雷公藤甲素通过miR-34b-5p/Notch1轴抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖并诱导其铁死亡

1

作者 姜福贵 伍俊峰 +2 位作者 杨标 吴中恒 周平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期579-585,共7页

目的:探究雷公藤甲素(TPL)通过miR-34b-5p调控Notch1表达对骨肉瘤U2OS细胞铁死亡影响的机制。方法:常规培养U2OS细胞,将其分为对照组、TPL(10μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+Fer-1(铁死亡抑制剂,20μmol/L)组、miR-NC组、miR-34b-5p组、miR... 目的:探究雷公藤甲素(TPL)通过miR-34b-5p调控Notch1表达对骨肉瘤U2OS细胞铁死亡影响的机制。方法:常规培养U2OS细胞,将其分为对照组、TPL(10μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+Fer-1(铁死亡抑制剂,20μmol/L)组、miR-NC组、miR-34b-5p组、miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+anti-miR-34b-5p组、anti-miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组。qPCR法、CCK-8法、铁离子检测试剂、DHE-荧光探针和WB法分别检测各组U2OS细胞中miR-34b-5p的表达、增殖能力、Fe2+水平、ROS水平以及铁死亡相关蛋白(GPX4、SLC7A11及Notch1蛋白)的表达,双萤光素酶报告基因实验验证miR-34b-5p与Notch1的靶向结合关系。结果:TPL可促进U2OS细胞中miR-34b-5p表达,Fer-1和anti-miR-34b-5p则抑制miR-34b-5p的表达(均P<0.05)。TPL明显抑制U2OS细胞的增殖、GPX4、SLC7A11、Notch1蛋白的表达、增加细胞中Fe2+和ROS的含量,Fer-1可逆转TPL对U2OS细胞的作用(均P<0.05)。过表达miR-34b-5p与TPL对U2OS细胞的作用相似(均P<0.05)。miR-34b-5p可靶向结合Notch1(均P<0.05)。miR-34b-5p抑制剂可明显抑制TPL对U2OS细胞的影响,Fer-1可增强miR-34b-5p抑制剂的作用(均P<0.05)。结论:TPL可抑制U2OS细胞的增殖能力并促进其铁死亡,其作用机制可能与miR-34a-5p靶向调节Notch1表达有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 骨肉瘤 U2os细胞 miR-34b-5p NOTCH1 铁死亡

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桃红四物汤通过PI3K/AKT/HIF-1α通路介导的糖酵解抑制骨肉瘤的增殖与迁移

2

作者 温蕊嘉 董鑫 +3 位作者 麦泳欣 周舒婷 王俊岩 张锦芳 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3705-3710,共6页

目的:探讨桃红四物汤(THSWD)是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)通路介导的糖酵解抑制骨肉瘤(OS)增殖迁移。方法:制备THSWD含药血清。用不同浓度的含药血清培养人OS MG63与143B细胞。CCK-8实验... 目的:探讨桃红四物汤(THSWD)是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)通路介导的糖酵解抑制骨肉瘤(OS)增殖迁移。方法:制备THSWD含药血清。用不同浓度的含药血清培养人OS MG63与143B细胞。CCK-8实验、克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验观察不同剂量THSWD对OS细胞增殖、迁移的作用;通过Western Blot检测不同剂量THSWD含药血清对OS细胞的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、HIF-1α、PI3K、己糖激酶2(HK2)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、葡萄糖转运体1(GluT1)的蛋白表达影响;试剂盒检测不同剂量THSWD含药血清对OS细胞胞内及上清液葡萄糖及乳酸含量的影响。结果:与空白组和对照组比较,不同剂量的THSWD均可以抑制OS细胞MG63与143B的增殖、克隆、迁移与侵袭(P<0.05);Western Blot检测显示,THSWD呈剂量依赖性抑制OS细胞MG63与143B中PI3K、p-AKT、GluT1蛋白表达(P<0.05);进一步研究结果显示,THSWD降低OS细胞内葡萄糖浓度(P<0.05),增加上清液葡萄糖浓度(P<0.05),但上清液和细胞内乳酸生成均减少(P<0.05)。结论:THSWD抑制OS的增殖与迁移可能通过PI3K/AKT/HIF-1α通路介导的糖酵解来实现,本研究为OS的临床治疗提供更多思路。 展开更多

关键词 桃红四物汤 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/缺氧诱导因子-1α通路 糖酵解 骨肉瘤 机制 葡萄糖 乳酸

