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参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织NF-κB p65,IκBα,IκKβ蛋白及mRNA表达的影响 被引量:29
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作者 李姿慧 蔡荣林 +3 位作者 孙娟 罗梦曦 文印君 王瑞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期108-113,共6页
目的:观察参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IκK)/NF-κB抑制蛋白(IκB)/NF-κB信号通路的影响,探讨参苓白术散改善UC的作用机制。方法:将48只Wistar大鼠按照随机数字表法分为... 目的:观察参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IκK)/NF-κB抑制蛋白(IκB)/NF-κB信号通路的影响,探讨参苓白术散改善UC的作用机制。方法:将48只Wistar大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、参苓白术散(15.6 g·kg^-1)组、奥沙拉嗪钠(0.68 g·kg^-1)组,每组12只,脾虚湿困型UC大鼠模型采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠结合环境与饮食干预法复制,给药组连续灌胃14 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫组化和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织中NF-κB p65,IκBα,IκKβ蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠结肠组织NF-κB p65,IκBα,IκKβmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6及IL-1β含量均显著升高(P<0.01),结肠组织NF-κB p65,IκKβ蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.01),IκBα蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,参苓白术散组和奥沙拉嗪钠组大鼠血清TNF-α,IL-6及IL-1β水平均显著下降(P<0.01),结肠组织NF-κB p65,IκKβ蛋白和mRNA均显著下降(P<0.01),IκBα蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论:参苓白术散能明显下调脾虚湿困型UC大鼠结肠组织NF-κB p65,IκKβ,蛋白和mRNA表达,上调IκBα蛋白和mRNA表达;参苓白术散抑制UC大鼠IκK/IκB/NF-κB信号通路活化是其发挥肠黏膜保护作用的重要机制。 展开更多
关键词 参苓白术散 溃疡性结肠炎 核转录因子-κb(nf-κb)p65 nf-κb抑制蛋白(Iκb Iκb激酶β(IκKβ)
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平喘宁调节IRE-1α-XBP-1s信号轴干预哮喘大鼠气道炎症的机制研究
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作者 彭帅 蔡旻 +4 位作者 程悦 查君君 丁鹤影 刘晓莹 方向明 《中医药导报》 2024年第2期1-7,19,共8页
目的:探究平喘宁对哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法:将105只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制... 目的:探究平喘宁对哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法:将105只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制大鼠哮喘模型,造模21 d后,各给药组分别灌胃给予相应药物,正常组、模型组灌胃给予等体积的生理盐水,1次/d,连续4周。4周后,在进行哮喘激发试验后2 h内解剖大鼠并取出肺组织,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。HE染色观察肺组织中平滑肌厚度、炎症细胞浸润程度等相应病理的改变;ELISA法检测BALF中IL-5、IL-17水平;RT-qPCR法检测肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA、Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量;Western blotting法检测肺组织中IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果:HE染色结果显示,与模型组比较,各给药组(平喘宁低剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁高剂量组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组)大鼠肺组织病理情况都有不同程度的缓解。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显降低(P<0.01),且平喘宁具有剂量依赖性;平喘宁低、中剂量组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01);平喘宁高剂量组大鼠BALF中IL-5水平明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),而IL-17水平与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显升高(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01),Hgsnat 展开更多
