理冲生髓饮对卵巢癌SKOV3细胞周期和凋亡影响 被引量：14

1

作者 付杨 杨莉莉 韩凤娟 《世界中医药》 CAS 2019年第6期1382-1387,共6页

目的:探讨理冲生髓饮对卵巢癌SKOV3细胞周期和凋亡影响。方法:以卵巢癌SKOV3细胞为研究对象,采用CCK-8法检测不同浓度顺铂对SKOV3细胞抑制作用,AnnexinV-FITC法检测SKOV3细胞凋亡情况,细胞周期与细胞凋亡检测试剂测定SKOV3细胞周期变化... 目的:探讨理冲生髓饮对卵巢癌SKOV3细胞周期和凋亡影响。方法:以卵巢癌SKOV3细胞为研究对象,采用CCK-8法检测不同浓度顺铂对SKOV3细胞抑制作用,AnnexinV-FITC法检测SKOV3细胞凋亡情况,细胞周期与细胞凋亡检测试剂测定SKOV3细胞周期变化,流式细胞术检测SKOV3细胞中CD44^+CD117^+细胞比例。结果:与空白组比较,24h和48h顺铂组SKOV3细胞凋亡率明显增加,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,CD44^+CD117^+细胞比例明显增加,与顺铂组比较,24h和48h理冲生髓饮联合顺铂组SKOV3细胞凋亡率明显增加,G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,CD44^+CD117^+细胞比例明显降低,其中理冲生髓饮中剂量组联合顺铂组作用效果最强。结论:理冲生髓饮具有抗肿瘤作用,其机制可能是增加顺铂对卵巢癌SKOV3细胞凋亡,调控细胞周期阻滞,降低卵巢癌SKOV3细胞中干细胞数量。 展开更多

关键词 理冲生髓饮 卵巢癌skov3细胞 卵巢癌干细胞 细胞周期 细胞凋亡

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EGCG对卵巢癌移植瘤生长及对VEGF和PCNA的影响 被引量：9

2

作者 于丹 付明磊 +3 位作者 王娟 秦建莉 皇甫梦杰 陈旭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期114-118,共5页

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对卵巢癌移植瘤生长的影响及可能的机制。方法将卵巢癌裸鼠移植瘤分成5组,给予不同浓度的EGCG(10,30,50 mg·kg^-1)干预,阴性对照组(NC)给予生理盐水(0.2 mL/只)... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对卵巢癌移植瘤生长的影响及可能的机制。方法将卵巢癌裸鼠移植瘤分成5组,给予不同浓度的EGCG(10,30,50 mg·kg^-1)干预,阴性对照组(NC)给予生理盐水(0.2 mL/只),阳性对照给予紫杉醇(Paclitaxel)(5 mg·kg^-1)。肝脏组织进行HE染色。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)和Western blot方法检测裸鼠移植瘤组织中血管生成因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA水平和蛋白水平的表达。结果EGCG可以抑制移植瘤的生长以及VEGF和PCNA的表达(P<0.05)。肝脏切片结果显示,紫杉醇组肝细胞核固缩,肝小叶之间出现明显间隙,而EGCG高剂量(50 mg·kg^-1)组无明显变化。结论EGCG抑制卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤的生长,其可能机制与抑制VEGF和PCNA的表达有关。 展开更多

关键词 EGCG 卵巢癌skov3细胞 裸鼠移植瘤 紫杉醇 VEGF PCNA

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小檗碱对人卵巢癌细胞SKOV3增殖及凋亡机制的研究 被引量：9

3

作者 王婉 张帆 +1 位作者 袁慧 杨文静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1498-1501,1508,共5页

目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR分析h MLH1基因启动子区Cp G岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR检... 目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR分析h MLH1基因启动子区Cp G岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Survivin和h MLH1 mRNA基因的表达。结果:小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。当与顺铂联用时,小檗碱对卵巢癌细胞有协同抗癌作用。小檗碱可明显诱导SKOV3细胞凋亡,并下调Bcl-2、Survivin基因及上调Bax基因的表达。此外,小檗碱能恢复h MLH1启动子的甲基化状态及增强h MLH1 mRNA的表达。结论:小檗碱可抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,小檗碱可协同增强抗癌药物顺铂的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 小檗碱 甲基化 错配修复基因 卵巢癌skov3细胞

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含酰胺结构的大黄酸衍生物4a对卵巢癌细胞的 迁移、侵袭的影响 被引量：5

