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Cloning and Expression Analysis of OsNADPH1 Gene from Rice in Drought Stress Response 被引量:3
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作者 CHEN Jing WAN Jia +4 位作者 JIANG Hua GAO Xiao-ling WANG Ping-rong XI Jiang Xu Zheng-jun 《Rice science》 SCIE 2006年第3期149-154,共6页
An experiment was conducted to compare the mRNA expression difference in rice leaves and roots under drought stress and normal conditions us, ng Fluorescent Differential Display (FDD) method. One positive fragment w... An experiment was conducted to compare the mRNA expression difference in rice leaves and roots under drought stress and normal conditions us, ng Fluorescent Differential Display (FDD) method. One positive fragment was isolated by combination of the H. A. Yellow-PAGE (cont,~ined 0.1% H. A. Yellow) separation and macroarray screening methods. Compared to Arabidopsis thaliana NADPH oxidoreductase gene, it has 96% identity. The cDNA was 1423 bp, and contained a complete open reading frame of 1048 bp encoding a protein with 345 amino acid residues. Moreover, the gene expression level was higher under drought stress than that under normal conditions. The possible role of NADPH oxidoreductase gene under drought response was also discussed. 展开更多
关键词 RICE drought stress NADPH oxidoreductase-like gene CLONING gene expression
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Silencing of DsbA-L gene impairs the PPARγagonist function of improving insulin resistance in a high-glucose cell model 被引量:1
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作者 Xuan ZHOU Jia-qi LI +5 位作者 Li-jie WEI Meng-zhou HE Jing JIA Jing-yi ZHANG Shao-shuai WANG Ling FENG 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2020年第12期990-998,共9页
Disulfide-bond A oxidoreductase-like protein(DsbA-L)is a molecular chaperone involved in the multimeri-zation of adiponectin.Recent studies have found that DsbA-L is related to metabolic diseases including gestational... Disulfide-bond A oxidoreductase-like protein(DsbA-L)is a molecular chaperone involved in the multimeri-zation of adiponectin.Recent studies have found that DsbA-L is related to metabolic diseases including gestational diabetes mellitus(GDM),and can be regulated by peroxisome proliferator-activated receptorγ(PPARγ)agonists;the specific mechanism,however,is uncertain.Furthermore,the relationship between DsbA-L and the novel adipokine chemerin is also unclear.This article aims to investigate the role of DsbA-L in the improvement of insulin resistance by PPARγagonists in trophoblast cells cultured by the high-glucose simulation of GDM placenta.Immunohistochemistry and western blot were used to detect differences between GDM patients and normal pregnant women in DsbA-L expression in the adipose tissue.The western blot technique was performed to verify the relationship between PPARγagonists and DsbA-L,and to explore changes in key molecules of the insulin signaling pathway,as well as the effect of chemerin on DsbA-L.Results showed that DsbA-L was significantly downregulated in the adipose tissue of GDM patients.Both PPARγagonists and chemerin could upregulate the level of DsbA-L.Silencing DsbA-L affected the function of rosiglitazone to promote the phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)-protein kinase B(PKB)/AKT pathway.Therefore,it is plausible to speculate that DsbA-L is essential in the environment of PPARγagonists for raising insulin sensitivity.Overall,we further clarified the mechanism by which PPARγagonists improve insulin resistance. 展开更多
关键词 Disulfide-bond A oxidoreductase-like protein(DsbA-L) Peroxisome proliferator-activated receptorγ(PPARγ) Chemerin Insulin signaling pathway Gestational diabetes mellitus
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一个水稻NADPH氧化还原酶相似基因的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 陈静 姜华 +4 位作者 万佳 高晓玲 王平荣 席江 徐正君 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期238-242,共5页
