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题名变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
被引量：3
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作者
童忠春
马丽芳
倪龙兴
侯波
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机构
西安第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科
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出处
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期182-185,共4页
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文摘
目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到luxS基因上下游序列,最后将这3段DNA片断分别按顺序插入到pMD19-T载体的多克隆酶切位点中,转化大肠杆菌的感受态中,通过在卡那霉素和氨苄青霉素的培养基进行筛选。结果:kana+基因和luxS基因两侧同源序列成功连入到pMD19-T载体相应酶切位点,酶切、测序结果正确。结论:成功构建变异链球菌luxS基因敲除重组质粒,为将来构建变异链球菌luxS突变株打下基础。
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关键词
变异链球菌
LUXS基因
pmd19-T载体
pEGFP-N1质粒
pmd19-TUKD
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Keywords
Streptococcus mutans
luxS gene
vector pmd19-T
Plasmid pEGFP-N1
pmd19-TUKD
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分类号
R780.2
[医药卫生—口腔医学]
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题名贵州白香猪Gadd45G的cDNA克隆与序列分析
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作者
乜玉丽
许厚强
赵佳福
张勇
陈祥
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机构
高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室/贵州大学贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室
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出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期141-144,共4页
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基金
转基因生物新品种培育科技重大专项子项目(2009ZX08009-139B)
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文摘
采用试剂盒提取RNA和RT-PCR法获得贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列,构建了贵州白香猪Gadd45G基因的pMD19亚克隆载体,并对该重组质粒进行测序分析,为贵州白香猪作为模式动物提供理论基础,为构建Gadd45G基因真核表达载体和转基因猪研究奠定基础。PCR、双酶切鉴定结果表明,已成功克隆的贵州白香猪Gadd45G基因的cDNA序列长度为480 bp。测序结果显示,贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列与普通猪、人类、家鼠、牛的同源性分别为99.6%、89.6%、90.2%、91.2%,氨基酸同源性分别为98.8%、95.6%、95.0%、96.2%。序列分析表明,贵州白香猪Gadd45G基因编码序列与普通猪相比,有两处发生碱基突变,其中一处为错义突变(第385处的G→A突变)使氨基酸由丙氨酸突变成苏氨酸。
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关键词
贵州白香猪
Gadd45基因
pmd19-T载体
克隆
序列分析
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Keywords
Guizhou Bai Xiang pig
Gadd45G gene
pmd19-T vector
cloning
sequence analysis
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分类号
Q344.12
[生物学—遗传学]
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