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二甲双胍干预骨关节炎模型小鼠早期骨关节炎软骨及软骨下骨变化 被引量：9
1
作者 冯晓峰 张荣凯 +4 位作者 祁伟仲 潘剑英 李俊彦 白晓春 蔡道章 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第19期3031-3036,共6页
背景:有研究表明,二甲双胍具有抗炎的作用,能够有效抑制白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等炎症因子的表达,可通过激活AMPK信号通路影响骨骼的代谢,但其对关节软骨及软骨下骨的作用尚未明确。目的:探讨二甲双胍对小鼠早期骨关节炎关节软... 背景:有研究表明,二甲双胍具有抗炎的作用,能够有效抑制白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等炎症因子的表达,可通过激活AMPK信号通路影响骨骼的代谢,但其对关节软骨及软骨下骨的作用尚未明确。目的:探讨二甲双胍对小鼠早期骨关节炎关节软骨的损伤及软骨下骨病理改变的影响。方法:SPF级雄性C57小鼠,出生3 d内乳鼠(用于原代软骨细胞培养)均由南方医科大学实验动物中心提供,实验方案经南方医科大学第三附属医院动物实验伦理委员会批准。①造模实验:将8周龄C57雄性小鼠随机分成模型对照组和造模+二甲双胍组,均建立创伤性骨关节炎模型;造模+二甲双胍组小鼠造模后用二甲双胍200 mg/(kg·d)灌胃给药;模型对照组灌胃等量生理盐水。用药后5周小鼠麻醉后取膝关节标本,番红O快速绿染色、OARSI评分评估小鼠关节软骨的损伤情况及软骨下骨硬化程度;免疫组织化学染色检测基质金属蛋白酶13、Ⅱ型胶原、RUNX2、骨钙素蛋白的表达。②细胞实验:取出生3 d内乳鼠原代软骨细胞培养,先用10μg/L白细胞介素1β诱导,再用二甲双胍(5,10 mmol/L)共培养,Western Blot检测原代软骨细胞Ⅱ型胶原、RUNX2、骨钙素蛋白的表达。结果与结论:①番红O快速绿染色及OARSI评分显示:模型对照组的关节软骨损伤、软骨下骨的硬化程度与造模+二甲双胍组相比更加严重;②免疫组化的结果显示:模型对照组基质金属蛋白酶13蛋白表达显著高于造模+二甲双胍组;造模+二甲双胍组Ⅱ型胶原的表达呈上升趋势,成骨蛋白RUNX2、骨钙素表达呈下降趋势(P <0.05);③原代软骨细胞培养结果:单纯白细胞介素1β刺激下,软骨细胞基质金属蛋白酶13及RUNX2的表达明显增加,Ⅱ型胶原的表达则明显下降;加入二甲双胍后,随着其浓度的增加,基质金属蛋白酶13及RUNX2的表达呈浓度依赖性的下降,而Ⅱ型胶原的表达随二甲双胍� 展开更多
关键词 软骨下骨 二甲双胍 骨关节炎 关节软骨 骨关节炎软骨 软骨基质
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ATF4靶向AKT1对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响 被引量：8
2
作者 秦燕 史晓娟 梁卓文 《解剖学研究》 CAS 2022年第1期18-23,共6页
目的探讨活化转录因子4(ATF4)靶向蛋白激酶B(AKT1)对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响。方法体外实验:①体外培养正常软骨细胞与骨关节炎(OA)软骨细胞,实时荧光定量PCR检测两组细胞内ATF4、AKT1的mRNA表达水平;②通过细胞转染法构建... 目的探讨活化转录因子4(ATF4)靶向蛋白激酶B(AKT1)对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响。方法体外实验:①体外培养正常软骨细胞与骨关节炎(OA)软骨细胞,实时荧光定量PCR检测两组细胞内ATF4、AKT1的mRNA表达水平;②通过细胞转染法构建下调ATF4的OA软骨细胞;③MTT法及Annexin V/PI流式细胞术检测OA软骨细胞增殖及凋亡情况;④生物信息学预测ATF4靶向基因结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证ATF4与AKT1的靶向关系;⑤共同转染构建ATF4下调及AKT1上调的OA软骨细胞,同样的方法检测其细胞增殖及凋亡情况。动物实验:取6个月月龄雄性Duncan豚鼠30只,随机均分为3组,A、B两组皮下均植入Alzet微量泵,ATF4组每天泵注含PBS稀释过的ATF4,PBS组泵注单纯PBS液,取豚鼠膝关节软骨,评估3组Mankin组织评分及膝关节软骨组织内IL⁃1及TNF⁃α水平。