p15^INK4B甲基化与骨髓增生异常综合征患者预后及地西他滨疗效的关系 被引量：6

1

作者 张耀 宋陆茜 +2 位作者 吴凌云 常春康 李晓 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期237-241,共5页

目的通过检测初诊骨髓增生异常综合征（MDS）患者p15^INK4B甲基化水平，观察地西他滨治疗前、后p15^INK4B甲基化状态变化，探讨p15“啪甲基化水平与预后的关系及其对地西他滨疗效的影响。方法261例初诊MDS患者，其中男143例，女118例，... 目的通过检测初诊骨髓增生异常综合征（MDS）患者p15^INK4B甲基化水平，观察地西他滨治疗前、后p15^INK4B甲基化状态变化，探讨p15“啪甲基化水平与预后的关系及其对地西他滨疗效的影响。方法261例初诊MDS患者，其中男143例，女118例，中位年龄52（32—78）岁。低危组172例（低危104例、中危-168例），高危组89例（中危-252例、高危37例）。收集患者骨髓单个核细胞，采用甲基化特异性PCR（MSP）检测p15^INK4B甲基化水平，按p15^INK4B甲基化程度对患者进行生存分析。采用MSP方法分别检测58例MDS患者地西他滨治疗前及治疗2个疗程后骨髓p15^INK4B甲基化水平，分析p15^INK4B甲基化对地西他滨疗效的影响。结果低危组患者p15^INK4B甲基化水平明显低于高危组患者（117．22对157．63，P〈0．05）。p15^INK4B甲基化阳性患者2年预期生存（OS）率低于阴性患者（69．8％对91．8％，P〈0．05）；在低危组，p15^INK4B甲基化阳性患者2年预期OS率低于阴性患者（78．2％对92．0％，P〈0．05）；在高危组，p15^INK4B甲基化阳性患者OS率及中位0S时间与阴性患者比较差异无统计学意义[35．6％对38．5％，（17．0±9．3）个月对（18．0±5．7）个月，P〉0．05]。COX分析结果显示p15^INK4B甲基化水平是OS时间的独立预后因素。治疗前p15^INK4B甲基化阳性组患者地西他滨治疗的总反应率及完全缓解率与阴性组比较差异无统计学意义（65．9％对76．5％，22．0％对29．4％，P〉0．05）。地西他滨治疗有效组p15^INK4B甲基化水平在治疗前、后差异无统计学意义（P〉0．05）。结论初诊时p15^INK4B甲基化水平高的MDS患者生存时间更短，但p15^INK4B甲基化水平对地西他滨疗效无明显影响。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 基因 ^p15^ink4b 甲基化 预后 地西他滨

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P15^(INK4B)高表达对人黑色素瘤细胞G1/S进程的阻滞及与MAPK信号相关性之初探 被引量：2

2

作者 刘军 柳惠图 +1 位作者 谭信 高萍 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期232-236,共5页

利用TdR-N_2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了P15^(IN... 利用TdR-N_2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了P15^(INK4B)对G_1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G_1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低。相反,P27^(KIP1)的表达却上升。同时探讨了MAPK信号在P15^(INK4B)阻抑A375细胞G_1/S转换中的作用与相关性,结果显示晚G_1期的MLIK6细胞中ERK1,ERK2水平变化不大,而具有活性的P-ERK1和P-ERK2均表现出下降。上述实验表明,P15^(INK4B)可能通过作用于G_1期相关的周期调节蛋白和抑制ERK1和ERK2活性,阻滞G_1/S转换与抑制DNA合成。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b 高表达 人黑色素瘤细胞 G1/S进程 阻滞 MApK信号相关性 细胞周期

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p15^(INK4B)基因转染对人食管鳞癌细胞EC109增殖的抑制作用 被引量：2

3

作者 张学彦 刘铁夫 +2 位作者 于旸 刘伟 崔希威 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1945-1950,共6页

目的:探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用PCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的P15蛋白变化:流... 目的:探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用PCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的P15蛋白变化:流式细胞仪分析细胞周期变化,应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响.结果:p15转染细胞存在外源p15基因,并有P15蛋白高表达;EC109-p15细胞生长速度低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组,集落形成率显著低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组(20.8±1.3%vs54.3±3.2%,56.8±2.3%,P<0.01);流式细胞仪观察到P15蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(62.4±7.1%vs38.0±5.8%,34.4±1.0%,P<0.01),S期比例显著低于空载体组和未转染组(21.1±1.3%vs35.5±2.4%,36.3±0.7%,P<0.01),并出现亚G1峰(凋亡峰).透射电镜亦发现p15转染组发生细胞凋亡.结论:p15基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡. 展开更多

