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胎牛血清外泌体对成骨细胞增殖的作用 被引量：5
1
作者 徐慧君 张咪 +4 位作者 史东梅 吴赛璇 陆颖 董明 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第31期4961-4965,共5页
背景:研究表明外泌体具有促进骨再生的能力,但从胎牛血清中提取的外泌体是否可以促进骨形成仍存在争议。目的:观察胎牛血清外泌体对成骨细胞增殖能力的影响,从而为临床治疗骨破坏提供新思路。方法:通过超速离心法从胎牛血清中提取外泌体... 背景:研究表明外泌体具有促进骨再生的能力,但从胎牛血清中提取的外泌体是否可以促进骨形成仍存在争议。目的:观察胎牛血清外泌体对成骨细胞增殖能力的影响,从而为临床治疗骨破坏提供新思路。方法:通过超速离心法从胎牛血清中提取外泌体,采用透射电子显微镜和Western blot法验证外泌体是否提取成功;然后用10 mg/L胎牛血清外泌体干预成骨前体细胞MC3T3-E1,通过CCK-8实验检测外泌体对成骨细胞增殖能力的影响,Western blot检测外泌体对成骨细胞骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白表达的影响。以不含外泌体的胎牛血清培养的MC3T3-E1细胞为对照组。结果与结论:①胎牛血清外泌体具有典型的脂质双层膜结构,大小在30-150 nm之间,外泌体表面标记因子CD81表达呈阳性,而微囊表面标记物CD40表达呈阴性;②外泌体组的增殖能力明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);外泌体组成骨标志性因子骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白的表达水平明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);③结果表明,胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起促进作用,可为临床治疗骨破坏提供新思路。 展开更多
关键词 外泌体 胎牛血清 成骨前体细胞 骨破坏 骨形态发生蛋白2 骨桥蛋白 CD81 CD40
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琥珀酸调控小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞成骨分化的作用研究 被引量：2
2
作者 魏坦军 胡昊 徐峰 《华南国防医学杂志》 CAS 2019年第10期669-672,703,共5页
目的探讨琥珀酸调控小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1成骨分化的作用及其可能的机制研究。方法配置0.01、0.10、0.50、1、2 mmol/L琥珀酸,分别处理MC3T3-E1细胞48h,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,M... 目的探讨琥珀酸调控小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1成骨分化的作用及其可能的机制研究。方法配置0.01、0.10、0.50、1、2 mmol/L琥珀酸,分别处理MC3T3-E1细胞48h,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞增殖能力。实验分为琥珀酸组和对照组,经成骨分化诱导7 d,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测细胞成骨分化能力。经成骨分化诱导14 d,采用茜素红染色分析钙结节沉积数量。经成骨分化诱导7 d,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot分别检测两组MC3T3-E1细胞成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA和蛋白的表达水平变化。结果低浓度(0.01 mmol/L和0.10 mmol/L)琥珀酸组MC3T3-E1吸光度值与对照组差异无统计学意义(P>0.05),高浓度(0.50 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L)的琥珀酸组吸光度值均低于对照组(P<0.05或0.01)。琥珀酸处理组(1 mmol/L)ALP活性低于对照组[(0.55±0.11)vs.(0.96±0.11),P<0.05];两组矿化钙结节统计结果显示:琥珀酸处理组钙结节数目低于对照组[(8.32±0.83)vs.(14.22±2.10),P<0.05]。琥珀酸处理组MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05或0.01),琥珀酸处理组小鼠MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的蛋白相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论琥珀酸可抑制小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞的增殖和成骨分化能力,其机制可能与抑制成骨分化相关Runx2和OCN基因表达相关。 展开更多
关键词 骨质疏松症 琥珀酸 成骨分化 成骨前体细胞
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壳聚糖/矿化胶原多孔支架构建及体外成骨分化与生物相容性 被引量：2
3
作者 孙溪饶 包佳昕 王程越 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第34期5498-5503,共6页
背景:壳聚糖材料具有良好的生物相容性、生物可降解性和低免疫原性,但其活性较差;矿化胶原材料具有良好的生物相容性,但机械性能不足,将两者结合可能会表现出更好的机械性能及成骨活性。目的:构建不同配比的壳聚糖/矿化胶原多孔支架,表... 背景:壳聚糖材料具有良好的生物相容性、生物可降解性和低免疫原性,但其活性较差;矿化胶原材料具有良好的生物相容性,但机械性能不足,将两者结合可能会表现出更好的机械性能及成骨活性。目的:构建不同配比的壳聚糖/矿化胶原多孔支架,表征其表面特征与生物相容性。方法:采用冷冻干燥法制备单纯的壳聚糖支架与壳聚糖矿化胶原质量比分别为2∶1、1∶1的壳聚糖/矿化胶原多孔支架,通过扫描电镜、能量色散谱仪、X射线衍射仪、傅里叶红外光谱表征3组支架的表面形貌、元素组成及物相结构。将小鼠成骨前体细胞直接接种于3组支架表面,扫描电镜观察细胞黏附情况。将空白对照及3组材料浸提液分别与小鼠成骨前体细胞共培养,通过CCK-8实验、鬼笔环肽染色及碱性磷酸酶活性分析各组材料对小鼠成骨前体细胞增殖与分化的影响。结果与结论:(1)扫描电镜下可见,单纯壳聚糖多孔支架界面存在明显间隙,壳聚糖/矿化胶原多孔支架界面键合紧密,同时随着支架中壳聚糖含量的减少,矿化胶原颗粒在支架中产生的团聚现象更加明显;能量色散谱仪检测结果显示,单纯壳聚糖支架表面的元素主要为碳、氮、氧,加入矿化胶原后支架材料表面的钙、磷元素逐渐增多;X射线衍射图谱和傅里叶红外光谱显示壳聚糖与矿化胶原为物理性结合;(2)扫描电镜下可见细胞在3组支架材料表面正常黏附和铺展,其中黏附于单纯壳聚糖支架表面的细胞数量较少;(3)CCK-8实验显示,与单纯壳聚糖多孔支架浸提液相比,两种配比的壳聚糖/矿化胶原多孔支架浸提液可促进小鼠成骨前体细胞的增殖;细胞骨架染色显示,两种配比的壳聚糖/矿化胶原多孔支架浸提液组细胞密度较高,细胞丝足相互连接,微丝肌动蛋白表达更清晰;(4)碱性磷酸酶活性检测显示,与单纯壳聚糖多孔支架浸提液相比,两种� 展开更多
关键词 壳聚糖 矿化胶原 小鼠成骨前体细胞 多孔支架 成骨分化 生物相容性
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