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骨肉瘤细胞生长的自分泌和旁分泌调节的研究进展

3

作者 杜少文 刘翔(综述) 叶凯山(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期239-244,共6页

骨肉瘤(osteosarcoma,OS)为骨组织中最常见的恶性肿瘤之一,其具体发生机制目前尚未完全明确。研究证明,OS细胞在肿瘤发展阶段表达不同的细胞因子(cytokine,CK)及其受体,通过自分泌和旁分泌作用使其能够自主生长并赋予转移能力。参与作用... 骨肉瘤(osteosarcoma,OS)为骨组织中最常见的恶性肿瘤之一,其具体发生机制目前尚未完全明确。研究证明,OS细胞在肿瘤发展阶段表达不同的细胞因子(cytokine,CK)及其受体,通过自分泌和旁分泌作用使其能够自主生长并赋予转移能力。参与作用的CK主要包括胰岛素样生长因子-1、转化生长因子-β、趋化因子5、白细胞介素-8,它们可调节肿瘤微环境,有利于肿瘤的生长、侵袭和转移。本文对CK的作用、作用方式及其与OS细胞的生物学相关性作一综述,以期为OS的临床治疗提供有效的新标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 骨肉瘤 自分泌 旁分泌 细胞因子

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骨肉瘤新生血管生成相关机制及治疗策略 被引量：4

4

作者 许伟 丁聚贤 +5 位作者 谢兴文 李宁 徐世红 苏积亮 宋学文 柳博 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期649-654,共6页

骨肉瘤(OS)是青少年最常见的原发恶性骨肿瘤之一。目前OS的治疗方法主要是新辅助化疗联合保肢手术,在一定程度上提高了OS患者的5年生存率,局部复发与转移是治疗失败的主要原因。肿瘤新生血管生成参与肿瘤侵袭和远处转移。近年来针对新... 骨肉瘤(OS)是青少年最常见的原发恶性骨肿瘤之一。目前OS的治疗方法主要是新辅助化疗联合保肢手术,在一定程度上提高了OS患者的5年生存率,局部复发与转移是治疗失败的主要原因。肿瘤新生血管生成参与肿瘤侵袭和远处转移。近年来针对新生血管生成的相关机制研究较多,同时越来越多的抗血管生成药物被研发且得到了临床验证。本文就目前OS新生血管生成的相关机制及治疗策略作一概述,以期为OS抗血管生成治疗的临床应用奠定基础。 展开更多

关键词 骨肉瘤(os) 抗血管生成 分子机制 治疗

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HSP90β对人骨肉瘤MG63细胞干性特征的影响及分子影响机制

5

作者 李增佑 舒雄 +1 位作者 刘辉琦 刘永年 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2023年第1期55-68,共14页

目的研究HSP90β对人骨肉瘤MG63细胞干性特征的影响及其相关分子机制。方法将骨肉瘤MG63细胞进行慢病毒转染并分为四组:过表达HSP90β组(HSP90β-pEZ)、过表达对照组(NEG-pEZ)、沉默HSP90β组(HSP90β-shRNA)以及沉默对照组(NEG-shRNA)... 目的研究HSP90β对人骨肉瘤MG63细胞干性特征的影响及其相关分子机制。方法将骨肉瘤MG63细胞进行慢病毒转染并分为四组:过表达HSP90β组(HSP90β-pEZ)、过表达对照组(NEG-pEZ)、沉默HSP90β组(HSP90β-shRNA)以及沉默对照组(NEG-shRNA)。用Western Blot法测定HSP90β蛋白以及SOX2、OCT4干性蛋白的表达水平,AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR等AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平;用细胞迁移实验(Transwell)法测定HSP90β对骨肉瘤MG63细胞迁移和侵袭功能的影响;用甲基纤维素成球(Self-renewal assay)法测定HSP90β对骨肉瘤MG63细胞自我更新的影响。并进行相关分子机制的研究。结果与NEG-pEZ组相比,HSP90β-pEZ组的HSP90β蛋白及干性相关蛋白表达水平明显升高(P<0.05);HSP90β-pEZ组细胞自我更新、迁移及侵袭活力均增加(P<0.05)。与NEG-shRNA组相比,HSP90β-shRNA组的HSP90β蛋白及干性相关蛋白表达水平显著降低(P<0.05);NEG-shRNA组自我更新、迁移及侵袭活力均减弱(P<0.05)。与NEG-pEZ组相比,HSP90β-pEZ组p-AKT、p-mTOR等AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);与NEG-shRNA组相比,HSP90β-shRNA组、p-AKT、p-mTOR等AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平明显降低(P<0.05)。结论HSP90β基因可能通过激活AKT/mTOR信号通路促进人骨肉瘤MG63细胞的自我更新、迁移及侵袭活力,并促进骨肉瘤细胞相关干性基因的表达。这也是HSP90β对人骨肉瘤MG63细胞干性特征产生影响的分子影响机制。 展开更多