关键词 ^p15^ink4b 基因转染 食管鳞癌 食管鳞癌细胞 EC109 细胞增殖 抑制作用 流式细胞仪分析 p15基因 p15蛋白

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多发性骨髓瘤中p15^(INK4B)和p16^(INK4A)基因高甲基化的检测 被引量：1

4

作者 范洪涛 郭秀枝 +6 位作者 吴穷 周涛 谭广销 王绿娅 张学莉 罗更新 许敏华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期271-274,共4页

为探索p15 INK4B和p16INK4A基因在多发性骨髓瘤中的甲基化的表达 ,采用敏感的甲基化特异的MSP PCR测定方法 ,检测了 2 4例多发性骨髓瘤 (MM ) p15 INK4B和p16INK4A基因甲基化的情况。结果显示 ,MM中 p15 INK4B和 p16INK4A基因甲基化发... 为探索p15 INK4B和p16INK4A基因在多发性骨髓瘤中的甲基化的表达 ,采用敏感的甲基化特异的MSP PCR测定方法 ,检测了 2 4例多发性骨髓瘤 (MM ) p15 INK4B和p16INK4A基因甲基化的情况。结果显示 ,MM中 p15 INK4B和 p16INK4A基因甲基化发生率分别为 70 .8% (17/ 2 4 )和 5 8.3% (14/2 4 ) ,产物分别为 148bp和 15 0bp的片段 ,其中 2例Ⅱ期和 2例Ⅲ期的有浆细胞瘤的MM患者发生 2个基因同时甲基化 ,有 5例 2个基因都没有发生甲基化。这 5例的瘤细胞均为分化较成熟的小浆细胞。结论提示 ,p15 INK4B和 p16INK4A基因甲基化在MM细胞中有一定的发生率 。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 甲基化 ^p15^ink4b 基因 ^p16^ink4A

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亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15^(INK4B)基因的表达 被引量：2

5

作者 张学彦 刘铁夫 +1 位作者 刘伟 崔希威 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第19期1859-1863,共5页

目的：研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15^(INK4B)(p15)基因表达的影响．方法：终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异PCR(MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化... 目的：研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15^(INK4B)(p15)基因表达的影响．方法：终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异PCR(MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化,采用RT-PCR和Western blot方法检测As_2O_3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况．用Scion Image软件测量条带灰度值,P15蛋白与ACTB条带的灰度比进行半定量分析．结果：EC109细胞p15基因发生高甲基化,p15基因不表达．As_2O_3作用后p15基因甲基化程度明显下降,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(37．11±3．62,50．92±5．47,72．07±7．53 vs 97．23±9．80,P＜0．05)．As_2O_3作用24 h后出现p15 mRNA表达,随As_2O_3作用时间延p15 mRNA表达逐渐增强,各个时间组之间比较,除了未加药组和加药24 h组之间及加药24 h组和加药48 h组之间差异无统计学意义外,其余各个时间组之间差异有统计学意义(0．72±0．07 vs 0．58±0．06 vs 0．48±0．07 vs 0．41±0．08,P＜0．05)．As_2O_3作用24 h后P15蛋白出现表达,2μmol/L作用24-72 h中P15蛋白条带灰度逐渐增强,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(0．51±0．02 vs 0．21±0．01 vs 0．16±0．02 vs 0．06±0．01,P＜0．05),说明其表达随As_2O_3作用时间延长而逐渐增强．结论：As_2O_3可使食管癌EC109细胞p15基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制细胞周期进程． 展开更多

关键词 亚砷酸 ^p15^ink4b 甲基化 食管癌

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P15^(INK4B)和P16^(INK4A)基因在鼻咽癌组织中异常甲基化

6

作者 倪海峰 莫颖禧 +2 位作者 周晓莹 黄光武 张哲 《中国药物与临床》 CAS 2008年第6期440-442,共3页

目的通过检测P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生发展及临床病理特征关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻... 目的通过检测P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生发展及临床病理特征关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化状态进行检测。结果鼻咽癌组织中P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化阳性率分别为22%(12/54)和46%(25/54),二者总检出率为48%(26/54),26例甲基化的癌组织同时出现二者甲基化为11例;而在正常鼻咽上皮组织中未检测到P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化。结论P15INK4B和P16INK4A基因启动子区甲基化与患者临床病理特征无明显相关关系,为鼻咽癌早期事件,有望成为早期分子生物学诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点。二者在鼻咽癌发生发展中可能存在协同作用。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 ^p15^ink4b ^p16^ink4A甲基化