关键词 支气管哮喘 平喘宁 炎症 肌醇依赖酶1α 剪接型X-盒结合蛋白1 核转录因子kappa b p65 大鼠
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阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1细胞增殖及NF-κB表达的影响 被引量:2
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作者 孙情 冯乔 +3 位作者 熊毅 黎玉凤 乔伟 冯乐平 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期862-866,共5页
目的探讨阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌及NF-κB p65的影响。方法培养胰岛细胞株NIT-1细胞,经不同浓度阿司匹林处理后,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechest33342荧光染色法观察细胞核形态和细胞凋亡变化,用放射免疫法测... 目的探讨阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌及NF-κB p65的影响。方法培养胰岛细胞株NIT-1细胞,经不同浓度阿司匹林处理后,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechest33342荧光染色法观察细胞核形态和细胞凋亡变化,用放射免疫法测定胰岛素分泌和通过NF-κB p65激活-核转运试剂盒在荧光显微镜下检测NF-κB p65的表达。结果随药物浓度增加和作用时间的延长,阿司匹林对NIT-1细胞增殖的抑制作用逐渐增强,细胞培养24h时,5mmol/L阿司匹林组与对照(NC)组比较(P=0.011374),10mmol/L阿司匹林组与NC组比较(P=0.000079),差异均有统计学意义。随阿司匹林剂量的不断增加,细胞培养各时间段均出现不同的剂量-效应关系。当药物浓度在1mmol/L时,细胞培养48h后,细胞增殖明显变缓慢,胰岛素分泌水平降低,且表现出明显的时间-效应关系。随阿司匹林浓度的增加,凋亡细胞数明显增多,细胞内NF-κB p65表达显著下降。结论阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1的增殖具有抑制作用,其抑制作用随阿司匹林浓度增加,呈时间-效应和剂量-效应关系。 展开更多
关键词 阿司匹林 胰岛瘤细胞 核因子κb 细胞凋亡
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清金化痰汤通过p38MAPK/NF-κB信号通路改善大鼠急性气道炎症的作用和机制 被引量:26
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作者 宋洪娟 黄正桥 +1 位作者 黄笑 王飞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期104-110,共7页
目的:探讨清金化痰汤治疗急性气道炎症模型大鼠气道炎症性损伤和黏液高分泌的作用和机制。方法:脂多糖(LPS)诱导建立急性气道炎症大鼠模型,随机分为空白组、模型组、地塞米松组、清金化痰汤高、中、低剂量(7.44,3.72,1.86 g·kg-1)... 目的:探讨清金化痰汤治疗急性气道炎症模型大鼠气道炎症性损伤和黏液高分泌的作用和机制。方法:脂多糖(LPS)诱导建立急性气道炎症大鼠模型,随机分为空白组、模型组、地塞米松组、清金化痰汤高、中、低剂量(7.44,3.72,1.86 g·kg-1)组,各组大鼠自给药开始计时,第4,7天分批次处死。采集肺泡灌洗液(BALF),气管及肺组织,观察各组大鼠BALF中白细胞及细胞分类计数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL)-1β,IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α以及黏蛋白(MUC5AC);光镜下观察气管和肺组织病理学改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK),核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白(IκBα),NF-κB p65蛋白表达水平。结果:清金化痰汤能抑制BALF中白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞升高,减轻气管和肺组织的病理学炎症积分,减少细胞因子IL-1β,IL-8,TNF-α水平及黏蛋白MUC5AC的表达,下调肺组织p38MAPK,NF-κB p65蛋白表达,增加IκBα蛋白表达水平。结论:清金化痰汤具有抑制炎症细胞浸润,减少细胞因子和黏蛋白MUC5AC的表达,抑制气道炎症反应的作用;清金化痰汤通过调控肺组织p38MAPK/NF-κB信号通路,抑制气道黏蛋白分泌和细胞因子的释放,从而改善气道黏液高分泌状态及其炎症性损伤。 展开更多
关键词 清金化痰汤 急性气道炎症 p38丝裂原活化蛋白激酶 核转录因子-κb p65
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肺炎克雷伯菌肺炎对小鼠NLRP3炎症通路的影响 被引量:6
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作者 张国荣 刘楠 刘莉 《世界临床药物》 CAS 2019年第2期95-100,共6页