关键词 骨肉瘤 HSP90β 干性特征

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骨肉瘤双硫死亡相关lncRNA预后预测模型的构建与验证

6

作者 李威材 秦刚 +6 位作者 何凯毅 苏国威 刘金富 肖世富 范以东 吴广涛 刘俊良 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期778-785,共8页

目的:构建双硫死亡相关lncRNA(disulfidptosis-relatedlncRNAs,DRLncs)的预后模型,以预测骨肉瘤(osteosarcoma,OS)的预后,提高患者生存率。方法:差异表达和皮尔逊(Pearson)相关性分析用于鉴定OS相关DRLncs,使用单变量Cox回归分析和最小... 目的:构建双硫死亡相关lncRNA(disulfidptosis-relatedlncRNAs,DRLncs)的预后模型,以预测骨肉瘤(osteosarcoma,OS)的预后,提高患者生存率。方法:差异表达和皮尔逊(Pearson)相关性分析用于鉴定OS相关DRLncs,使用单变量Cox回归分析和最小绝对收缩选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归分析构建DRLncs的风险预后模型。通过生存分析、受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线、列线图和校准曲线以验证模型的可靠性。此外,探讨预后模型与免疫微环境和药物敏感性之间的关系。选取近10年自广西中医药大学第一附属医院OS患者的肿瘤组织及健康人的正常组织各30例,通过实时荧光定量-PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)验证DRLncs在OS组织中的表达。结果:成功构建包含3种DRLncs(RERG-IT1、AL035446.1和AC010894.1)的风险预后模型,该模型在预测OS患者的总体生存率方面表现出良好的性能。DRLncs预后模型与肿瘤微环境、免疫浸润细胞和药物敏感性之间具有显著性相关。qRT-PCR实验结果显示,RERG-IT1在OS组织中表达显著升高,而AL035446.1和AC010894.1则显著降低(P<0.01)。结论:本研究构建的DRLncs预后模型可准确预测OS患者的预后,为OS的个性化治疗提供了新的思路。 展开更多

关键词 骨肉瘤 双硫死亡 长非编码 RNA 预后模型 生物信息学

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人骨肉瘤中PTEN、EGFR的表达及其与细胞增殖的关系 被引量：3

7

作者 高坤 朱智 +2 位作者 镐英杰 孙保国 裴福兴 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第23期4510-4512,4514,共4页

[目的]探讨PTEN、EGFR、PCNA在人骨肉瘤中表达的生物学意义及其相互关系,为阐明骨肉瘤的发病分子机制提供一定依据。[方法]选取60例人骨肉瘤标本(所有标本均根据细胞和组织分化程度,将骨肉瘤分为3级:1级14例,Ⅱ级28例,Ⅲ级18例),以20例... [目的]探讨PTEN、EGFR、PCNA在人骨肉瘤中表达的生物学意义及其相互关系,为阐明骨肉瘤的发病分子机制提供一定依据。[方法]选取60例人骨肉瘤标本(所有标本均根据细胞和组织分化程度,将骨肉瘤分为3级:1级14例,Ⅱ级28例,Ⅲ级18例),以20例骨软骨瘤为对照,采用免疫组化S-P法,检测PTEN、EGFR、PCNA在人骨肉瘤中表达。[结果]PCNA在骨肉瘤与骨软骨瘤间,骨肉瘤各级间表达差异有统计学意义(P﹤0.05);EGFR在骨肉瘤与骨软骨瘤间,骨肉瘤各级间,PCNA弱阳性组、强阳性组间表达差异有统计学意义(P﹤0.05);PTEN染色强弱在骨软骨瘤与骨肉瘤间差异有统计学意义(P﹤0.05);PTEN在骨肉瘤各级间,PCNA弱阳性组、强阳性组间表达差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]PCNA可作为骨肉瘤定性、分级的指标;EGFR在骨肉瘤的发生及恶性增殖中起到一定的作用,可作为骨肉瘤定性、分级指标;PTEN在骨肉瘤的发生中起到重要的作用,但其不可作为骨肉瘤的分级、恶性增殖指标。 展开更多