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CKIp15^(INK4B)相关新基因p15rs对HeLa细胞增殖影响的初探 被引量：1

7

作者 汪娟 柳惠图 +2 位作者 何大澄 高萍 常智杰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期259-262,共4页

目的　探讨新克隆的CKIp15 INK4B 相关基因p15rs对细胞增殖的作用。　方法　克隆p15rs编码区cDNA ,通过基因转染技术将其导入HeLa细胞 ,检测细胞的生长曲线 ,细胞周期和集落形成能力。　结果　构建了p15rs高表达的细胞模型HPS2 1,发现p1... 目的　探讨新克隆的CKIp15 INK4B 相关基因p15rs对细胞增殖的作用。　方法　克隆p15rs编码区cDNA ,通过基因转染技术将其导入HeLa细胞 ,检测细胞的生长曲线 ,细胞周期和集落形成能力。　结果　构建了p15rs高表达的细胞模型HPS2 1,发现p15rs高表达可使HeLa细胞增殖被显著抑制 ,细胞生长速率下降 ,倍增时间延长 ,G1 期细胞增加 ,S期细胞减少 ,集落形成能力下降。　结论　新基因p15rs具有抑制癌细胞增殖和对细胞周期进程进行负调节的作用。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b p15rs基因转染 HELA细胞 肿瘤抑制

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p15^(INK4B)和p21^(WAF1)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109的协同抑制作用 被引量：1

8

作者 张学彦 刘志强 +4 位作者 景德怀 关景明 刘伟 刘铁夫 刘冰熔 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第30期3086-3091,共6页

目的:探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot... 目的:探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞P15和P21蛋白的表达.用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对EC109细胞增殖与凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布与凋亡率.结果:p15和p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组与未转染组,联合转染组与二者单独转染组相比,亦明显抑制EC109细胞体外生长速度.p15和p21转染组EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期则显著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89%vs42.17%±5.30%,41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03%vs30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均P<0.01),并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡,联合转染组发生更为明显的G1/S阻滞,G1期比例显著升高、S期比例明显降低(G1期:72.83%±2.31%vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%;S期:13.59%±2.59%vs22.67%±1.25%,17.96%±2.03%,均P<0.05),凋亡率明显升高(21.21%±1.78%vs4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均P<0.01).结论:p15和p21基因联合转染在体外可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制与诱导凋亡作用. 展开更多

关键词 ^p15^ink4b ^p2^1WAF1 基因转染 食管鳞癌

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鸡p15^(INK4B)基因的克隆表达及纯化 被引量：1

9

作者 艾永兴 张玉静 +3 位作者 胡薇 郝军元 邹亚学 张英波 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期453-457,461,共6页

为研究鸡p15INK4B蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,应用引物搭桥法合成p15INK4B基因,应用基因工程的手段构建p15INK4B基因的原核表达载体,在E.coliRosetta(DE3)菌进行融合表达,并对表达产物进行亲和层析纯化。结果成功地... 为研究鸡p15INK4B蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,应用引物搭桥法合成p15INK4B基因,应用基因工程的手段构建p15INK4B基因的原核表达载体,在E.coliRosetta(DE3)菌进行融合表达,并对表达产物进行亲和层析纯化。结果成功地构建了p15INK4B基因原核表达载体,经亲和层析制备了较高纯度的目的表达产物。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b 细胞周期 原核表达 亲和层析 鸡

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p15^(INK4B)基因转染联合TGF-β_1对人食管鳞癌的抑制作用 被引量：1

10

作者 张学彦 刘铁夫 +1 位作者 于旸 崔希威 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期1165-1168,共4页