4

作者 庞会锋 田炜 +6 位作者 亢建康 赵玉华 翟利娜 梁丹丹 李俊莹 侯华新 黎丹戎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期204-209,共6页

目的探讨含酰胺结构的大黄酸衍生物4a(简称衍生物4a,derivative 4a)对卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭能力的影响及可能作用机制。方法采用分子对接和Western blot检测衍生物4a对Rac1蛋白的调控作用,CCK-8、HE染色、Scratch和Transwell实验... 目的探讨含酰胺结构的大黄酸衍生物4a(简称衍生物4a,derivative 4a)对卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭能力的影响及可能作用机制。方法采用分子对接和Western blot检测衍生物4a对Rac1蛋白的调控作用,CCK-8、HE染色、Scratch和Transwell实验分别检测衍生物4a对SKOV3细胞增殖、形态学、迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测衍生物4a处理细胞后EMT的标志性蛋白Vimentin、β-cantenin、E-caderin、MMP-2、MMP-9的表达情况。结果衍生物4a能有效与Rac1蛋白结合,结合能明显低于大黄酸;且能下调SKOV3细胞Rac1蛋白的表达。衍生物4a能够明显抑制SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞产生大量空泡化;衍生物4a可下调MMP-2、MMP-9表达,上调EMT上皮性标志蛋白E-caderin表达及下调Vimentin、β-cantenin的表达。结论衍生物4a能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是靶向调控Rac1,抑制基质金属蛋白酶分泌,上调EMT过程关键分子E-caderin和下调Vimentin、β-cantenin的表达综合作用的结果。 展开更多

关键词 大黄酸衍生物4a 卵巢癌skov3细胞 Rac1蛋白 细胞迁移和侵袭 上皮间质转化EMT 基质金属蛋白酶

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黄芩素下调NF-κB/Bcl-2通路诱导卵巢癌Skov3细胞凋亡

5

作者 王悦 苏荣健 张蕴莉 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 2023年第5期460-463,共4页

目的探讨黄芩素(BAI)对卵巢癌Skov3细胞增殖与凋亡的影响及可能机制。方法使用不同浓度的BAI处理卵巢癌Skov3细胞,以MTT法检测Skov3细胞增殖,以克隆形成实验检测Skov3细胞克隆能力,以流式细胞术检测Skov3细胞凋亡,以Western blot法检测... 目的探讨黄芩素(BAI)对卵巢癌Skov3细胞增殖与凋亡的影响及可能机制。方法使用不同浓度的BAI处理卵巢癌Skov3细胞,以MTT法检测Skov3细胞增殖,以克隆形成实验检测Skov3细胞克隆能力,以流式细胞术检测Skov3细胞凋亡,以Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白以及核因子κB/B淋巴细胞瘤2(NF-κB/Bcl-2)信号通路相关蛋白,以PCR法检测细胞NF-κB/Bcl-2通路相关m RNA,以免疫荧光实验观察细胞中NF-κB p65表达。结果对比对照组,随着BAI药物浓度的增加,卵巢癌Skov3细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率显著上升,NF-κB/Bcl-2通路相关蛋白p NF-κB p65、p IκB-α、Bcl-2及相关m RNA NF-κb、Bcl-2表达明显下降,ⅠκB-α表达明显升高。结论BAI可抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡,可能与抑制NF-κB/Bcl-2通路有关。 展开更多

关键词 黄芩素 卵巢癌skov3细胞 细胞凋亡 BCL-2 NF-ΚB

原文传递

双氢青蒿素下调Notch1蛋白表达对人卵巢癌Skov3细胞抑制作用的研究 被引量：4

6

作者 刘朝霞 王丹 +1 位作者 丁娇 谭布珍 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期215-218,共4页

目的研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人卵巢癌Skov3细胞增殖及对Notch1mRNA、蛋白表达的影响。方法体外培养人卵巢癌Skov3细胞,加入不同浓度的DHA(分别为0、5、10、20、40、80μmol/L),采用MTT比色法检测不同浓度DHA对人卵巢... 目的研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人卵巢癌Skov3细胞增殖及对Notch1mRNA、蛋白表达的影响。方法体外培养人卵巢癌Skov3细胞,加入不同浓度的DHA(分别为0、5、10、20、40、80μmol/L),采用MTT比色法检测不同浓度DHA对人卵巢癌Skov3细胞增殖的影响;采用RT-PCR法和Western blot法检测不同浓度DHA处理24h的人卵巢癌Skov3细胞内Notch1mRNA和蛋白表达水平的变化。结果不同浓度的DHA处理不同时间(24、48、72h)后,卵巢癌Skov3细胞的生长明显受到抑制(P<0.05);随着DHA浓度的增加,人卵巢癌Skov3细胞内Notch1mRNA和蛋白的表达逐渐下降(均P<0.05)。结论 DHA可能通过下调Notch1的表达抑制人卵巢癌Skov3细胞的增殖。 展开更多

