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实时荧光PCR定量测定肉制品中羊源性成分 被引量：4
1
作者 张秀平 苗丽 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第7期119-123,130,共6页
为准确定量肉制品中羊源性成分的含量,以羊单拷贝基因为扩增靶基因,设计合成羊源的引物、探针,制备羊源和脊椎动物通用基因的重组质粒以构建标准曲线,通过方程算出各自的拷贝数,根据拷贝数的比值计算样品中羊肉源成分占总肉成分的百分... 为准确定量肉制品中羊源性成分的含量,以羊单拷贝基因为扩增靶基因,设计合成羊源的引物、探针,制备羊源和脊椎动物通用基因的重组质粒以构建标准曲线,通过方程算出各自的拷贝数,根据拷贝数的比值计算样品中羊肉源成分占总肉成分的百分比含量,建立荧光定量PCR检测体系,并对已知目标肉含量的混合肉样进行定量检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和灵敏度,最低检测到羊的DNA含量为0.02 ng/μL。对已知目标肉含量的混合肉样进行定量检测发现,羊肉掺入量为90%、50%时所得结果相对准确,相对标准偏差分别为5.69%和10.82%,且不受外源物种的干扰。本试验建立的定量PCR方法能够准确检测出不同样品中羊肉的含量,并发现存在掺假现象。 展开更多
关键词 实时荧光PCR 羊源性成分 肉制品 掺假
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饲料中羊源组织成分的PCR检测 被引量：1
2
作者 徐艳芳 琚春梅 +1 位作者 陈立军 赵明秋 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期90-93,共4页
应用Chelex-100快速提取动物基因组DNA的方法,并根据羊线粒体基因的核苷酸序列设计1对引物,通过对分离的DNA进行PCR扩增、基因克隆及核苷酸序列分析,实现了对动物源性饲料中羊组织成分的检测.结果显示,该方法对羊组织DNA检测的敏感性可... 应用Chelex-100快速提取动物基因组DNA的方法,并根据羊线粒体基因的核苷酸序列设计1对引物,通过对分离的DNA进行PCR扩增、基因克隆及核苷酸序列分析,实现了对动物源性饲料中羊组织成分的检测.结果显示,该方法对羊组织DNA检测的敏感性可达20.16 pgμ/L,当肉骨粉样品中含有质量分数为0.050%的羊源性成分时仍能检出,整个过程约需3 h. 展开更多
关键词 PCR检测 饲料 羊源成分
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饲料中牛、羊源性成分现场可视化检测方法的建立 被引量：4
3
作者 朱珠 兰青阔 +3 位作者 赵新 陈锐 郭永泽 王永 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期95-98,共4页
根据牛、羊线粒体中物种特异性序列设计引物,应用可视化环状等温扩增技术(visual loop-mediate isothermal amplification,vLAMP)对牛、羊源性成分进行快速扩增及可视化判断,同时建立牛、羊源成分人工污染的饲料模型,考察vLAMP检测方法... 根据牛、羊线粒体中物种特异性序列设计引物,应用可视化环状等温扩增技术(visual loop-mediate isothermal amplification,vLAMP)对牛、羊源性成分进行快速扩增及可视化判断,同时建立牛、羊源成分人工污染的饲料模型,考察vLAMP检测方法的灵敏度。结果表明,牛源性引物和羊源性引物仅分别对牛、羊源性成分产生特异性扩增,灵敏度高达0.001%。本试验所建立的牛、羊源性成分现场可视化筛查方法具有较高的特异性与灵敏度,操作简单、快速,可用于饲料中牛、羊源性成分污染和食品掺伪的现场可视化检测。 展开更多
关键词 牛、羊源性成分 环状等温扩增技术 现场可视化检测
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用分子生物学方法鉴别检测动物源性饲料中的牛羊源性成分 被引量：20
4
作者 杨宝华 宗卉 +1 位作者 林庆燕 俞火 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2002年第1期3-5,共3页
为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区反刍动物源性饲料进入我国 ,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们采用分子生物学方法从动物源性饲料中鉴别检测牛、羊特异性线粒体DNA的片段 ,并用限制性内切酶SspⅠ对PCR产物... 为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区反刍动物源性饲料进入我国 ,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们采用分子生物学方法从动物源性饲料中鉴别检测牛、羊特异性线粒体DNA的片段 ,并用限制性内切酶SspⅠ对PCR产物进行酶切鉴定及DNA序列测定。该方法的灵敏度可达 0 .12 5 % ,具有灵敏度高、快速和特异性强的优点。 展开更多
关键词 鉴别 检测 牛源性成分 羊源性成分 聚合酶链反应 动物源性饲料 牛 海绵状脑病 绵羊 痒病 检疫
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生化药物中猪、牛与羊性成分PCR检测的阳性对照品的构建
5
作者 余燕 邓锋 蒋忠军 《中国药师》 CAS 2015年第9期1445-1447,1468,共4页
目的:建立生化药物中的猪、牛与羊性成分PCR检测方法的阳性对照品,用于检测生产原料的动物来源是猪源性、牛源性或羊源性。方法:分别对自行制备的猪、牛及羊源性成分的阳性对照品,进行了DNA提取,并加入猪、牛与羊特异性引物进行扩增。... 目的:建立生化药物中的猪、牛与羊性成分PCR检测方法的阳性对照品,用于检测生产原料的动物来源是猪源性、牛源性或羊源性。方法:分别对自行制备的猪、牛及羊源性成分的阳性对照品,进行了DNA提取,并加入猪、牛与羊特异性引物进行扩增。对扩增产物进行酶切及测序验证。结果:猪、牛及羊阳性对照扩增产物片段长度、酶切片段长度均与目标序列长度一致。结论:所构建的猪、牛与羊性成分的阳性对照品可广泛应用于生化药物的种属鉴别中,对生物药物中猪、牛与羊性成分的核酸检测可进行良好的实验室质量控制。 展开更多
关键词 生化药物 猪、牛与羊源性成分 聚合酶链式反应
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饲料中牛羊源性成分PCR方法定性检测能力验证计划的实施和结果研究 被引量：2
6
作者 李冰玲 马贵平 +4 位作者 刘来福 刘旭辉 李炎鑫 刘全国 史喜菊 《中国饲料》 北大核心 2008年第20期33-35,共3页
"饲料中牛羊源性成分PCR方法定性检测"是由国家认证认可监督管理委员会(CNCA)组织的A类能力验证计划。通过对本次能力验证计划的实施和对结果的分析研究,了解了国内饲料中牛羊源性成分PCR检测领域的整体水平以及各实验室在检... "饲料中牛羊源性成分PCR方法定性检测"是由国家认证认可监督管理委员会(CNCA)组织的A类能力验证计划。通过对本次能力验证计划的实施和对结果的分析研究,了解了国内饲料中牛羊源性成分PCR检测领域的整体水平以及各实验室在检测中存在的差异。 展开更多
关键词 能力验证 牛羊源性成分 PCR 荧光PCR
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