关键词 骨肉瘤 与细胞骨架蛋白tensin同源的在肿瘤的10号染色体有缺失的磷脂酶 表皮生长因子受体 细胞增殖核抗原 免疫组织化学

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骨肉瘤相关分子机制研究进展 被引量：3

8

作者 张明 胡向阳 杜远立 《海南医学》 CAS 2017年第11期1826-1829,共4页

骨肉瘤是临床常见的骨科恶性肿瘤之一,其侵袭力强,可早期转移,预后差。近年来,对于骨肉瘤的相关信号通路及分子机制研究愈发收到学者的重视,且对于信号通路、分子机制的研究也为骨肉瘤的治疗提供了更多的可能。本文主要从细胞信号通路,... 骨肉瘤是临床常见的骨科恶性肿瘤之一,其侵袭力强,可早期转移,预后差。近年来,对于骨肉瘤的相关信号通路及分子机制研究愈发收到学者的重视,且对于信号通路、分子机制的研究也为骨肉瘤的治疗提供了更多的可能。本文主要从细胞信号通路,抑癌基因、癌基因表达失衡,成骨细胞分化缺陷三部分介绍骨肉瘤相关分子机制研究进展。 展开更多

关键词 骨肉瘤 分子机制 信号通路 癌基因

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外周血miRNAs检测在骨肉瘤中的意义 被引量：2

9

作者 刘书中 劳立峰 王以朋 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期552-556,共5页

骨肉瘤是多发于儿童及青少年的原发性骨恶性肿瘤。目前,骨肉瘤患者预后较差,尚缺少有效的肿瘤标志物。mi RNAs是一组可以在转录后水平调控蛋白表达的非编码小分子RNA。mi RNAs参与调控一系列生理过程及包括骨肉瘤在内的多种恶性肿瘤的... 骨肉瘤是多发于儿童及青少年的原发性骨恶性肿瘤。目前,骨肉瘤患者预后较差,尚缺少有效的肿瘤标志物。mi RNAs是一组可以在转录后水平调控蛋白表达的非编码小分子RNA。mi RNAs参与调控一系列生理过程及包括骨肉瘤在内的多种恶性肿瘤的发生和发展。近年来的研究显示,外周血mi RNAs水平与骨肉瘤的病情进展密切相关,并有望成为骨肉瘤诊断、疗效及预后评估的新型生化指标。现就mi RNA的分子生物学特征,外周血mi RNA检测在骨肉瘤诊断、治疗效果及预后评估等领域的价值作一综述。 展开更多

关键词 外周血 MIRNA 骨肉瘤 诊断 治疗效果 预后评估

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长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因对骨肉瘤作用机制的研究进展 被引量：2

10

作者 杨亮 杨风光(综述) +1 位作者 向高 康学文(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期240-243,248,共5页

骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是儿童及青少年最常见的骨恶性肿瘤,恶性程度高,治疗手段虽不断进步,但患者长期生存率仍较低。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host gene,SNHG)对肿瘤的发生... 骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是儿童及青少年最常见的骨恶性肿瘤,恶性程度高,治疗手段虽不断进步,但患者长期生存率仍较低。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host gene,SNHG)对肿瘤的发生发展起重要作用,通过作用于相关miRNA及miRNA靶基因,激活下游信号分子,促进OS细胞的增殖、侵袭及迁移,为治疗OS提供了全新的分子靶点。目前,关于OS发病的分子机制尚不完善,本文就SNHG在OS中的作用机制及信号轴作一综述,为临床治疗OS提供理论基础。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 小核仁RNA宿主基因 骨肉瘤 信号通路

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AQP1在骨肉瘤中的表达和意义 被引量：1

11

作者 刘彦宾 吕智 郭贵明 《中国骨肿瘤骨病》 2008年第3期142-145,共4页

目的探讨骨肉瘤中AQP1的表达和临床意义。方法对39例骨肉瘤和22例骨良性疾病对照组标本采用免疫组化法观察AQP1的表达并用人工计数和自动图像分析两种方法检测其表达差别,同时行CD34抗体染色标记肿瘤微血管,计算所有标本MVD。结果①AQP... 目的探讨骨肉瘤中AQP1的表达和临床意义。方法对39例骨肉瘤和22例骨良性疾病对照组标本采用免疫组化法观察AQP1的表达并用人工计数和自动图像分析两种方法检测其表达差别,同时行CD34抗体染色标记肿瘤微血管,计算所有标本MVD。结果①AQP1表达于肿瘤微血管和小血管内皮细胞及绝大多数骨肉瘤的肿瘤细胞,尤其见于骨肉瘤的肿瘤巨细胞上;②人工计数AQP1阳性细胞百分比(YP)、AQP1人工计数分级、自动图像分析所得平均光密度(MD),均表明AQP1在骨肉瘤中高表达(P均<0.01);③骨肉瘤中AQP1的YP与MVD呈明显正相关(r=0.341,P<0.05)。结论大多数骨肉瘤肿瘤细胞高表达AQP1的原因不明;AQP1在骨肉瘤生物学行为及肿瘤微血管生成中占有重要作用;提示AQP1有可能作为骨肉瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 骨肉瘤 水通道蛋白1 肿瘤血管生成 微血管密度