目的:探讨p15INK4B基因转染与TGF-β1联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法:脂质体介导将pCDNA3.1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入10ng/ml的TGF-β1。PCR检测外源p15基因,Westernblot检测转染细胞P15蛋白的... 目的:探讨p15INK4B基因转染与TGF-β1联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法:脂质体介导将pCDNA3.1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入10ng/ml的TGF-β1。PCR检测外源p15基因,Westernblot检测转染细胞P15蛋白的变化。用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测p15转染TGF-β1对EC109增殖和凋亡的影响。结果:联合应用与二者单独应用相比,明显抑制EC109生长速度,集落形成率显著降低(P<0.01),发生G1/S阻滞,G1期比例显著升高(P<0.05),S期比例明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.01)。透射电镜发现二者联合应用诱导EC109发生明显的细胞凋亡。结论:p15基因转染与TGF-β1联合应用可以进一步增强对食管鳞癌EC109细胞的抑制作用并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b 基因转染 TGF-β1食管鳞癌

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地西他滨联合三氧化二砷对肝癌SMMC-7721细胞株P15^(INK4B)及甲基化转移酶表达的影响 被引量：1

11

作者 边祥海 孙贵富 《浙江中西医结合杂志》 2018年第11期924-927,共4页

目的探讨地西他滨(DAC)和三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌SMMC-7721细胞株P15^(INK4B)抑癌基因及甲基化转移酶表达的影响。方法 MTT方法检测地西他滨和三氧化二砷对SMMC-7721细胞株的抑制率。RT-PCR方法检测P15^(INK4B)、DNA甲基转移酶1(DNM... 目的探讨地西他滨(DAC)和三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌SMMC-7721细胞株P15^(INK4B)抑癌基因及甲基化转移酶表达的影响。方法 MTT方法检测地西他滨和三氧化二砷对SMMC-7721细胞株的抑制率。RT-PCR方法检测P15^(INK4B)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达。结果 2.0mmol/LDAC和2.0μmol/L As_2O_3联用,肝癌SMMC-7721细胞株细胞增殖抑制率均较4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组增强[(72h:(69.9±1.2)%比(33.8±0.7)%、(47.9±2.5)%,P<0.05)]。地西他滨和As_2O_3作用细胞72h后P15^(INK4B)抑癌基因表达增强,联合组同4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组比较,差异有统计学意义[(0.74±0.14)比(0.57±0.15)、(0.56±0.11),P<0.05];甲基化转移酶表达水平下调,联合组同4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组比较,差异有统计学意义[DNMT3A:(0.28±0.11)比(0.36±0.13)、(0.41±0.13),P<0.05;DNMT3B:(0.32±0.13)比(0.39±0.12)、(0.45±0.16),P<0.05;DNMT1:(0.31±0.15)比(0.44±0.19)、(0.44±0.12),P<0.05]。结论地西他滨和三氧化二砷可能通过抑制肝癌SMMC-7721细胞株甲基化转移酶,增加P15^(INK4B)基因表达来抑制肝癌细胞增殖。 展开更多

关键词 肝癌SMMC-7721细胞株 地西他滨 三氧化二砷 ^p15^ink4b 甲基化转移酶

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骨髓增生异常综合征患者p15^(INK4B)基因甲基化状态的研究 被引量：1

12

作者 王亚屏 宋强 +2 位作者 李丽珍 赵川莉 王鲁群 《临床血液学杂志》 CAS 2009年第6期571-573,共3页

目的:检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者抑癌基因p15INK4B启动子区异常甲基化情况及其mRNA表达水平,探讨p15INK4B基因异常甲基化在MDS发生、发展中的作用。方法:应用甲基化特异性PCR检测32例MDS患者骨髓p15IN... 目的:检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者抑癌基因p15INK4B启动子区异常甲基化情况及其mRNA表达水平,探讨p15INK4B基因异常甲基化在MDS发生、发展中的作用。方法:应用甲基化特异性PCR检测32例MDS患者骨髓p15INK4B基因启动子区甲基化状态,逆转录PCR(RT-PCR)检测p15mRNA表达情况。结果:32例MDS患者骨髓有14例检测到p15INK4B基因启动子甲基化(甲基化阳性率为43.8%),且多为高危型患者。MDS患者骨髓p15mRNA表达水平明显降低。MDS患者p15INK4B基因启动子甲基化与p15mRNA表达缺失具有明显的相关性。结论:MDS中p15INK4B基因启动子高甲基化与基因表达失活密切相关,并在MDS的发生、发展中有重要作用。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 基因 ^p15^ink4b DNA甲基化 CpG岛

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糖皮质激素对肿瘤细胞TGF-β1Ⅱ型受体的上调作用及其生物学意义

