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RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响
被引量:
1
1
作者
施鑫鹤
耿晢
+4 位作者
施星臣
马克君
朱宏文
任雯
周雅丽
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期604-609,共6页
目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对...
目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。
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关键词
骨肉瘤
saos
-
2
细胞
RNA干扰
c-myc启动子结合蛋白1
细胞生长
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职称材料
松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响
被引量:
7
2
作者
江波
张雅稚
《中医学报》
CAS
2019年第8期1680-1685,共6页
目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC...
目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路蛋白的表达。结果:松乳菇多糖以时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,促进人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞COX-2、NF-κB和NF-κB p65蛋白的表达。结论:松乳菇多糖可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,降低其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与阻滞NF-κB信号通路和下调COX-2蛋白表达有关。
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关键词
松乳菇多糖
人骨肉瘤
saos
-
2
细胞
细胞增殖
细胞凋亡
细胞迁移能力
NF-ΚB
COX-
2
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职称材料
银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究
3
作者
章磊
孙畅
+2 位作者
流小舟
吴苏稼
黎承军
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2017年第2期107-113,共7页
目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2...
目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2细胞凋亡率,Transwell小室迁移与侵袭实验检测GB对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响;提取GB处理后Saos-2细胞的mRNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9的基因及蛋白表达水平,Western blotting法检测Erk和Akt磷酸化及cleaved-caspase-3水平。结果 GB能明显抑制Saos-2细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性,600和1200μmol/L GB可诱导Saos-2细胞凋亡,GB对Saos-2细胞的迁移及侵袭的抑制作用呈浓度依赖性;GB可升高Bax mRNA和蛋白水平,但降低Bcl-2、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平;高浓度GB能抑制Erk和Akt的磷酸化且升高cleaved-caspase-3水平。结论 GB具有抑制Saos-2细胞增殖及迁移侵袭和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制Erk和Akt磷酸化有关。
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关键词
人骨肉瘤
saos
-
2
细胞
银杏内脂B
增殖
凋亡
侵袭
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职称材料
题名
RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响
被引量:
1
1
作者
施鑫鹤
耿晢
施星臣
马克君
朱宏文
任雯
周雅丽
机构
兰州大学第二医院中心实验室
兰州大学基础医学院生物化学及分子生物学研究所
兰州市第二人民医院骨科
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期604-609,共6页
基金
甘肃省自然科学研究基金计划一般项目(1308RJZA152)
文摘
目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。
关键词
骨肉瘤
saos
-
2
细胞
RNA干扰
c-myc启动子结合蛋白1
细胞生长
Keywords
osteosarcoma
saos
-2
cells
RNA
interfering
c-myc
promoter
binding
protein
1
cell
proliferation
分类号
R738.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响
被引量:
7
2
作者
江波
张雅稚
机构
湖北文理学院附属医院/襄阳市中心医院
出处
《中医学报》
CAS
2019年第8期1680-1685,共6页
基金
湖北省自然科学基金项目(2014CFB251)
文摘
目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路蛋白的表达。结果:松乳菇多糖以时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,促进人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞COX-2、NF-κB和NF-κB p65蛋白的表达。结论:松乳菇多糖可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,降低其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与阻滞NF-κB信号通路和下调COX-2蛋白表达有关。
关键词
松乳菇多糖
人骨肉瘤
saos
-
2
细胞
细胞增殖
细胞凋亡
细胞迁移能力
NF-ΚB
COX-
2
Keywords
Lactarius
sinensis
polysaccharide
human
osteosarcoma
saos
-
2
cells
cell
proliferation
cell
apoptosis
cell
migration
ability
NF-κB
COX-
2
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究
3
作者
章磊
孙畅
流小舟
吴苏稼
黎承军
机构
南京大学医学院附属金陵医院骨科
出处
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2017年第2期107-113,共7页
基金
江苏省基础研究计划自然科学基金项目(BK20151373)
中国博士后科学基金项目(2016M593039)
文摘
目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2细胞凋亡率,Transwell小室迁移与侵袭实验检测GB对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响;提取GB处理后Saos-2细胞的mRNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9的基因及蛋白表达水平,Western blotting法检测Erk和Akt磷酸化及cleaved-caspase-3水平。结果 GB能明显抑制Saos-2细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性,600和1200μmol/L GB可诱导Saos-2细胞凋亡,GB对Saos-2细胞的迁移及侵袭的抑制作用呈浓度依赖性;GB可升高Bax mRNA和蛋白水平,但降低Bcl-2、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平;高浓度GB能抑制Erk和Akt的磷酸化且升高cleaved-caspase-3水平。结论 GB具有抑制Saos-2细胞增殖及迁移侵袭和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制Erk和Akt磷酸化有关。
关键词
人骨肉瘤
saos
-
2
细胞
银杏内脂B
增殖
凋亡
侵袭
Keywords
Human
osteosarcoma
saos
-
2
cells
Ginkgolide
B
Proliferation
Apoptosis
Invasion
分类号
R738 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响
施鑫鹤
耿晢
施星臣
马克君
朱宏文
任雯
周雅丽
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
2
松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响
江波
张雅稚
《中医学报》
CAS
2019
7
下载PDF
职称材料
3
银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究
章磊
孙畅
流小舟
吴苏稼
黎承军
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2017
0
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