关键词 双氢青蒿素 卵巢癌skov3细胞 NOTCH1 生长抑制

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黄芪多糖促进顺铂抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究 被引量：2

7

作者 李彩虹 高巧玲 罗幼珍 《巴楚医学》 2021年第1期50-55,共6页

目的:研究黄芪多糖(APS)对卵巢癌细胞顺铂(DDP)化疗的影响及其机制。方法:不同浓度APS联合DDP处理体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,PCR和Western Blot检测Caspase-3、Bax、Bcl-2基因及蛋白表达变... 目的:研究黄芪多糖(APS)对卵巢癌细胞顺铂(DDP)化疗的影响及其机制。方法:不同浓度APS联合DDP处理体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,PCR和Western Blot检测Caspase-3、Bax、Bcl-2基因及蛋白表达变化。结果:药物作用24 h时,随着APS浓度增加,SKOV3细胞增殖受到抑制,凋亡率逐渐增加,并呈浓度依赖性(均P<0.05)。药物作用时间为48 h、72 h时,APS对SKOV3细胞增殖有抑制作用,但不同浓度间抑制率无明显差异(P>0.05)。联合用药组的Bax、Caspase-3的蛋白和基因表达随着APS浓度的增高逐渐增加,Bcl-2的蛋白和基因表达逐渐减少(均P<0.05)。结论:APS有潜在抗卵巢癌作用,可提高卵巢癌细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是通过上调凋亡相关因子而促进卵巢癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄芪多糖 顺铂 卵巢癌skov3细胞

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虫草素对卵巢癌细胞中Fra-1和p53表达的影响 被引量：1

8

作者 张谷香 李书萍 李波 《新乡医学院学报》 CAS 2021年第8期714-718,共5页

目的探讨虫草素对卵巢癌细胞中Fra-1、p53蛋白及mRNA表达的影响。方法取对数生长期SKOV3细胞,以每孔5×10^(3)个细胞接种于96孔板中,培养24 h后将细胞分为A组、B组、C组和D组,分别加入0、10、30、60μmol·L^(-1)虫草素,培养48 ... 目的探讨虫草素对卵巢癌细胞中Fra-1、p53蛋白及mRNA表达的影响。方法取对数生长期SKOV3细胞,以每孔5×10^(3)个细胞接种于96孔板中,培养24 h后将细胞分为A组、B组、C组和D组,分别加入0、10、30、60μmol·L^(-1)虫草素,培养48 h。应用细胞计数试剂盒-8检测SKOV3细胞活性,Hoechst染色检测SKOV3细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,免疫印迹法检测SKOV3细胞中Fra-1、p53蛋白的表达,实时荧光定量反转录聚合酶链反应法检测SKOV3细胞中Fra-1、p53 mRNA的表达。结果A组、B组、C组及D组SKOV3细胞活性、细胞凋亡率、穿膜细胞数比较差异均有统计学意义(P<0.001);C组和D组SKOV3细胞活性、穿膜细胞数显著低于A组、B组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于A组、B组(P<0.05);D组SKOV3细胞活性、穿膜细胞数显著低于C组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于C组(P<0.05)。A组与B组SKOV3细胞中Fra-1、p53蛋白及mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);C组和D组SKOV3细胞中Fra-1蛋白及mRNA相对表达量显著低于A组、B组,p53蛋白及mRNA相对表达量显著高于A组、B组(P<0.05);D组SKOV3细胞中Fra-1蛋白及mRNA相对表达量显著低于C组,p53蛋白及mRNA相对表达量显著高于C组(P<0.05)。结论虫草素可抑制SKOV3细胞活性、降低其侵袭能力、促进其凋亡,且呈现浓度依赖性,其机制可能与升高p53表达和降低Fra-1表达有关。 展开更多