13

作者 李宗斌 卢建（指导老师） 《世界急危重病医学杂志》 2006年第3期1264-1266,共3页

【论文特点介绍】本文运用了多种分子生物学方法，以人前列腺癌PC-3细胞为细胞模型，研究了糖皮质激素对转化生长因子β（TGF-β）信号转导通路的影响及其与糖皮质激素抑制肿瘤细胞增殖的作用的关系．该研究对于阐述糖皮质激素抑制细胞... 【论文特点介绍】本文运用了多种分子生物学方法，以人前列腺癌PC-3细胞为细胞模型，研究了糖皮质激素对转化生长因子β（TGF-β）信号转导通路的影响及其与糖皮质激素抑制肿瘤细胞增殖的作用的关系．该研究对于阐述糖皮质激素抑制细胞增殖效应的信号通路具有重要的理论价值，对肿瘤的干预治疗具有潜在的研究意义。 展开更多

关键词 肿瘤细胞增殖 糖皮质激素 TGF-β1Ⅱ型受体 生物学意义 上调作用 分子生物学方法 转化生长因子β pC-3细胞 信号转导通路 人前列腺癌

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骨髓增生异常综合征P15^(INK4B)基因甲基化及药物去甲基化作用 被引量：9

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作者 叶雪石 刘霆 +2 位作者 崔旭 孟文彤 席亚明 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期57-59,共3页

目的检测骨髓增生异常综合征(M DS)患者P 15INK 4B基因甲基化状况;探讨5-氮杂-2′-脱氧胞嘧啶(dec itab ine)和三氧化二砷(A s2O3)对M DS患者细胞的去甲基化作用。方法采用限制性内切酶联合PCR方法检测14例M DS患者P 15INK 4B基因甲基化... 目的检测骨髓增生异常综合征(M DS)患者P 15INK 4B基因甲基化状况;探讨5-氮杂-2′-脱氧胞嘧啶(dec itab ine)和三氧化二砷(A s2O3)对M DS患者细胞的去甲基化作用。方法采用限制性内切酶联合PCR方法检测14例M DS患者P 15INK 4B基因甲基化,选择1例由M DS转化为急性白血病患者的外周血单个核细胞,分组分别加入dec itab ine和A s2O3进行处理,分析甲基化程度变化情况。结果低危组M DS患者(RCM D)均未发现P 15INK 4B基因甲基化,4例高危组M DS患者(RAEB)和4例M DS-AL患者发现P 15INK 4B基因甲基化。经dec itab ine和A s2O3处理后,M DS患者细胞的甲基化程度均降低50%左右。结论M DS的发生与P 15INK 4B基因甲基化密切相关,dec itab ine和A s2O3均对M DS患者细胞高度甲基化的P 15INK 4B基因具明显去甲基化作用。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 ^p15^ink4b基因甲基化 5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶 三氧化二砷

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Hypermethylation of the p15INK4B gene in acute leukemia and myelodysplastic syndromes 被引量：5

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作者 陈华 武淑兰 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第7期987-990,共4页

目的探讨p15INK4B基因甲基化在急性白血病（AL）的发病及骨髓增生异常综合征（MDS）向白血病转化中的模式及意义。 方法甲基化特异性聚合酶链反应法（MSP）检测49例AL和22例MDS患者p15INK4B基因CpG岛甲基化模式。结果　90%（26/29）初... 目的探讨p15INK4B基因甲基化在急性白血病（AL）的发病及骨髓增生异常综合征（MDS）向白血病转化中的模式及意义。 方法甲基化特异性聚合酶链反应法（MSP）检测49例AL和22例MDS患者p15INK4B基因CpG岛甲基化模式。结果　90%（26/29）初发AL中检出p15INK4B基因的高甲基化，其中46%为完全甲基化，54%为部分甲基化；3例MDS转化的AL和9例复发AL全部检出p15INK4B基因甲基化，且完全甲基化的比例分别占67%和56%；11例缓解期AL患者中仅5例（2例完全缓解，3例部分缓解）检出部分甲基化45%）。初/复发组p15INK4B基因甲基化发生率明显高于缓解组（P=0.002）。13例低危MDS（RA/RAS）患者中5例（38%）检出p15INK4B基因甲基化，且80%为部分甲基化；而高危组(RAEB/RAEB-T)9例全部检出p15INK4B甲基化，且完全甲基化占56%，与低危MDS组有显著性差异（P=0.002）。结论　p15INK4B基因高甲基化频发于白血病和高危MDS，可能与白血病及MDS的发病和发展有关，并可能作为检测微小残留病、预测AL复发及MDS向白血病转化的分子标志。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b抑癌基因 DNA甲基化 急性白血病 骨髓增生异常综合征

