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新载体pET-DB对带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的高效表达与纯化
1
作者
朱志勇
谭波
+1 位作者
张文河
张洪杰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第7期655-658,共4页
报道了带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达 ,SDS PAGE分析表明 ,带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的含量可占大肠杆菌细胞总蛋白质含量的 4 6 % .该酶的纯化可...
报道了带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达 ,SDS PAGE分析表明 ,带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的含量可占大肠杆菌细胞总蛋白质含量的 4 6 % .该酶的纯化可用常规的金属络合树脂一步纯化至SDS PAGE一条带 ,经凝血酶切去His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶与用等电聚焦法获得的无His tag的酶有相同的酶活性 .
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关键词
蛋白质表达
二氢叶酸还原酶
pet
—
db
载体
His—tag
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职称材料
题名
新载体pET-DB对带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的高效表达与纯化
1
作者
朱志勇
谭波
张文河
张洪杰
机构
北京师范大学生物化学与分子生物学系
中国科学院生物物理研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第7期655-658,共4页
基金
教育部留学回国人员科研启动基金 (No .0 3 9)
中国科学院生物物理研究所所长基金资助项目 (No.2 5 )~~
文摘
报道了带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达 ,SDS PAGE分析表明 ,带有His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的含量可占大肠杆菌细胞总蛋白质含量的 4 6 % .该酶的纯化可用常规的金属络合树脂一步纯化至SDS PAGE一条带 ,经凝血酶切去His tag的仓鼠二氢叶酸还原酶与用等电聚焦法获得的无His tag的酶有相同的酶活性 .
关键词
蛋白质表达
二氢叶酸还原酶
pet
—
db
载体
His—tag
Keywords
protein expression
dihydrofolate reductase
pet
-
db
vector
His-tag
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新载体pET-DB对带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的高效表达与纯化
朱志勇
谭波
张文河
张洪杰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004
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