结果与正常软骨细胞相比,OA软骨细胞ATF4 mRNA表达量均显著上升(P<0.05),AKT1mRNA表达量均显著下降(P<0.05)。ATF4⁃mimics转染物可上调细胞ATF4的表达,且细胞增殖能力下降,凋亡能力上升,ATF⁃inhibitor能下调细胞ATF4表达,细胞则表现出相反的增殖及凋亡特点。靶基因预测ATF4与AKT13’UTR存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因验证了AKT1是ATF4的靶向基因。动物实验表明,ATF4组豚鼠膝关节软骨组织Mankin组织评分显著高于PBS组及空白组(P<0.05),膝关节软骨内IL⁃1及TNF⁃α表达水平明显高于阴性对照组及正常对照组(P<0.05)。结论ATF4在促进OA软骨细胞凋亡中发挥积极作用,其作用机制可能与靶向调控AKT1相关。 展开更多
关键词 活化转录因子4 蛋白激酶B 骨关节炎细胞 凋亡 软骨退变 靶向作用
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中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响 被引量：8
3
作者 周斌 樊粤光 曾意荣 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2009年第2期11-13,共3页
目的:观察复方中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响,探讨其疗效机制。方法:通过左膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨性关节炎模型,36只新西兰兔随机分为6组:A组(正常组)、B组(造模组)、C组(空白对照组)、D组(关节康组)、... 目的:观察复方中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响,探讨其疗效机制。方法:通过左膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨性关节炎模型,36只新西兰兔随机分为6组:A组(正常组)、B组(造模组)、C组(空白对照组)、D组(关节康组)、E组(西乐葆组)和F组(壮骨关节丸组)。木瓜蛋白酶注射结束后2周D、E、F组分别予以关节康、西乐葆、壮骨关节丸治疗4周,取左膝关节软骨行IL-1β、TGF-β1免疫组化染色。结果:关节康组提高关节软骨TGF-β1表达的效果最明显,而西乐葆组降低关节软骨IL-1β表达的效果最明显。结论:关节康治疗膝骨性关节炎的疗效机理可能在提高关节软骨的TGF-β1含量,降低IL-1β含量,从而直接或间接促进了损伤关节软骨的修复。 展开更多
关键词 骨性关节炎软骨 中药疗法 IL-1Β TGF—β1 免疫组化
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IL1,TGFβ和BMP在骨性关节炎的关节软骨中的表达 被引量：7
4
作者 滕华建 曲绵域 +3 位作者 林宗智 康勇 张美荣 刘燕 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期300-302,共3页
采用免疫组织化学染色技术，检测白细胞介素１（ＩＬ１），转化生长因子β（ＴＧＦβ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在骨性关节炎的关书软骨中的表达。结果显示：（１）ＩＬ１与ＴＧＦβ在病损的关节软骨表浅层细胞中表达，ＴＧＦβ还在... 采用免疫组织化学染色技术，检测白细胞介素１（ＩＬ１），转化生长因子β（ＴＧＦβ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在骨性关节炎的关书软骨中的表达。结果显示：（１）ＩＬ１与ＴＧＦβ在病损的关节软骨表浅层细胞中表达，ＴＧＦβ还在病损的关节软骨中由发生族集的软骨细胞表达。（２）在关节软骨病损达软骨下骨部位，ＢＭＰ，ＴＣＦβ和ＩＬ１在新生的软骨组织的一些细胞中表达。我们的结果提示，ＩＬ１，ＴＧＦβ和ＢＭＰ以自分泌和（或）旁分泌的形式，在骨性关节炎的病理过程中起重要作用，涉及关节软骨的病损及修复。 展开更多
关键词 骨性关节炎 软骨 细胞因子 白细胞介素1 表达
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全基因组DNA甲基化分析骨关节炎中特征性基因和功能信号通路 被引量：1
