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题名核受体辅活化蛋白7与自噬体蛋白LC3的相互作用
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作者
汪林翠
林琼
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机构
江苏大学医学院
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出处
《江苏大学学报（医学版）》
CAS
2020年第6期499-503,509,共6页
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基金
江苏省研究生科研与实践创新计划项目(KYCX19-1635)。
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文摘
目的:探索核受体辅活化蛋白7(nuclear receptor co-activator 7,NCOA7)与微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)的相互作用,并确定其结合位点。方法:在胃癌AGS细胞中行质谱分析,在HEK293细胞中行GST-LC3沉淀实验,分别检测两种细胞中LC3结合蛋白;采用分子克隆法构建NCOA7不同截短体和点突变体;免疫印迹法检测NCOA7的截短体ΔN462,ΔN650,ΔN650-I749/750A质粒蛋白的表达水平;GST-LC3与NCOA7突变体的沉淀实验鉴定NCOA7与LC3的结合位点。结果:质谱分析和GST-LC3沉淀实验结果表明,NCOA7是LC3结合蛋白。免疫印迹结果显示,NCOA7不同截短体和点突变体质粒蛋白均有表达。GST-LC3与NCOA7突变体的沉淀结果显示,NCOA7 N端WEDL基序和C端WEII基序是LC3结合位点。WEII基序与LC3结合受到NCOA7的651~720位氨基酸结构抑制,是一个可调节的LC3结合位点。结论:NCOA7是LC3结合蛋白,其N端WEDL和C端WEII与LC3结合。
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关键词
核受体辅活化蛋白7
自噬
微管相关蛋白轻链3
LC3结合基序
结构域
基序
分子克隆
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Keywords
nuclear receptor co-activator 7
autophagy
microtubule-associated protein light chain 3
LC3 interactive region
domain
motif
molecular cloning
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分类号
R34
[医药卫生—基础医学]
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