌UA159弱,而在BHIG培养液中,二者无显著差异。结论变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜的形成有重要的影响,并且luxS基因对变异链球菌生物膜的调控是蔗糖依赖型的。
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关键词
pmd
-
19
tukd
质粒
变异链球菌UA159
luxS突变株
生物膜
下载PDF
职称材料
变异链球菌LuxS突变株的构建及其耐酸性的测试
3
作者
童忠春
倪龙兴
+2 位作者
马丽芳
侯波
赵秀
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2008年第8期446-449,共4页
目的:把构建好的含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒转入变异链球菌进行luxS的敲除以形成luxS突变株,同时测试变异链球菌失去luxS基因后在pH 3.0酸性环境中的生长情况。方法:把含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒(pMD-19TUKD)转化入...
目的:把构建好的含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒转入变异链球菌进行luxS的敲除以形成luxS突变株,同时测试变异链球菌失去luxS基因后在pH 3.0酸性环境中的生长情况。方法:把含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒(pMD-19TUKD)转化入变异链球菌UA159中,利用同源重组,等位基因交换进行luxS基因敲除,再对此突变株进行PCR的检测,利用测试A值、梯度稀释和平板计数法,对变异链球菌luxS突变株和野生型的变异链球菌在pH 3.0酸性环境下生存情况进行比较。结果:成功的构建了变异链球菌luxS的突变株,并且变异链球菌失去luxS基因后,在酸性环境下的生存能力相对于野生型的变异链球菌低。结论:LuxS基因对变异链球菌的耐酸性起着重要作用。
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关键词
pmd
-
19
tukd
质粒
变异链球菌luxS突变株
野生型变异链球菌
下载PDF
职称材料
题名
变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
被引量:
3
1
作者
童忠春
马丽芳
倪龙兴
侯波
机构
西安第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科
出处
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期182-185,共4页
文摘
目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到luxS基因上下游序列,最后将这3段DNA片断分别按顺序插入到pMD19-T载体的多克隆酶切位点中,转化大肠杆菌的感受态中,通过在卡那霉素和氨苄青霉素的培养基进行筛选。结果:kana+基因和luxS基因两侧同源序列成功连入到pMD19-T载体相应酶切位点,酶切、测序结果正确。结论:成功构建变异链球菌luxS基因敲除重组质粒,为将来构建变异链球菌luxS突变株打下基础。
关键词
变异链球菌
LUXS基因
pmd
19
-T载体
pEGFP-N1质粒
pmd
19
-
tukd
Keywords
Streptococcus mutans
luxS gene
vector
pmd
19
-T
Plasmid pEGFP-N1
pmd
19
-
tukd
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜形成的影响研究
被引量:
5
2
作者
童忠春
倪龙兴
马丽芳
周琳
侯波
赵秀
机构
第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期386-389,共4页
文摘
目的敲除变异链球菌中的luxS基因,构建luxS突变株,测试变异链球菌失去luxS基因后形成牙菌斑生物膜的能力。方法把luxS基因敲除重组质粒转入变异链球菌UA159中,得到转化菌,在含有卡拉霉素的培养基中进行筛选,得到变异链球菌luxS基因突变株,并利用聚合酶链式反应(PCR)和哈氏弧菌发光实验对变异链球菌luxS突变株进行检测,通过扫描电镜,对不同时间段变异链球菌luxS突变株和变异链球菌UA159在BHIS培养液(含1%蔗糖的脑心浸液)和BHIG培养液(含1%葡萄糖的脑心浸液)中形成的生物膜进行比较。结果成功的构建了变异链球菌luxS突变株,在BHIS培养液中,变异链球菌luxS突变株形成生物膜的能力比变异链球菌UA159弱,而在BHIG培养液中,二者无显著差异。结论变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜的形成有重要的影响,并且luxS基因对变异链球菌生物膜的调控是蔗糖依赖型的。
关键词
pmd
-
19
tukd
质粒
变异链球菌UA159
luxS突变株
生物膜
Keywords
pmd
-
19
tukd
Streptococcus mutans UA159
luxS mutant
biofilm
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
变异链球菌LuxS突变株的构建及其耐酸性的测试
3
作者
童忠春
倪龙兴
马丽芳
侯波
赵秀
机构
第四军医大学口腔医学院
出处
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2008年第8期446-449,共4页
文摘
目的:把构建好的含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒转入变异链球菌进行luxS的敲除以形成luxS突变株,同时测试变异链球菌失去luxS基因后在pH 3.0酸性环境中的生长情况。方法:把含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒(pMD-19TUKD)转化入变异链球菌UA159中,利用同源重组,等位基因交换进行luxS基因敲除,再对此突变株进行PCR的检测,利用测试A值、梯度稀释和平板计数法,对变异链球菌luxS突变株和野生型的变异链球菌在pH 3.0酸性环境下生存情况进行比较。结果:成功的构建了变异链球菌luxS的突变株,并且变异链球菌失去luxS基因后,在酸性环境下的生存能力相对于野生型的变异链球菌低。结论:LuxS基因对变异链球菌的耐酸性起着重要作用。
关键词
pmd
-
19
tukd
质粒
变异链球菌luxS突变株
野生型变异链球菌
Keywords
pmd
-
19
tukd
luxS- deficient S mutans strains
wild S mutans
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
童忠春
马丽芳
倪龙兴
侯波
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
下载PDF
职称材料
2
变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜形成的影响研究
童忠春
倪龙兴
马丽芳
周琳
侯波
赵秀
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
5
下载PDF
职称材料
3
变异链球菌LuxS突变株的构建及其耐酸性的测试
童忠春
倪龙兴
马丽芳
侯波
赵秀
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2008
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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