关键词 卵巢癌skov3细胞 虫草素 Fra-1 P53

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KLK7小分子抑制剂对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭与转移的影响

9

作者 何丽芳 王芳宇 +1 位作者 李宗泽 刘最 《衡阳师范学院学报》 2022年第6期59-64,共6页

为了探讨KLK7小分子抑制剂G284-1264对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和转移的影响,采用MTT法检测G284-1264处理后细胞的存活率;钙黄绿素-AM/PI活细胞/死细胞双染和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用细胞划痕实验检测G284-1264对... 为了探讨KLK7小分子抑制剂G284-1264对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和转移的影响,采用MTT法检测G284-1264处理后细胞的存活率;钙黄绿素-AM/PI活细胞/死细胞双染和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用细胞划痕实验检测G284-1264对SKOV3细胞侵袭与转移的影响。结果显示:相同时间作用下,随着G284-1264浓度增大,SKOV3细胞存活率逐渐降低,24 h、48 h和72 h的IC50分别为110.0、48.62和39.64μmol/L,相比5-FU,G284-1264对SKOV3细胞表现出更强的抗增殖能力;钙黄绿素-AM/PI对细胞进行双染后,G284-1264作用组细胞活力明显降低;流式细胞术分析发现,G284-1264作用组G1期的细胞数目增加,G2期明显降低,且凋亡率高于空白组和阳性对照组;划痕实验表明G284-1264处理细胞36 h后,细胞迁移率降低16.49%。以上结果表明KLK7小分子抑制剂G284-1264能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭与转移。 展开更多

关键词 KLK7小分子抑制剂 卵巢癌skov3细胞 增殖 侵袭与转移

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胡桃醌对人卵巢癌SKOV3和IOSE80细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制研究 被引量：6

10

作者 孙红亚 袁爱娟 李纪鹏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第1期32-37,共6页

目的:研究胡桃醌对人卵巢癌SKOV3和IOSE80细胞增殖和侵袭的抑制作用,并从信号通路深入探讨其作用机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和IOSE80细胞,给予不同浓度的胡桃醌溶液干预,MTT比色法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transw... 目的:研究胡桃醌对人卵巢癌SKOV3和IOSE80细胞增殖和侵袭的抑制作用,并从信号通路深入探讨其作用机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和IOSE80细胞,给予不同浓度的胡桃醌溶液干预,MTT比色法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell检测细胞转移,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测AKT、ERK、NF-κB信号通路蛋白表达,RT-PCR检测波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA表达。结果:不同浓度胡桃醌可抑制SKOV3细胞和IOSE80细胞增殖活力,降低细胞侵袭能力,加速细胞凋亡,且随浓度的增加对细胞增殖、侵袭和凋亡的作用越明显,差异均有统计学意义(P <0. 05)。不同浓度胡桃醌均可抑制SKOV3细胞和IOSE80细胞AKT、ERK、NF-κB信号通路蛋白的表达,且随浓度的增加信号通路蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P <0. 05)。不同浓度胡桃醌均可减少SKOV3细胞和IOSE80细胞Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,且随浓度的增加mRNA表达减少,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论:胡桃醌可抑制SKOV3和IOSE80细胞体外增殖、转移,促进凋亡,其机制与抑制AKT、ERK、NF-κB信号通路表达和下调Vimentin、MMP-2、MMP-9mRNA表达有关。 展开更多

关键词 人卵巢癌skov3细胞 胡桃醌 细胞增殖 侵袭 信号通路

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芹菜素对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移的影响 被引量：5

11

作者 路会侠 刘佳 李绍波 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第20期3291-3294,共4页

目的探讨芹菜素对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移的影响及其相关机制。方法取对数期人卵巢癌SKOV3细胞分为低、中、高剂量实验组及对照组,分别以40,80,160μmol·L^-1芹菜素与等量生理盐水处理,干预48 h。用Transwell小室法检测检测... 目的探讨芹菜素对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移的影响及其相关机制。方法取对数期人卵巢癌SKOV3细胞分为低、中、高剂量实验组及对照组,分别以40,80,160μmol·L^-1芹菜素与等量生理盐水处理,干预48 h。用Transwell小室法检测检测人卵巢癌SKOV3细胞的侵袭能力,用Wound Healing法检测人卵巢癌SKOV3细胞的迁移能力,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢癌SKOV3细胞增殖能力,用蛋白质印迹法检测人卵巢癌SKOV3细胞核因子-κB(NF-κB)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)蛋白表达。结果干预48 h时,对照组与低、中、高剂量实验组人卵巢癌SKOV3细胞的侵袭率分别为(86.43±3.95)%,(62.52±4.11)%,(36.37±3.26)%,(19.21±2.93)%;迁移率分别为(91.22±3.87)%,(72.68±4.21)%,(58.42±3.13)%,(49.02±4.34)%;NF-κB蛋白相对表达量分别为0.91±0.09,0.73±0.11,0.60±0.12,0.49±0.08;uPA蛋白相对表达量分别为0.96±0.04,0.68±0.13,0.52±0.09,0.41±0.07。低、中、高剂量实验组分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论芹菜素可有效抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调人卵巢癌SKOV3细胞内NF-κB和uPA蛋白表达相关。 展开更多

