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CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响 被引量:5
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作者 刘烈琴 刘丑生 +4 位作者 郭勇 倪和民 张宏 杨飞鸽 刘云海 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第8期31-34,共4页
为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧... 为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组,说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。 展开更多
关键词 绵羊精子 获能 CTC 体外受精
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精子提取液对绵羊同异种核移植重构胚的激活效果 被引量:2
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作者 赛务加甫 彭新荣 +4 位作者 李向臣 安志兴 郑月茂 权富生 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1343-1348,共6页
应用绵羊精子提取物体外激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,比较了不同浓度的绵羊精子提取物对绵羊同种和异种重构胚的激活作用,并与传统的化学激活方法对重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数做了比较。结果表明,绵羊精子... 应用绵羊精子提取物体外激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,比较了不同浓度的绵羊精子提取物对绵羊同种和异种重构胚的激活作用,并与传统的化学激活方法对重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数做了比较。结果表明,绵羊精子提取物可以有效地激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,每一重构胚注射3 pL浓度为5 mg/mL的绵羊精子提取物,对同种和异种胚的发育效果均为最好,并显著高于其他试验组(P<0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊-山羊异种核移植胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异不显著(P>0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊同种核移植胚的卵裂率和囊胚率的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异也不显著(P>0.05),但精子提取物注射法的绵羊核移植胚的囊胚细胞数显著(P<0.05)高于化学激活法的细胞数(72.4 vs 65.2)。 展开更多
关键词 绵羊 精子提取物 重构胚 激活
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钙离子载体及咖啡因对绵羊精子获能的影响 被引量:2
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作者 刘烈琴 郭勇 +4 位作者 刘云海 薛君忠 张宏 李晓燕 倪和民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期112-116,共5页
通过添加不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L)的钙离子载体(A23187,IA)及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越... 通过添加不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L)的钙离子载体(A23187,IA)及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越多;而延长作用时间对获能、顶体反应的影响不明显。IA和咖啡因共同作用后,咖啡因能够促进IA诱导顶体反应的发生。建议用IA诱导绵羊精子获能时,其浓度以0.050.2μmol/L为宜,作用时间1 min。 展开更多
关键词 绵羊精子 体外获能 钙离子载体 咖啡因
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钙离子浓度对绵羊精子获能的影响 被引量:2
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作者 李贺娟 倪和民 +3 位作者 薛君忠 张宏 杨飞鸽 刘烈琴 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期99-101,共3页
为探讨钙离子浓度对绵羊精子获能的影响,将绵羊精子在不同钙离子浓度的绵羊输卵管合成液(SOF液)中培养,并用钙离子载体A23187进行诱导。结果发现,不同钙离子浓度对绵羊精子的影响差别不明显,经A23187诱导后,1.7mmol/L组和2 mmol/L组的... 为探讨钙离子浓度对绵羊精子获能的影响,将绵羊精子在不同钙离子浓度的绵羊输卵管合成液(SOF液)中培养,并用钙离子载体A23187进行诱导。结果发现,不同钙离子浓度对绵羊精子的影响差别不明显,经A23187诱导后,1.7mmol/L组和2 mmol/L组的顶体反应率(AR)与其他组有显著差异(P<0.05),1.7 mmol/L浓度中,绵羊精子存活时间为16 h,2 mmol/L浓度中的存活时间为10 h,因此认为绵羊精子获能的适宜钙离子浓度为1.7 mmol/L,且获能过程中钙离子的存在是必要的。 展开更多
关键词 绵羊 精子 钙离子浓度 获能
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孕酮对绵羊精子体外获能的影响
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作者 薛君忠 刘云海 +4 位作者 郭勇 刘烈琴 张宏 杨飞鸽 倪和民 《广西农业生物科学》 CSCD 2006年第B09期63-67,共5页
为了探讨孕酮对绵羊精子体外获能的影响,将绵羊精子分别加到含不同浓度(1、5、10μm o l/L)孕酮的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(Ch lortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类... 为了探讨孕酮对绵羊精子体外获能的影响,将绵羊精子分别加到含不同浓度(1、5、10μm o l/L)孕酮的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(Ch lortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类型来评定孕酮对绵羊精子的影响。结果显示,在240 m in和360 m in时,各实验组中获能精子的百分数均明显高于对照组的(P<0.05),说明一定浓度的孕酮有利于绵羊精子的体外获能。 展开更多
关键词 绵羊 精子获能 CTC染色 孕酮
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不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响 被引量:1
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作者 刘烈琴 刘云海 +2 位作者 郭勇 杨飞鸽 倪和民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1150-1156,共7页
为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%... 为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%。利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响。结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005)。以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能。 展开更多
关键词 绵羊 精子 血清 获能 体外受精
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肝素浓度和作用时间对绵羊精子体外获能和体外受精的影响
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作者 刘烈琴 罗桂河 +3 位作者 孟丹娜 薛君忠 郭勇 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第21期21-24,共4页
通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添... 通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/mL肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低(40.92%和16.59%)(P<0.05),存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/mL肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/mL肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/mL,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。 展开更多
关键词 绵羊精子 体外获能 肝素 咖啡因 体外受精
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透明带诱导绵羊精子顶体反应的研究
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作者 刘烈琴 顾申 +5 位作者 周卫宾 杨飞鸽 张宏 郭勇 刘云海 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第23期29-31,共3页
为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果... 为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果显示获能与否并不影响透明带对精子顶体反应的诱导效果,添加IA23187后,顶体反应升高,但差异不显著(P>0.05)。说明透明带可诱导绵羊精子(无论获能与否)发生顶体反应,IA23187不能提高透明带对顶体反应的诱导作用。 展开更多
关键词 绵羊精子 获能 顶体反应 透明带 钙离子载体
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