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日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa抗原编码基因的核酸疫苗研究 被引量：6
1
作者 苏川 马磊 +7 位作者 王荣芝 邵莉君 吴海玮 沈蕾 范乐明 陈淑贞 张兆松 吴观陵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第6期6-10,共5页
为探索日本血吸虫（中国大陆株）２２．６ｋＤａ 抗原（Ｓｊ２２．６）编码基因用作核酸疫苗的可行性，将ｐＣＭＶ／Ｓｊ２２．６基因重组质粒经肌肉注射免疫了一批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠并进行攻击感染试验，结果表明此重组质粒能在小鼠体... 为探索日本血吸虫（中国大陆株）２２．６ｋＤａ 抗原（Ｓｊ２２．６）编码基因用作核酸疫苗的可行性，将ｐＣＭＶ／Ｓｊ２２．６基因重组质粒经肌肉注射免疫了一批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠并进行攻击感染试验，结果表明此重组质粒能在小鼠体内持续存在、稳定表达并诱导小鼠产生特异性的抗Ｓｊ２２．６ 抗体。 展开更多
关键词 日本血吸虫 pcmv-β 核酸疫苗 编码基因 Sj22.6
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日本血吸虫(中国大陆株)22.6 ku抗原编码基因的核酸疫苗pCMV/Sj22.6的构建 被引量：2
2
作者 苏川 马磊 +3 位作者 范乐明 陈淑贞 张兆松 吴观陵 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第5期349-352,共4页
目的　探索日本血吸虫 (中国大陆株 ) 2 2 .6ku抗原 ( Sj2 2 .6)编码基因用作核酸疫苗的可行性。方法　用新设计的引物以 PCR法对 Sj2 2 .6编码基因进行改造 ,然后亚克隆入真核表达载体 p CMV -β并转化入大肠杆菌 JM 10 9。结果　提取... 目的　探索日本血吸虫 (中国大陆株 ) 2 2 .6ku抗原 ( Sj2 2 .6)编码基因用作核酸疫苗的可行性。方法　用新设计的引物以 PCR法对 Sj2 2 .6编码基因进行改造 ,然后亚克隆入真核表达载体 p CMV -β并转化入大肠杆菌 JM 10 9。结果　提取重组质粒经酶切分析 ,筛选出了含有正向插入片段的阳性重组质粒。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原 pcmv-β 核酸疫苗 编码
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真核细胞表达质粒pCMV4增强hCGβ-C3d3DNA疫苗的表达效率和免疫效力 被引量：4
3
作者 赵欣荣 李大金 +1 位作者 蔡立荣 孙晓溪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期228-230,共3页
目的 :比较以pCMV4和pcDNA3为载体的hCGβ C3d3DNA疫苗的表达效率和免疫效力。 方法 :分别构建pcD NA3 hCGβ C3d3、pCMV4 hCGβ C3d3真核细胞表达质粒 ,并转染真核细胞瞬时表达系统COS 7细胞 ,以分析体外表达效率。抽提与纯化pcDNA3、... 目的 :比较以pCMV4和pcDNA3为载体的hCGβ C3d3DNA疫苗的表达效率和免疫效力。 方法 :分别构建pcD NA3 hCGβ C3d3、pCMV4 hCGβ C3d3真核细胞表达质粒 ,并转染真核细胞瞬时表达系统COS 7细胞 ,以分析体外表达效率。抽提与纯化pcDNA3、pcDNA3 hCGβ C3d3、pCMV4 hCGβ C3d3质粒。对 6周龄BLAB C小鼠行DNA免疫。于末次免疫后 6周采血 ,用间接ELISA分析实验动物外周血抗hCGβ抗体效价。 结果 :对COS 7体外表达效率分析 ,由pCMV4介导的hCGβ C3d3表达效率明显高于pcDNA3。动物DNA免疫结果 ,pCMV4 hCGβ C3d3刺激动物机体产生的免疫应答强度及免疫效果显著高于pcDNA3 hCGβ C3d3。 结论 :pCMV4真核表达质粒hCGβ C3d3体外表达效率及动物DNA免疫效力均显著高于pcDNA3真核表达质粒。 展开更多
关键词 pcmv4-hCGβ-C3d3 pcDNA3-hCGβ-C3d3 表达效率 免疫效力 DNA免疫
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透明质酸酶和油酸增强外源基因在机体内的表达
4
作者 任智慧 朱开春 +3 位作者 金华利 江睿 张富春 王宾 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期59-63,共5页
以研究外源基因有效发送至靶细胞并高效表达为目的,为了获得能提高外源基因在机体内表达量的增强剂,以pCMVβ-gal作为报告基因,分别辅以油酸和透明质酸酶两种不同的生化试剂,注射小鼠后肢腿部肌肉。通过检测在两种不同的生化试剂作用下,... 以研究外源基因有效发送至靶细胞并高效表达为目的,为了获得能提高外源基因在机体内表达量的增强剂,以pCMVβ-gal作为报告基因,分别辅以油酸和透明质酸酶两种不同的生化试剂,注射小鼠后肢腿部肌肉。通过检测在两种不同的生化试剂作用下,pCMVβ-gal在机体内表达量的差异,以期获得能提高外源基因表达量的增强剂。结果证明油酸和透明质酸酶均能有效提高pCMVβ-gal在小鼠体内的表达量,其中透明质酸酶引起的增强效果更为显著,是较好的基因表达增强剂。 展开更多
关键词 pcmvβ-gal 体内表达 油酸 透明质酸酶 表达增强剂 外源基因 体内 生化试剂 表达量 增强剂
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hCGβ真核表达载体的构建和瞬时表达筛选
5
作者 张富春 王妮 +3 位作者 陈幼珍 沈孝宙 曹咏清 王宾 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第5期3-5,共3页
为探讨人绒毛膜促性腺激素 β亚基 (hCGβ)基因避孕疫苗的可能性。利用DNA重组技术将hCGβ的基因片段连接到真核表达载体pCMV4上 ,酶切分析鉴定正确构建了质粒DNApCMV4 -hCGβ。将质粒DNApCMV4 -hCGβ通过脂质体转染的方法导入体外培养... 为探讨人绒毛膜促性腺激素 β亚基 (hCGβ)基因避孕疫苗的可能性。利用DNA重组技术将hCGβ的基因片段连接到真核表达载体pCMV4上 ,酶切分析鉴定正确构建了质粒DNApCMV4 -hCGβ。将质粒DNApCMV4 -hCGβ通过脂质体转染的方法导入体外培养的Hela细胞 ,双抗夹心ELISA法检测质粒DNApCMV4 -hCGβ在Hela细胞瞬时表达系统中特异性的表达了hCGβ。结果表明hCGβ表达含量 2 4h为 6 78ng/ml,4 8h为 1 5 2 4ng/ml,说明在体外瞬时表达了特异性hCGβ的pCMV4 -hCGβ真核表达载体能够作为DNA疫苗使用 ,为pCMV4 -hCGβ质粒DNA免疫小鼠进行DNA避孕疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 HCGβ 真核表达载体 构建 瞬时表达 筛选
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