目的建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,并探究肺炎克雷伯菌感染对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路的影响。方法给小鼠气管内接种肺炎克雷伯菌,观察小鼠死亡率;接种肺炎克雷伯菌48 h后,取小鼠肺部匀浆涂板检查菌落数;取... 目的建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,并探究肺炎克雷伯菌感染对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路的影响。方法给小鼠气管内接种肺炎克雷伯菌,观察小鼠死亡率;接种肺炎克雷伯菌48 h后,取小鼠肺部匀浆涂板检查菌落数;取小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)离心,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测无细胞上清中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6、趋化因子配体1(KC)的水平,迈格林华-姬姆萨染色计数细胞沉淀中的中性粒细胞数;取肺部病理切片并进行苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病变;提取肺部总蛋白,蛋白质印迹法检测NLRP3、核因子(NF)-κB p65、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-1)、人白介素-1β前体(pro-IL-1β)表达水平。结果成功建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,小鼠在144 h内死亡率达到百分之百,肺部有大量细菌负载,肺部中性粒细胞浸润增加,支气管肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α、IL-6、KC分泌升高,肺组织IL-1β、p-p65表达升高。结论通过将肺炎克雷伯菌液接种到小鼠肺部的方法所建立的肺炎小鼠模型稳定性高、可重复性好,肺部NLRP3炎症通路反应强烈。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌肺炎 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRp3)炎症通路 核因子(nf)-κb p65 凋亡相关微粒蛋白 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶 人白介素-1β前体
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肾蕨对乙酸致小鼠肛门溃疡的作用及NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2表达的影响 被引量:5
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作者 王小青 高杨 +1 位作者 马帅 商亚珍 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期122-127,共6页
目的:研究肾蕨叶水提取物(NLD)对小鼠肛门溃疡模型的作用及机制。方法:以20%乙酸(HAc)0.5 m L涂抹小鼠肛门,制备肛门溃疡模型,将50只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、NLD低、中、高剂量(0.45,0.9,1.8 g·kg^-1)组,每组10... 目的:研究肾蕨叶水提取物(NLD)对小鼠肛门溃疡模型的作用及机制。方法:以20%乙酸(HAc)0.5 m L涂抹小鼠肛门,制备肛门溃疡模型,将50只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、NLD低、中、高剂量(0.45,0.9,1.8 g·kg^-1)组,每组10只。各组小鼠自外涂给NLD计时,第10天处死。采集肛门、直肠组织,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠肛门、直肠组织中核转录因子(NF)-κB,肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β和环氧合酶(COX)-2mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肛门、直肠组织形态学变化。结果:NLD可恢复小鼠体质量增长趋势,降低小鼠肛门脏器指数,下调小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2 mRNA(P〈0.01),降低小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2蛋白表达(P〈0.01);NLD 0.9,1.8 g·kg^-1剂量组可抑制炎性细胞的浸润及黏膜下层血管扩张,改善相应炎症反应。结论:NLD对肛门溃疡模型小鼠的肛门溃疡有明显的改善作用,其机制可能与下调NF-κB mRNA和蛋白的表达,进而下调其下游因子TNF-α,IL-1β与COX-2的基因表达有关。 展开更多
关键词 肾蕨叶水提取物 溃疡 核转录因子-κb p65 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β 环氧合酶-2
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早产孕妇血中核因子-κB P65与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系 被引量:3
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作者 李丹 周昌菊 姚穗 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2008年第26期3725-3728,共4页