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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及其作为骨肉瘤治疗靶点的研究进展 被引量：1

12

作者 胡向阳 陈涛 +1 位作者 张明 杜远立 《海南医学》 CAS 2018年第6期824-826,共3页

哺乳动物雷帕霉素靶向基因(mTOR)一直在肿瘤防治研究领域发挥着重要的作用,它具有特殊的生物学功能,对多种癌症的临床治疗具有重要意义,如骨癌、肺癌和乳腺癌等。近年来研究表明,mTOR信号通路在骨肉瘤的发生发展过程中起着重要的作用,... 哺乳动物雷帕霉素靶向基因(mTOR)一直在肿瘤防治研究领域发挥着重要的作用,它具有特殊的生物学功能,对多种癌症的临床治疗具有重要意义,如骨癌、肺癌和乳腺癌等。近年来研究表明,mTOR信号通路在骨肉瘤的发生发展过程中起着重要的作用,包括细胞生存、增殖、转移以及血管再生等。关于运用mTOR抑制剂作为抗肿瘤药物已经得到广泛研究,并取得一定进展,也为骨肉瘤的防治提供了新策略。本文将综述mTOR信号通路在骨肉瘤中的作用以及目前mTOR抑制剂在临床治疗中的研究现状。 展开更多

关键词 哺乳动物雷帕霉素靶向基因 骨肉瘤 细胞功能 临床研究

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miR-410-3p对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制

13

作者 孟桢桢 赵伟 +3 位作者 赵昂 黄晖 廉凯 曹园 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第10期1153-1162,共10页

目的探讨微小RNA-410-3p(mi R-410-3p)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法取对数生长期OS细胞系MG63、U2-OS、OS187及健康人成骨细胞h FOB1.19,采用多重实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)和Western blot和检测mi R-41... 目的探讨微小RNA-410-3p(mi R-410-3p)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法取对数生长期OS细胞系MG63、U2-OS、OS187及健康人成骨细胞h FOB1.19,采用多重实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)和Western blot和检测mi R-410-3p趋化素样因子超家族成员3(CMTM3)的表达;选取64例OS患者的OS组织及瘤旁组织标本,收集患者的一般临床资料和临床病理指标(性别、年龄、肿瘤大小、Enneking分期及淋巴结转移),分析2种组织标本中mi R-410-3p、CMTM3与患者临床病理指标的关系;采用q PCR和Western blot检测2种组织中mi R-410-3p和CMTM3蛋白表达。采用star Base软件结合双萤光素酶报告实验分析mi R-410-3p和CMTM3的靶向关系;MG63细胞分为anti-mi R-410-3p组(转染anti-mi R-410-3p)、anti-mi R-con组(转染anti-mi R-con)、NC组(空白对照)、pc DNA-CMTM3组(转染pc DNA-CMTM3)、pc DNA组(转染pc DNA)、anti-mi R-410-3p+si-con组(共转染anti-mi R-410-3p与si-con)、anti-mi R-410-3p+si-CMTM3组(共转染anti-mi R-410-3p与si-CMTM3),q PCR检测各组MG63细胞mi R-410-3p和CMTM3 m RNA表达,四甲基偶氮唑(MTT)法和流式细胞术分别检测各组MG63细胞的增殖与凋亡情况,Western blot检测CMTM3、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与瘤旁组织比较,OS组织中mi R-410-3p表达量增加,CMTM3 m RNA和蛋白表达量降低(P<0.05);mi R-410-3p和CMTM3与肿瘤Enneking分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05);与健康人成骨细胞h FOB1.19细胞比较,OS细胞系MG63、U2-OS及OS187中的mi R-410-3p表达量增加(P<0.05),CMTM3 m RNA和蛋白表达量减少(P<0.05);与mi R-con组比较,mi R-410-3p可降低WT-CMTM3萤光素酶相对活性(P<0.05),但对MUT-CMTM3萤光素酶相对活性无影响(P>0.05);与anti-mi R-con组比较,anti-mi R-410-3p组MG63细胞48 h、72 h的细胞活性及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达量增加(P<0 展开更多