关键词 人卵巢癌skov3细胞 芹菜素 侵袭 迁移 核因子-ΚB 尿激酶型纤溶酶原激活剂

原文传递

慢病毒介导干扰LSD1基因的卵巢癌稳转细胞株的构建及鉴定 被引量：3

12

作者 万晓蕾 赖文升 +4 位作者 邵根宝 李袁霞 刘秀雯 金洁 吴朝阳 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第16期19-22,共4页

目的构建并鉴定慢病毒介导干扰赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)基因的卵巢癌稳转细胞株,为深入研究以LSD1为靶点的表观遗传学抗肿瘤治疗奠定基础。方法扩增并抽提所需质粒,紫外分光光度计检测质粒纯度,计算A260/A280。采用Lipofectamine ... 目的构建并鉴定慢病毒介导干扰赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)基因的卵巢癌稳转细胞株,为深入研究以LSD1为靶点的表观遗传学抗肿瘤治疗奠定基础。方法扩增并抽提所需质粒,紫外分光光度计检测质粒纯度,计算A260/A280。采用Lipofectamine 2000脂质体转染法将质粒转染入人肾上皮细胞293T,取转染THM质粒后的293T细胞,在倒置荧光显微镜下观察转染情况;分别取转染目的质粒和PLKO空载体质粒后的293T细胞,收集病毒上清液,感染人卵巢癌SKOV3细胞(分别记为观察组和对照组),筛选出稳转细胞株。观察组经浓度梯度(0、1、10、100、1 000 ng/m L)多西环素诱导,以及两组均经100 ng/m L多西环素诱导后,采用Western blotting法检测LSD1及其特异性反应底物H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量。结果目的质粒A260/A280在2.0左右,说明纯度较高;THM质粒转染293T细胞呈绿色荧光,为真核载体表达的绿色荧光蛋白,表明成功转染。随着多西环素浓度的升高,观察组诱导后LSD1蛋白相对表达量均逐渐降低,H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量逐渐升高,各浓度间比较有统计学差异(P均<0.01)。观察组经100 ng/m L多西环素诱导后LSD1蛋白相对表达量均明显低于同组诱导前及对照组诱导后,H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量明显高于同组诱导前及对照组诱导后(P均<0.01)。结论成功构建慢病毒干扰下调LSD1基因表达的卵巢癌稳转细胞株,并经不同浓度多西环素诱导鉴定;该细胞株可用于以LSD1为靶点的表观遗传学抗肿瘤治疗研究。 展开更多

关键词 赖氨酸特异性去甲基化酶1 RNA干扰 人卵巢癌skov3细胞 稳转细胞株

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野生型P53诱导的蛋白磷酸酶1对卵巢癌细胞侵袭的影响 被引量：2

13

作者 冯艳萍 刘芳 +2 位作者 刘晶 张红真 李俊 《中国计划生育学杂志》 2019年第4期417-421,共5页

目的:探讨野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)与卵巢癌细胞SKOV3侵袭力的关系,揭示Wip1对SKOV3细胞的侵袭和迁移等恶性生物学行为的影响。方法:采用划痕实验、Transwell小室法测定Wip1沉默后SKOV3细胞体外侵袭能力。实时荧光定量反转录-... 目的:探讨野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)与卵巢癌细胞SKOV3侵袭力的关系,揭示Wip1对SKOV3细胞的侵袭和迁移等恶性生物学行为的影响。方法:采用划痕实验、Transwell小室法测定Wip1沉默后SKOV3细胞体外侵袭能力。实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法检测SKOV3细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达。结果:细胞迁移距离Wip1-siRNA组(30.33±3.67)短于Control组(59.33±7.69),细胞侵袭到Transwell小室滤膜下细胞数Wip1-siRNA组(17.17±1.84)低于Control组(30.17±3.43),RT-PCR和Western blot检测Wip1-siRNA组MMP-2(0.51±0.01)和MMP-9(0.40±0.03)的表达较Control组(1.00±0.00)降低(均P<0.01);Wip1-siRNA组TIMP-1和TIMP-2的表达与Control组未见差异(P>0.05)。结论:沉默Wip1能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力,可能是通过抑制MMP-2、MMP-9的表达实现的。 展开更多