采用荧光差显(fluorescent differential display,FDD)技术,比较分析了干旱处理与未处理水稻叶片及根中的mRNA表达,并利用H.A.Yellow-PAGE(含0.1%H.A.Yellow)再分离与大矩阵(macroarray)筛选相结合的方法,发现1个与拟南芥NADPH氧化还原... 采用荧光差显(fluorescent differential display,FDD)技术,比较分析了干旱处理与未处理水稻叶片及根中的mRNA表达,并利用H.A.Yellow-PAGE(含0.1%H.A.Yellow)再分离与大矩阵(macroarray)筛选相结合的方法,发现1个与拟南芥NADPH氧化还原酶高度相似(96%)的差异片段。该基因的cDNA全长为1423bp,编码一个具有345个氨基酸残基的多肽。在正常情况下该基因表达量很低,而在干旱处理中高表达。讨论了干旱胁迫下NADPH氧化还原酶基因的可能功能。 展开更多
关键词 水稻 干旱胁迫 NADPH氧化还原酶相似基因 克隆 基因表达
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二硫键氧化还原酶类似蛋白的研究进展 被引量:1
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作者 杨文静 胡文秀 方启晨 《医学综述》 2014年第5期781-784,共4页
二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)是一个最近发现的与脂联素相互作用的关键蛋白,它具有明显上调高相对分子质量脂联素水平及增强胰岛素敏感性的重要功能。DsbA-L水平与肥胖症以及内质网应激呈负相关,并能缓解由内质网应激诱导的脂联素... 二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)是一个最近发现的与脂联素相互作用的关键蛋白,它具有明显上调高相对分子质量脂联素水平及增强胰岛素敏感性的重要功能。DsbA-L水平与肥胖症以及内质网应激呈负相关,并能缓解由内质网应激诱导的脂联素水平下降。因此,DsbA-L是一个具有广泛前途的药物新靶点,而有效地调节DsbA-L的表达可能为治疗各种代谢疾病提供一个新的途径。 展开更多
关键词 二硫键氧化还原酶类似蛋白 脂联素 内质网应激 肥胖
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白藜芦醇在调控二硫键氧化还原酶类似蛋白基因表达中的作用 被引量:1
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作者 杨文静 方启晨 +3 位作者 张菁 任伟 宋倩倩 贾伟平 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期765-769,共5页
目的探讨白藜芦醇对二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)基因转录的影响。方法将25μmol/L白藜芦醇加入HepG2细胞和3T3-L1细胞,干预24h后收获细胞,用于后续实验提取RNA和蛋白;以二甲基亚砜(DMSO)处理组作为对照。采用实时荧光定量聚合酶... 目的探讨白藜芦醇对二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)基因转录的影响。方法将25μmol/L白藜芦醇加入HepG2细胞和3T3-L1细胞,干预24h后收获细胞,用于后续实验提取RNA和蛋白;以二甲基亚砜(DMSO)处理组作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测3T3-L1细胞和HepG2细胞DsbA-L mRNA和蛋白表达水平。以荧光素酶报告基因实验分析白藜芦醇对DsbA-L基因启动子活性的影响。采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测白藜芦醇对转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子1区域Sp1结合位点的结合能力的影响。采用Western印迹法检测Sp1蛋白表达水平。结果在3T3-L1细胞和HepG2细胞中,白藜芦醇处理组DsbA-L蛋白和DsbA-L mRNA的表达水平均显著高于DMSO对照组(P值均<0.05)。白藜芦醇处理组的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc的相对荧光素酶活性显著高于DMSO对照组(P<0.05);与包含该Sp1结合位点的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc相比,不包含该Sp1结合位点的两个报告基因质粒,Sp1位点缺失突变的p(-186to+432)Luc mut和3’端部分缺失的p(-186to+391)Luc在白藜芦醇干预后的相对荧光素酶活性与DMSO对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与DMSO对照组相比,白藜芦醇处理后转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子区DNA特异结合形成的DNA-Sp1复合物的条带灰度减弱。白藜芦醇处理后3T3-L1细胞和HepG2细胞中Sp1的蛋白表达均显著低于DMSO对照组(P值均<0.05)。结论白藜芦醇通过抑制Sp1表达,上调DsbA-L基因的转录,从而促进DsbA-L蛋白的表达。 展开更多
关键词 白藜芦醇 二硫键氧化还原酶类似蛋白基因 启动子 SP1
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人二硫键氧化还原酶类似蛋白基因启动子克隆和上游抑制元件分析
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作者 陈淑芹 徐宜兰 +3 位作者 白宁宁 张菁 方启晨 贾伟平 《医学研究杂志》 2016年第9期76-81,共6页
目的克隆Dsb A-L基因启动子,并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Dsb A-L基因5'端2115bp片段(从翻译起始点ATG上游-2128^-14区域)。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic。随后,构建5'... 目的克隆Dsb A-L基因启动子,并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Dsb A-L基因5'端2115bp片段(从翻译起始点ATG上游-2128^-14区域)。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic。随后,构建5'端系列缺失的报告基因质粒。将构建的一系列质粒转染3T3-L1和HEK 293细胞,检测荧光素酶活性。利用在线软件MAPPER预测转录调控关键序列潜在的转录因子结合位点。通过Real-time PCR比较这些转录因子在肥胖和正常人脂肪组织中的表达。结果成功构建人Dsb A-L启动子报告基因质粒。系列缺失分析表明-2128^-1302区域是影响转录活性的关键序列。MAPPER软件预测此区域可能与一些转录因子结合。比较这些转录因子在肥胖患者和正常人脂肪组织中的表达情况,发现其中NF-κB和FOXO1在肥胖患者中表达显著增加,进一步推测NF-κB和FOXO1可能是人Dsb A-L基因启动子上游的调控抑制因子。结论成功构建人Dsb A-L基因启动子系列缺失质粒,初步分析了其上游可能存在的关键调控元件,为进一步的转录调控研究奠定了基础。 展开更多
关键词 二硫键氧化还原酶类似蛋白 转录调控 启动子
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二硫键A氧化还原酶样蛋白对脂联素的调控机制研究进展
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作者 刘旭东 沈震 +1 位作者 时彩红 邓鑫 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2014年第7期848-850,共3页
近年来,二硫键A氧化还原酶样蛋白作为一个新发现的分子伴侣已被证实与脂联素的分泌、合成及多聚化各个环节关系密切。部分研究发现,二硫键A氧化还原酶样蛋白能够促进脂联素的表达,Akt/FOXO1和AMPK信号途径在该蛋白对脂联素的调控机制中... 近年来,二硫键A氧化还原酶样蛋白作为一个新发现的分子伴侣已被证实与脂联素的分泌、合成及多聚化各个环节关系密切。部分研究发现,二硫键A氧化还原酶样蛋白能够促进脂联素的表达,Akt/FOXO1和AMPK信号途径在该蛋白对脂联素的调控机制中可能起到了关键作用。进一步明确二硫键A氧化还原酶样蛋白调控脂联素的机制,对寻找治疗糖尿病、非酒精性脂肪肝等代谢紊乱疾病的新靶点具有重要意义。 展开更多
关键词 二硫键A氧化还原酶样蛋白 脂联素 调控机制
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