关键词 骨肉瘤 细胞增殖 凋亡 微小RNA-410-3p 趋化素样因子超家族成员3

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二甲双胍联合顺铂对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用

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作者 张翔 赵帅帅 +3 位作者 王雅玲 张洁 殷松娜 吴博 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期960-966,共7页

为研究二甲双胍联合顺铂处理对人成骨肉瘤MG-63细胞的影响及潜在作用机制,本研究使用无药物处理组为对照组细胞,使用二甲双胍和顺铂联合处理MG-63细胞,采用CCK8法和流式细胞术检测细胞的增殖凋亡情况;用细胞克隆形成实验检测各组克隆形... 为研究二甲双胍联合顺铂处理对人成骨肉瘤MG-63细胞的影响及潜在作用机制,本研究使用无药物处理组为对照组细胞,使用二甲双胍和顺铂联合处理MG-63细胞,采用CCK8法和流式细胞术检测细胞的增殖凋亡情况;用细胞克隆形成实验检测各组克隆形成率;用Trans well实验检测各组细胞迁移侵袭能力,用qPCR法和蛋白质印迹法检测凋亡相关基因的RNA水平和蛋白质水平表达量。结果显示,二甲双胍联合顺铂处理对人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖抑制作用更加显著(P<0.01);流式细胞术检测结果也表明,二甲双胍联合顺铂处理能够更显著的促进人成骨肉瘤MG-63细胞的凋亡(P<0.01);细胞克隆形成的结果表明,二甲双胍联合顺铂处理抑制人成骨肉瘤MG-63细胞克隆的形成(P<0.01);Trans well结果表明,二甲双胍联合顺铂处理抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);qPCR和蛋白质印迹法检测结果表明,二甲双胍联合顺铂处理后可下调人成骨肉瘤MG-63细胞中凋亡相关基因MCl-1和XIAP(P<0.01),上调凋亡标志基因CASPASE-3和Cyto C(P<0.01),及细胞迁徙侵袭相关基因MMP-2和MMP-9(P<0.01)表达水平。本研究结果表明,二甲双胍联合顺铂对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制可能是通过调节MCL-1和XIAP来促进人成骨肉瘤MG-63细胞的凋亡,通过调节MMP-2和MMP-9途径来实现抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的迁移侵袭。 展开更多

关键词 骨肉瘤 顺铂 二甲双胍 增殖

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用高转移人骨肉瘤亚群OS-732建立裸鼠骨肉瘤肺转移模型 被引量：3

15

作者 王迪凡 徐立辉 《临床和实验医学杂志》 2017年第15期1466-1470,共5页

目的建立一种发病过程类似人类骨肉瘤肺转移的动物模型。方法分别采用5×10~5、1×10~6、5×10~6三个剂量的高转移人骨肉瘤亚群OS-732接种裸鼠皮下,饲养8周。测量局部肿瘤和肺转移结节。结果 5×10~5组无论是局部成瘤... 目的建立一种发病过程类似人类骨肉瘤肺转移的动物模型。方法分别采用5×10~5、1×10~6、5×10~6三个剂量的高转移人骨肉瘤亚群OS-732接种裸鼠皮下,饲养8周。测量局部肿瘤和肺转移结节。结果 5×10~5组无论是局部成瘤率和肺转移率均为0。1×10~6组和5×10~6组局部成瘤率均为100%,肺转移率均为87.5%。从后二者的生长曲线上看,局部肿瘤的生长趋势大致相同,在第8周时,两组局部肿瘤的湿重和平均直径无显著差异(P>0.05)。可以认为两组的局部肿瘤生长趋势无显著差异。从两组的肺转移情况看,两组的肺转移率均为87.5%,肺表面结节数无显著性差异,肺结节总转移数无显著性差异(P>0.05)。结论 1×10~6、5×10~6剂量的高转移人骨肉瘤亚群OS-732接种裸鼠皮下均可建成满意的骨肉瘤肺转移模型。从动物生存时间和转移的专一性上看,1×10~6OS-732的剂量更加合理,建立的模型更为实用,是研究骨肉瘤肺转移理想的动物模型。 展开更多

关键词 裸鼠 骨肉瘤肺转移 动物模型 高转移人骨肉瘤亚群os-732

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人参皂苷对人体骨肉瘤细胞U_2OS增殖的影响 被引量：28