关键词 野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1 沉默 侵袭 人卵巢癌skov3细胞

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沉默信息调节因子3对白藜芦醇诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响 被引量：1

14

作者 李松岩 林冬静 +4 位作者 于洋 刘师兵 徐路 孙奇 徐冶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期45-49,I0003,共6页

目的:检测沉默信息调节因子3 (Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0mg·L-1)Res培养24h,MTT法检测细胞存活... 目的:检测沉默信息调节因子3 (Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0mg·L-1)Res培养24h,MTT法检测细胞存活率。将细胞随机分为对照组、Sirt3抑制剂3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶(3-TYP)组、Res组和3-TYP+Res组,培养24h后,MTT法检各组细胞增殖抑制率;采用Hoechst 33342进行细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态;采用活性氧(ROS)探针检测细胞中ROS水平;Western blotting法检测各组细胞中Sirt3、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:MTT实验,随着Res浓度的增加,细胞存活率明显降低,Res的半数抑制浓度(IC50)为42.73mg·L^-1。与对照组比较,Res组和3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,3-TYP+Res组细胞核出现固缩、染色增强、核碎裂增多。与对照组比较,3-TYP组细胞红色荧光无明显变化,Res组和3-TYP+Res组细胞红色荧光明显减少。Western blotting法检测,与对照组比较,3-TYP组细胞中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Res组细胞中Sirt3和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞中Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2和Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:Res可以诱导SKOV3细胞的凋亡,3-TYP通过抑制Sirt3表达可增强Res的作用。 展开更多

关键词 3-(1H-1 2 3-三唑-4-基)吡啶 沉默信息调节因子3 白藜芦醇 人卵巢癌skov3细胞 细胞凋亡

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Wip1在卵巢癌细胞系中的表达与沉默 被引量：1

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作者 冯艳萍 卞亚辉 +2 位作者 赵婷婷 王晶晶 孟亚丽 《河北医药》 CAS 2019年第14期2085-2090,共6页

目的探讨Wip1在不同卵巢癌细胞系中的表达情况,筛选出Wip1强表达的细胞系,为进一步研究Wip1在卵巢癌细胞系中的作用机制奠定基础。方法应用RT-PCR及Westernblot检测正常卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株SKOV3、CAOV3、A2780、ES2中Wip的表达... 目的探讨Wip1在不同卵巢癌细胞系中的表达情况,筛选出Wip1强表达的细胞系,为进一步研究Wip1在卵巢癌细胞系中的作用机制奠定基础。方法应用RT-PCR及Westernblot检测正常卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株SKOV3、CAOV3、A2780、ES2中Wip的表达情况,最终筛选出SKOV3作为实验细胞系。在卵巢癌SKOV3细胞中沉默Wip基因观察其生物学行为的变化。结果Wip1mRNA表达在SKOV3细胞中明显高于正常上皮细胞(P<0.01),在CAOV3、A2780、ES2细胞中也均高于卵巢正常上皮细胞(P<0.05)。Wip1蛋白表达在SKOV3、A2780、ES2细胞中明显高于正常上皮细胞(P<0.01),在CAOV3细胞中也高于卵巢正常上皮细胞(P<0.05)。转染siRNA-2的SKOV3细胞中Wip1蛋白表达最少,Wip1-siRNA-2转染SKOV3细胞后,Wip1的表达随着其浓度的增加呈减少趋势,在浓度为80nmol/L达到最低值;而作用时间为48hWip1蛋白表达也达到最低(P<0.01)。结论Wip1在SKOV3、CAOV3、A2780、ES2细胞中均呈过表达,在SKOV3细胞中表达水平最高,Wip1-siRNA转染SKOV3细胞在特定浓度和作用时间时沉默效果最好,为进一步阐述其分子机制提供了理论基础。 展开更多