5
作者 胥伯勇 阿不都赛米·艾买提 +3 位作者 汪斐 张晓岗 李国庆 曹力 《新疆医科大学学报》 CAS 2022年第9期947-952,共6页
目的研究骨关节炎患者关节软骨中DNA甲基化的特征,分析甲基化基因的表达在骨关节炎发生发展中的作用。方法收集2018年3月—2019年1月在新疆医科大学附属第一医院关节中心3例接受全膝人工关节置换术的骨关节炎(Osteoarthritis,OA)患者(OA... 目的研究骨关节炎患者关节软骨中DNA甲基化的特征,分析甲基化基因的表达在骨关节炎发生发展中的作用。方法收集2018年3月—2019年1月在新疆医科大学附属第一医院关节中心3例接受全膝人工关节置换术的骨关节炎(Osteoarthritis,OA)患者(OA组),3例膝关节软骨正常截肢患者(对照组)软骨组织标本。采用Illumina Infinium Methylation EPIC Bead Chip(850K芯片)对软骨进行甲基化分析。应用InCroMAP软件进行关节软骨中全基因组DNA甲基化及mRNA表达扩增谱的整合途径富集分析。基于DAVID数据库进行基因本体论(Gene ontology,GO)分析和京都基因及基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析。结果单基因分析结果显示,本研究共获得1299个差异甲基化基因;整合DNA甲基化的mRNA表达谱发现,64个基因显著改变,包括远中缺失同源盒基因5(DLX5)、同源异型盒基因5(HOXA5)、软骨酸性蛋白1(CRTAC1)和可溶性富含半胱氨酸结构域的清道夫受体蛋白(SSC5D);GO分析发现,上述基因功能与免疫应答、炎症反应、细胞增殖等有关;KEGG分析发现,上述基因介导与OA发病密切相的丝裂原活化蛋白激酶(MAKP)信号通路和Hippo信号通路。结论OA生物信息学分析发现可能的异常甲基化差异表达基因和信号通路,这可能会对OA发生和发展过程中的表观遗传学机制的阐明提供新的思路。 展开更多
关键词 骨关节炎 DNA甲基化谱 mRNA表达谱 整合分析
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3.0T MRI T2-mapping对膝关节软骨退变的评估价值 被引量：23
6
作者 王鹤翔 郝大鹏 +3 位作者 徐文坚 李玉军 王湘达 刘世恩 《磁共振成像》 CAS 2012年第4期245-249,共5页
目的将MRI表现与病理学对照,研究膝关节胫骨平台软骨退变的MRT2值、T2-mapping表现及其评估关节软骨退变的价值。材料与方法选取全膝关节置换术患者的31个膝关节中符合纳入标准的18个膝关节胫骨平台进行T2-mapping(T2弛豫时间)成像,共获... 目的将MRI表现与病理学对照,研究膝关节胫骨平台软骨退变的MRT2值、T2-mapping表现及其评估关节软骨退变的价值。材料与方法选取全膝关节置换术患者的31个膝关节中符合纳入标准的18个膝关节胫骨平台进行T2-mapping(T2弛豫时间)成像,共获取98个软骨亚区(标本),以病理学Mankin分级为标准,评估T2值、T2-mapping伪彩图发现软骨退变的能力。根据组织学Mankin分级标准把不同退变程度的软骨T2值分5组输入数据库,应用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验进行统计学处理。结果 0级(正常)软骨的T2值[(32.28+4.15)ms]与Ⅱ级软骨[(34.42+5.76)ms]、Ⅰ级软骨的T2值[(37.72+4.83)ms]与Ⅱ级软骨、Ⅲ级软骨的T2值[(41.63+6.10)ms]与Ⅳ级软骨[(45.98+7.32)ms]两两比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);Ⅰ级软骨的T2值与Ⅲ级及Ⅳ级、Ⅱ级软骨的T2值与Ⅲ级和Ⅳ级分别两两比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。总体上,T2值伴随软骨退变程度的增加而明显升高,其中软骨退变Ⅱ级较Ⅰ级的T2值轻度降低,但Ⅱ级与Ⅰ级及正常软骨T2值之间差异无统计学意义(P值均>0.05)。T2-mapping伪彩图信号改变可以敏感的发现软骨退变,但无法区分软骨的退变程度。结论关节软骨的T2值与软骨退变程度有着明显的相关性,随着软骨退变程度的加重T2值明显升高,是发现早期软骨退变的敏感方法。 展开更多
关键词 骨关节炎 膝 软骨 磁共振成像 病理学
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