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作者 张有为 窦德强 +1 位作者 陈英杰 姚新生 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期232-236,共5页

目的　为寻找人参中抑制骨肉瘤细胞增殖的活性成分。方法　采用细胞计数法检测了 2 7种从人参中得到的单体化合物对体外培养的人体骨肉瘤细胞 U2 OS增殖的影响 ;以流式细胞术分析 DNA含量 ,选择有抑制肿瘤细胞增殖作用的化合物对肿瘤细... 目的　为寻找人参中抑制骨肉瘤细胞增殖的活性成分。方法　采用细胞计数法检测了 2 7种从人参中得到的单体化合物对体外培养的人体骨肉瘤细胞 U2 OS增殖的影响 ;以流式细胞术分析 DNA含量 ,选择有抑制肿瘤细胞增殖作用的化合物对肿瘤细胞的细胞增殖周期的变化进行研究 ;另外 ,以荧光染色法检测了人参皂苷对细胞死亡率变化的影响。结果　对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用研究表明 ,在 5 μmol/ L 浓度下 ,人参皂苷 - Ro,- Rh1 ,- Rh2 ,- F1 和 - L8较明显地抑制了肿瘤细胞的增殖 ,人参皂苷 - Rg1 ,- F3,- Rf,PPT和 PT显著地抑制了肿瘤细胞的增殖 ;进一步对骨肉瘤细胞有抑制作用的化合物检测其对细胞增殖周期影响发现 :人参皂苷 - Ro,- Rf,- Rg1 ,- F1 ,- Rh2 ,PPT和 PT使处于 G0 / G1 期的细胞数目明显增多 ,伴随着 S期和 G2 + M期的细胞明显减少 ,说明这些化合物抑制了肿瘤细胞增殖周期的进行 ;与对照相比人参皂苷 - Rf1 ,- Rg1 ,- F1 和 PPT显著地促进了肿瘤细胞的细胞死亡现象。结论人参皂苷是通过阻止细胞增殖周期的 G0 / G1 期或促使细胞死亡两种方式抑制了肿瘤细胞 U2 展开更多

关键词 人参皂苷 骨肉瘤细胞U2os 细胞增殖 细胞周期 细胞死亡

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中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞诱导凋亡的作用 被引量：14

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作者 张俐 于波 林建华 《中国骨伤》 CAS 2009年第4期265-268,共4页

目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U... 目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U-2OS细胞培养于含10%胎牛血清,青霉素100IU/ml,链霉素100μg/ml的RPMI1640培养液中,置于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。用MTT法检测不同含药血清浓度对骨肉瘤U-2OS细胞增殖的影响,筛选对骨肉瘤U-2OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清浓度。③在倒置相差显微镜和电镜下观察骨肉瘤U-2OS细胞形态。④TUNEL原位末端标记法检测细胞的凋亡。⑤提取基因DNA,琼脂糖凝胶电泳,以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果:①20%片仔癀含药血清对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用最佳。②倒置相差显微镜观察可见空白血清组细胞呈梭形贴壁生长,在20%片仔癀胶囊含药血清组,可见部分细胞体积变小、变圆,细胞膜完整但出现发泡现象,折光性增强。随作用时间延长,变圆细胞逐渐增多,部分贴壁细胞皱缩、变圆、脱落,可见坏死细胞及碎片。③20%片仔癀胶囊含药血清组TUNEL检测阳性。④DNALadder电泳结果:含药血清组细胞基因DNA凝胶电泳出现明显的梯状带。⑤透射电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 细胞凋亡 中药 片仔癀 骨肉瘤U-2os细胞

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紫草素通过内质网应激蛋白抑制人骨肉瘤U-2 OS细胞增殖的研究 被引量：5

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作者 缪明星 黄莉莉 王欣 《现代药物与临床》 CAS 2019年第10期2899-2904,共6页

