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题名嗅鞘细胞的分离纯化及上清液中神经营养因子的测定
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作者
尹丽慧
叶爱芳
陈迟琪
吴建波
倪文飞
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机构
温州医学院附属第一医院医科所
温州医学院附属第二医院骨科
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出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期433-437,共5页
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基金
浙江省自然科学基金(Y2111114
Y2110402)
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文摘
目的:创建理想的纯化嗅鞘细胞(OECs)的方法,并观察不同时间段OECs上清液中神经营养因子的含量,为选择OECs移植的最佳时机提供理论依据。方法:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法纯化培养OECs,采用荧光染色法鉴定OECs并进行纯度测定;采用ELISA法检测培养上清液中神经生长因子(NGF),脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)的水平。结果:通过上述方法,可以得到纯度85%以上的OECs,光镜下OECs突起细长,以典型的双极或三极细胞为主,背景有少量扁平的、折光性差的细胞存在;NGF、BDNF和GDNF在上清液中均有存在,其中NGF含量最高,NGF和BDNF含量随着培养时间延长逐渐升高,11 d达到高峰,GDNF仅在培养第11 d后检测到。结论:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法可以获得较高纯度的OECs,培养1114 d,OECs数量多且分泌旺盛,适合用于细胞移植。
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关键词
嗅鞘细胞
原代培养
神经营养因子
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Keywords
olfactory ensheathing cells; primary culture; neurotrophic factor
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分类号
R329
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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