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题名人VDAC2融合蛋白质粒构建及原核表达研究
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作者
董国法
丁道芳
王燕菲
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机构
广州医学院生物化学教研室
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出处
《现代生物医学进展》
CAS
2008年第10期1805-1808,共4页
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基金
国家自然科学基金(30270305)
广东省自然科学基金(020733)
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文摘
目的:构建人VDAC2融合蛋白原核表达质粒并进行原核表达研究。方法:运用RT-PCR技术在培养的人HepG2.2.15细胞中钓取到目的基因VDAC2,连接至T载体上进行克隆,获得大量目的基因与原核表达载体pTrc-CKS、pMBP-P连接,构建重组融合蛋白表达质粒,转入大肠杆菌中DH5α,BL21(DE3)LySs中,IPTG诱导蛋白原核表达,表达产物经SDS-PAGE检测,分析蛋白表达情况。结果:成功构建了重组载体pTrc-CKS-VDAC2和pMBP-P-VDAC2,并在原核大肠杆菌中实现了重组融合蛋白的超量表达。结论:构建的两个人VDAC2的融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中均得到超量表达。为进一步研究VDAC2蛋白奠定了基础。
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关键词
VDAC2
原核表达
pTrc—CKS
pmbp—p
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Keywords
VDAC2
prokaryotic expression
pTrc-CKS
pmbp-p
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分类号
Q512
[生物学—生物化学]
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