关键词 WIP1 人卵巢癌skov3细胞 小干扰RNA

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THY1基因真核表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞SKOV3生长的影响

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作者 曾俐琴 彭芝 张铭 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期620-624,共5页

构建THY1真核表达质粒并转染卵巢癌细胞SKOV3,探讨其对SKOV3细胞生长的影响。通过目的基因克隆,构建pcDNA3.1(+)-THY1质粒并转染SKOV3细胞,实验分3组:重组质粒转染组(SKOV3-THY1)、空质粒转染组(SKOV3-Null)和未转染组(SKOV3)。RT-PCR... 构建THY1真核表达质粒并转染卵巢癌细胞SKOV3,探讨其对SKOV3细胞生长的影响。通过目的基因克隆,构建pcDNA3.1(+)-THY1质粒并转染SKOV3细胞,实验分3组:重组质粒转染组(SKOV3-THY1)、空质粒转染组(SKOV3-Null)和未转染组(SKOV3)。RT-PCR和免疫细胞化学方法鉴定THY1表达情况;MTT和流式细胞术检测THY1对SKOV3细胞增殖及周期的影响。DNA测序证实THY1正确插入pcDNA3.1(+)中,并整合于SKOV3细胞;SKOV3-THY1组的细胞抑制率明显高于SKOV3-Null组;且其G1期细胞比例明显高于另两组。结论:S期细胞比例明显低于另两组。结论:成功构建THY1真核表达质粒,该质粒可抑制SKOV3细胞生长。 展开更多

关键词 基因 THY1 真核表达质粒 卵巢癌细胞skov3

原文传递

miR-122-5p靶向ADAM10调控Notch信号通路对人卵巢癌细胞SKOV-3的上皮-间质转化的抑制作用 被引量：7

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作者 李根林 刘杰 +2 位作者 谢晶 余芙蓉 胡意 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期54-59,共6页

目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mim... 目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mimic NC组和miR-122-5p mimic组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-122-5p和ADAM10 mRNA的表达水平;Western blot检测各组细胞ADAM10蛋白的表达水平;生物信息学预测miR-122-5p与ADAM10靶向匹配,采用双荧光素酶报告系统验证两者在SKOV-3细胞中的靶向关系。再将miR-122-5p mimic和ADAM10过表达质粒(pcDNA-ADAM10)分别或同时转染至SKOV-3细胞中,分为空白对照组(Blank组)、miR-122-5p mimic组、ADAM10过表达组(pc-ADAM10组)和miR-122-5p mimic+pc-ADAM10组,采用Transwell检测SKOV-3细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞Notch信号通路相关蛋白Notch1、HES1和HEY1,EMT相关蛋白Snail、E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果 miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中miR-122-5p的表达水平较mimic NC组的升高(P<0.01),表明miR-122-5p mimic稳定转染至SKOV-3细胞。miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中ADAM10 mRNA和蛋白的表达水平较mimic NC组的降低(P<0.01),双荧光素酶报告系统证实ADAM10是miR-122-5p靶基因。与Blank组比较,miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞发生迁移和侵袭的数量降低(t=6.004,P<0.05;t=7.289,P<0.01),而pc-ADAM10组的升高(t=13.181,P<0.001;t=11.504,P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的Notch、HES1、HEY1、Snail和N-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01),而pc-ADAM10组的上升(P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的E-cadheirn蛋白表达水平上升(P<0.01),而pc-ADAM10组的下降(P<0.01)。与pc-ADAM10组比较,miR-122-5p mimic+pc-ADAM10能减弱pc-ADAM10的促EMT作用,且下调Notch信号通路活性。结论 miR-122-5p通过阻断Notch信号通路抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的EMT,其机制可能与miR-122-5p靶向抑制ADAM10的表达有关。 展开更多

关键词 人卵巢癌细胞skov-3 上皮-间质转化 NOTCH信号通路 去整合素金属蛋白酶10

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雷公藤红素对卵巢癌SKOV3/DDP细胞的抑制作用及其机制 被引量：6

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作者 安申 王丹丹 +2 位作者 赵玉杰 张蕴莉 肖建英 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第11期1157-1162,共6页