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尿多酸肽对高危组骨髓增生异常综合征细胞株p15^(INK4B)基因的去甲基化作用 被引量：5

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作者 王晓丹 刘科宇 +4 位作者 卢润章 韩冰虹 展昭民 马军 邱林 《黑龙江医学》 2007年第12期883-885,共3页

目的探讨尿多酸肽(CDA-2)对高危组骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株p15INK4B基因的去甲基化作用。方法检测不同浓度CDA-2作用下,MDS-RAEB细胞株MuTz-1的细胞存活率(MTT法);p15INK4B基因、甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表达(R... 目的探讨尿多酸肽(CDA-2)对高危组骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株p15INK4B基因的去甲基化作用。方法检测不同浓度CDA-2作用下,MDS-RAEB细胞株MuTz-1的细胞存活率(MTT法);p15INK4B基因、甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表达(RT-PCR);p15INK4B基因甲基化程度(甲基化特异PCR,MSP)。结果CDA-2呈剂量依赖性抑制MuTz-1细胞生长;伴随CDA-2剂量增加,p15INK4B基因甲基化程度逐渐减弱,其mRNA表达逐渐增加;且CDA-2可显著降低MuTz-1细胞中DNMT1和DNMT3BmRNA的表达。结论CDA-2可能通过下调DNMT1和DNMT3BmRNA表达使p15INK4B基因甲基化程度下降,恢复其在细胞周期中的调节作用,进而抑制MDS细胞的过度增殖。 展开更多

关键词 尿多酸肽 骨髓增生异常综合征 MUTZ-1细胞 ^p15^ink4b基因

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p15^(INK4B)基因甲基化在急性粒细胞白血病和慢性粒细胞白血病中的研究 被引量：2

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作者 郭秀枝 范洪涛 +8 位作者 吴穷 周涛 郭秋野 陈鹏 许敏华 张学莉 罗更新 肖扬 梁实 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期266-270,共5页

为探索 p15 INK4B基因在CpG岛高甲基化对白血病发病机制的重要作用 ,应用敏感的甲基化特异的MSP PCR的测定方法 ,测定了 p15 INK4B基因在急性粒细胞白血病 (AML)和慢性粒细胞白血病 (CML)中甲基化的表达变化。研究结果表明 ,p15 INK4B... 为探索 p15 INK4B基因在CpG岛高甲基化对白血病发病机制的重要作用 ,应用敏感的甲基化特异的MSP PCR的测定方法 ,测定了 p15 INK4B基因在急性粒细胞白血病 (AML)和慢性粒细胞白血病 (CML)中甲基化的表达变化。研究结果表明 ,p15 INK4B基因操纵区在AML和CML中的甲基化发生率分别为 83.9% (2 6/ 31)和 0 % (0 / 2 8)。结论提示 :甲基化是p15 INK4B基因在AML中主要的失活方式之一 ,并可在病程进展中出现甲基化 ,使病情加重 ;在CML中无甲基化的发生 ,说明p15 展开更多

关键词 ^p15^ink4b基因 甲基化 急性 粒细胞白血病 慢性

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p15^(INK4b)基因异常与骨髓增生异常综合征 被引量：3

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作者 王震 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期362-365,共4页

在肿瘤抑制基因中,p15^(INK4b)基因由于在骨髓增生异常综合征(MDS)演进过程中的重要作用而逐渐受到关注。系列的研究表明,随着MDS向AML的演进,p15^(INK4b)基因由于其外显子1启动子区的5’CpG岛发生高度甲基化而失活。这种类型的甲基化限... 在肿瘤抑制基因中,p15^(INK4b)基因由于在骨髓增生异常综合征(MDS)演进过程中的重要作用而逐渐受到关注。系列的研究表明,随着MDS向AML的演进,p15^(INK4b)基因由于其外显子1启动子区的5’CpG岛发生高度甲基化而失活。这种类型的甲基化限于MDS细胞克隆,用甲基化特异性PCR法可较为敏感地将其检测到。p15^(INK4b)基因的失活抑制了细胞因子如Fas抗原、TGF-β和碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)蛋白介导的细胞凋亡。由于p15^(INK4b)基因甲基化与MDS的密切关系,调节其甲基化状态可能会成为治疗MDS的一个新途径。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 基因甲基化 MDS 基因缺失 基因突变 ^p15^ink4b基因