目的研究紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞存活的抑制和对内质网应激蛋白的调控机制。方法采用CCK-8法检测0.156 25~4μmol/L紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞抑制率;取对数生长期U-2 OS细胞,分别给予0~4μmol/L紫草素诱导U-2 OS细胞凋亡,24 h后... 目的研究紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞存活的抑制和对内质网应激蛋白的调控机制。方法采用CCK-8法检测0.156 25~4μmol/L紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞抑制率;取对数生长期U-2 OS细胞,分别给予0~4μmol/L紫草素诱导U-2 OS细胞凋亡,24 h后用流式细胞术检测细胞凋亡率;通过Western blotting检测紫草素对内质网应激蛋白ATF6、IRE1α、ATF4、GRP78的表达调控作用;将混有质粒或小干扰RNA的Lipofectamine 2000试剂处理U-2 OS细胞6 h换液,加入紫草素处理,检测ATF4或GRP78对紫草素处理的细胞活力的影响;将ATF4或空白质粒(3μg)、GRP78报告质粒(3μg)和海肾内参质粒(4μg)均匀混合,用Lipofectamine 2000试剂对人骨肉瘤U-2 OS细胞进行转染,6 h换液,加入0.8μmol/L紫草素继续孵育24h,实验结果用各孔海肾荧光做参比进行校正,检测紫草素对ATF4介导的GRP78转录的调控作用。结果紫草素显著抑制人骨肉瘤细胞的活力并能浓度相关性促进细胞凋亡;Westernblotting结果显示,紫草素能特异性增加ATF4和GRP78蛋白的表达;过表达ATF4能显著抑制U-2 OS细胞活力(P<0.01);敲低ATF4能部分逆转紫草素对细胞活力的抑制(P<0.01);过表达GRP78并不影响紫草素对细胞存活的抑制效果,但敲低GRP78可以显著增加紫草素对U-2 OS细胞活力的抑制(P<0.01);报告基因结果显示紫草素能增加ATF4对GRP78基因的转录调控。结论紫草素能显著抑制人骨肉瘤U-2 OS细胞活力,诱导内质网应激蛋白的表达,敲低GRP78能进一步增加紫草素的细胞毒性。 展开更多

关键词 紫草素 U-2 os细胞 凋亡率 内质网应激 ATF6 IRE1α ATF4 GRP78

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浅蓝菌素联合表阿霉素对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖的抑制作用 被引量：3

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作者 邹平安 刘志礼 +3 位作者 罗庆丰 王高 周扬 舒勇 《实用癌症杂志》 2011年第3期243-244,249,共3页

目的研究浅蓝菌素(Cerulenin)增强表阿霉素(Epirubicin)对人骨肉瘤细胞(U2-OS)抑制作用。方法在体外表阿霉素和浅蓝菌素单独及联合作用于人骨肉瘤细胞U2-OS,MTT法检测其增殖抑制情况,金氏Q值评价联合用药效应。结果表阿霉素及浅蓝菌素... 目的研究浅蓝菌素(Cerulenin)增强表阿霉素(Epirubicin)对人骨肉瘤细胞(U2-OS)抑制作用。方法在体外表阿霉素和浅蓝菌素单独及联合作用于人骨肉瘤细胞U2-OS,MTT法检测其增殖抑制情况,金氏Q值评价联合用药效应。结果表阿霉素及浅蓝菌素均对人骨肉瘤细胞(U2-OS)有抑制作用;联合用药细胞抑制率明显增高,Q值分别为1.24(1μg/ml表阿霉素+1μg/ml浅蓝菌素)和0.96(10μg/ml表阿霉素+20μg/ml浅蓝菌素)。结论浅蓝菌素能增强表阿霉素对人骨肉瘤细胞(U2-OS)的抑制效应。 展开更多

关键词 浅蓝菌素 表阿霉素 人骨肉瘤细胞(U2-os) 增殖抑制

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白芦藜醇对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响及其分子机制 被引量：2

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作者 王浩 唐宁曼 +1 位作者 张雄 王进 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期39-44,共6页

目的观察白芦藜醇(resveratrol,Res)对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,用不同浓度的Res(5、10、20、40、80μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)后,MTT法检测Res对U-2OS细胞增... 目的观察白芦藜醇(resveratrol,Res)对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,用不同浓度的Res(5、10、20、40、80μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)后,MTT法检测Res对U-2OS细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测Res对细胞周期和凋亡的影响;应用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶活性;Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2和Caspase 3蛋白的表达水平。结果 Res作用24 h时,与空白对照组及DMSO组比较,20和40μmol/L Res组的细胞增殖抑制率、G0/G1和G2/M期的细胞比例、细胞凋亡率、Caspase-3酶活性显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05);20μmol/L Res组U-2OS细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 Res通过诱导提高Caspase-3酶活性,上调促凋亡基因Bax、Caspase-3及下调抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达水平,从而抑制U-2OS细胞的增殖,促进其凋亡,为Res治疗骨肉瘤提供了实验依据。 展开更多

关键词 白芦藜醇 骨肉瘤细胞U-2os 细胞增殖 细胞凋亡

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