目的探讨雷公藤红素(celastrol)对卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞SKOV3/DDP的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞增殖的影响;显微镜下观察不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞形态的影响;流式细胞... 目的探讨雷公藤红素(celastrol)对卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞SKOV3/DDP的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞增殖的影响;显微镜下观察不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞形态的影响;流式细胞术检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞周期及凋亡的影响;细胞划痕试验检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞迁移能力的影响;Transwell体外侵袭试验检测不同雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞侵袭能力的影响;Western blot法检测SKOV3/DDP细胞中凋亡及侵袭相关蛋白的表达水平。结果经雷公藤红素作用后,SKOV3/DDP细胞的增殖抑制率显著上升(P<0.05);镜下观察SKOV3/DDP细胞数目显著减少(P<0.05);G1期细胞比例明显升高(P<0.05);细胞凋亡率显著增加(P<0.05);细胞迁移距离明显减小(P<0.05);穿膜细胞数目明显减少(P<0.05);SKOV3/DDP细胞中Cyclin A、p-AKT、NF-KB、MMP-2、MMP-9和P-GP蛋白的表达水平均明显下降(P<0.05)。结论雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞抑制作用显著,为临床晚期失去手术机会卵巢癌患者的治疗提供了参考。 展开更多

关键词 雷公藤红素 卵巢癌skov3/DDP细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭

原文传递

白皮杉醇对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其诱导凋亡作用的实验研究

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作者 汪丽娜 任若瑜 何富乐 《中国中医药科技》 CAS 2023年第5期866-870,共5页

目的:探究白皮杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及相关的作用机制。方法:采用CCK8法检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞迁移能力的影响;采用Trans... 目的:探究白皮杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及相关的作用机制。方法:采用CCK8法检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞迁移能力的影响;采用Transwell侵袭实验检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞侵袭能力的影响;采用DAPI染色法检测不同浓度白皮杉醇对SKOV-3细胞凋亡的影响;采用Western blot实验检测SKOV-3细胞核增殖抗原(Ki67)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved caspase-3)的表达水平。结果:白皮杉醇能够明显抑制SKOV-3细胞的增殖能力,明显降低SKOV-3细胞的迁移能力和侵袭能力;明显提高SKOV-3细胞的凋亡水平;白皮杉醇干预后,SKOV-3细胞Ki67和Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达显著升高。结论:白皮杉醇能够有效抑制SKOV-3细胞的增殖、迁移和侵袭,并能够诱导SKOV-3细胞凋亡。 展开更多

关键词 卵巢癌skov-3细胞 白皮杉醇 增殖 迁移 侵袭 凋亡 体外实验

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细胞毒素-1对人卵巢癌细胞体外增殖、凋亡的影响

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作者 黄千峰 武丽 +2 位作者 欧燕兰 艾君 张秀 《广州医药》 2020年第6期24-27,32,共5页

目的探讨细胞毒素-1(Cytotoxin-1,CTX-1)对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖凋亡的影响。方法利用0、4、8、12μg/mL浓度CTX-1处理SKOV-3细胞6、12、24 h,MTS法检测细胞活性,8μg/mL CTX-1处理SKOV-3细胞24、48 h,Hoechst-33258荧光染色观察细胞... 目的探讨细胞毒素-1(Cytotoxin-1,CTX-1)对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖凋亡的影响。方法利用0、4、8、12μg/mL浓度CTX-1处理SKOV-3细胞6、12、24 h,MTS法检测细胞活性,8μg/mL CTX-1处理SKOV-3细胞24、48 h,Hoechst-33258荧光染色观察细胞核染色质形态。取处理6、12 h后细胞,利用流式细胞仪检测SKOV-3细胞的凋亡率。结果4、8、12μg/mL的CTX-1可抑制SKOV-3细胞活性及增殖,呈时间-剂量依赖。Hoechst-33258染色观察可见细胞染色质呈固缩或碎裂状、染色质着色不均、核形态各异,随时间增加而更趋明显。8μg/mL CTX-1处理细胞,6 h细胞坏死率为(1.90±0.27)%,晚期凋亡率为(10.96±1.56)%,而早期凋亡率为(1.52±0.39)%;12 h细胞坏死率为(10.62±0.96)%,晚期凋亡率(15.07±1.23)%,而早期凋亡率为(1.88±0.17)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CTX-1可以抑制人卵巢癌细胞活性、抑制其体外增殖、诱导其发生凋亡,该作用呈剂量依赖和时间依赖,主要引起细胞晚期凋亡和坏死。 展开更多

关键词 细胞毒素-1 人卵巢癌skov-3细胞 增殖 凋亡

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