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DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨对SKM-1细胞P15^(INK4B)基因甲基化状态的影响 被引量：2

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作者 丁倩倩 陈勤奋 王小钦 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期509-513,共5页

目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(DAC)对骨髓增生异常综合征(MDS)转白血病细胞株SKM-1 P15INK4B基因甲基化状态的影响。方法对数生长期的SKM-1细胞设4组,每组1×106个细胞,其中3组为DAC处理组,分别以1.5、3.0和6.0μmol/L DAC... 目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(DAC)对骨髓增生异常综合征(MDS)转白血病细胞株SKM-1 P15INK4B基因甲基化状态的影响。方法对数生长期的SKM-1细胞设4组,每组1×106个细胞,其中3组为DAC处理组,分别以1.5、3.0和6.0μmol/L DAC处理SKM-1细胞48 h,另1组未加DAC的SKM-1细胞培养48 h作为对照组。甲基化特异性PCR(MSP)检测各组细胞P15INK4B基因甲基化情况,实时荧光RT-PCR相对定量法检测P15INK4B基因mRNA表达情况,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)法检测细胞增殖抑制情况,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡情况。结果 1)对照组SKM-1细胞的P15INK4B基因完全甲基化,3个DAC处理组的甲基化条带逐渐变浅,非甲基化条带出现并逐步加深;2)P15INK4B基因mRNA表达水平:对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为1.00±0.12与0.91±0.13、0.51±0.06、0.43±0.04(P<0.05),3个DAC处理组之间差异甚微(P>0.05);3)CFSE平均荧光强度(MFI):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为51.67±1.61与55.33±2.28、56.33±2.50、55.71±2.87,仅3.0μmol/L组较对照组变化较明显(P<0.05),而各DAC处理组之间变化差异很小(P>0.05);4)G1期细胞比例(%):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为55.78±3.61与48.12±2.93、51.69±1.60、46.71±1.54,S期细胞比例(%):4个组分别为44.22±3.61与51.88±2.93、48.31±1.60、53.29±1.54,其中1.5、6.0μmol/L组较对照组变化较明显(P<0.05),而DAC各处理组中,6.0与3.0μmol/L组之间具明显差异(P<0.05);5)早期凋亡率(%):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为2.91±0.26与7.77±0.22、12.45±0.28、13.86±0.27(P<0.05),DAC各处理组没有明显变化(P<0.05)。结论 DAC能逆转SKM-1细胞的P15INK4B基因完全甲基化状态,在一定程度上抑制SKM-1细胞的增殖,使细胞分化阻滞在S期,同时促进细胞凋亡,并随DAC浓度的增加而� 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 SKM-1细胞 ^p15^ink4b基因 DNA异常甲基化 DNA甲基转移酶抑制剂 地西他滨

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p15^(INK4B)基因转染联合亚砷酸对人食管鳞癌的协同抑制作用 被引量：1

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作者 刘铁夫 张学彦 +1 位作者 孙丽萍 于旸 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期610-613,共4页

目的探讨p15^(INK4B)(p15)基因转染与亚砷酸(As_2O_3)联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体介导将pcDNA3．1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入2μmol/LAs_2O_3。PCR检测外源p15基因cDNA,Western印迹法... 目的探讨p15^(INK4B)(p15)基因转染与亚砷酸(As_2O_3)联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体介导将pcDNA3．1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入2μmol/LAs_2O_3。PCR检测外源p15基因cDNA,Western印迹法检测转染细胞P15蛋白的表达。用MTT、集落形成实验和透射电镜检测p15基因转染联合As_2O_3对EC109细胞增殖和凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布和凋亡率。结果与二者单独应用相比,联合应用可明显抑制EC109细胞体外生长速度,集落形成率明显降低(P＜0．01),联合作用3d后发生更为明显的G_1/S阻滞,G_1期比例显著升高(P＜0．05),S期比例明显降低(P＜0．05),凋亡率明显升高(P＜0．01)。透射电镜发现二者联合应用诱导EC109发生更明显的细胞凋亡。结论p15基因转染与As_2O_3联合应用可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制作用和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 ^p15^ink4b基因 基因转染 亚砷酸 食管鳞癌

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