目的:探讨早产孕妇外周血中核因子-κBP65(NF-κB P65)、白细胞介素-8(IL-8)及重金属蛋白酶-9(MMP-9)与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系,寻找预测亚临床绒毛膜羊膜炎的最佳指标。方法:采用免疫细胞化学(ICC)方法检测36例早产临产孕妇外周血白... 目的:探讨早产孕妇外周血中核因子-κBP65(NF-κB P65)、白细胞介素-8(IL-8)及重金属蛋白酶-9(MMP-9)与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系,寻找预测亚临床绒毛膜羊膜炎的最佳指标。方法:采用免疫细胞化学(ICC)方法检测36例早产临产孕妇外周血白细胞中NF-κB P65表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测上述孕妇外周血清中IL-8及MMP-9浓度,胎盘胎膜病理检查有无组织学绒毛膜羊膜炎,并与未足月对照组、足月对照组进行对比。结果:①早产亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇NF-κB P65、IL-8及MMP-9均显著高于非绒毛膜羊膜炎孕妇(P<0.05)。②早产临产组内无亚临床绒毛膜羊膜炎者外周血白细胞中NF-κBP65表达水平与未足月对照组、足月对照组比较无显著性差异(P>0.05)。③未足月对照组孕妇外周血白细胞中NF-κBP65表达水平与足月对照组比较无显著性差异(P>0.05)。④根据ROC曲线计算出母血NF-κB P65表达水平为3.50、IL-8浓度34.76ng/ml、MMP-9浓度360.81ng/ml可作为亚临床绒毛膜羊膜炎的诊断阈值。结论:①孕妇血白细胞中NF-κB P65表达水平与感染性早产有关。②孕妇外周血NF-κBP65表达水平可作为预测早产亚临床绒毛膜羊膜炎的指标。 展开更多
关键词 早产 绒毛膜羊膜炎核因子-κb p65 白细胞介素-8 重金属蛋白酶-9
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核因子-κB p65在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 张爱萍 高英敏 张煦 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第9期536-537,共2页
目的 探讨NF κBp6 5蛋白在宫颈鳞癌及宫颈腺癌组织中表达的意义。 方法 采用免疫组织化学方法 ,用NF κBp6 5单克隆抗体检测 6 4例宫颈鳞癌组织 ,6例宫颈腺癌组织 ,11例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)组织 ,16例慢性宫颈炎组织中NF κBp6 ... 目的 探讨NF κBp6 5蛋白在宫颈鳞癌及宫颈腺癌组织中表达的意义。 方法 采用免疫组织化学方法 ,用NF κBp6 5单克隆抗体检测 6 4例宫颈鳞癌组织 ,6例宫颈腺癌组织 ,11例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)组织 ,16例慢性宫颈炎组织中NF κBp6 5的表达。 结果 NF κBp6 5在宫颈鳞癌和腺癌中的阳性表达明显高于CIN和慢性宫颈炎组织 ,有淋巴转移的癌组织中NF κBp6 5的阳性表达率高于无淋巴转移的癌组织。结论 NF κBp6 展开更多
关键词 核因子-κb p65 宫颈鳞癌 宫颈腺癌
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MafK通过p65乙酰化对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 被引量:1
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作者 陈承霞 黄梦照 《解剖学研究》 CAS 2022年第6期519-524,531,共7页
目的探究MafK对大鼠心肌细胞(H9c2)缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及相关机制。方法将H9c2细胞随机分为对照组、H/R组、抑制对照组和MafK抑制组。对照组(按H9c2细胞的正常培养方式进行处理)、H/R组(H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧12 h的处理)... 目的探究MafK对大鼠心肌细胞(H9c2)缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及相关机制。方法将H9c2细胞随机分为对照组、H/R组、抑制对照组和MafK抑制组。对照组(按H9c2细胞的正常培养方式进行处理)、H/R组(H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧12 h的处理)、抑制对照组(H9c2细胞转染空白对照siRNA-NC 48 h后进行H/R处理)和MafK抑制组(H9c2细胞转染siRNA-MafK 48 h后进行H/R处理)。CCK-8法检测各组细胞的活性;ELISA法检测各组TNF-α和IL-6的表达水平;Caspase-3活性检测试剂盒检测各组细胞的Caspase-3活性;Western blot检测各组细胞的MafK蛋白、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2和Cleaved caspase-3)和NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平。结果与对照组相比,MafK在H/R组中的表达水平显著升高(P<0.01)。与抑制对照组相比,敲低MafK可以显著降低MafK在H/R处理下的H9c2细胞中的表达水平(P<0.05)。与对照组相比,H/R组H9c2细胞活性降至(47.07±4.07)%(P<0.05),而TNF-α和IL-6的表达水平则由原来的(12.78±2.11)pg/mL、(45.01±4.07)pg/mL提升至(88.90±7.34)pg/mL(P<0.05)、(148.36±13.36)pg/mL(P<0.05),并且Caspase-3活性A值由0.21±0.01提升至0.52±0.02(P<0.05),促进了H9c2的炎症和凋亡。而敲低MafK使H9c2细胞活性由(48.20±3.09%)提升至(74.90±5.54)%(P<0.05),并将TNF-α和IL-6的表达水平则由原来的(93.55±8.53)pg/mL、(151.52±9.55)pg/mL降低至(64.99±5.47)pg/mL(P<0.05)、(102.24±6.79)pg/mL(P<0.05)。此外,使Caspase-3活性A值由0.53±0.04降至0.34±0.03(P<0.05),表明敲低MafK将逆转由H/R引起的炎症和凋亡的变化。与抑制对照组相比,敲低MafK可以显著抑制Bax和Cleaved Caspase-3的表达而促进Bcl-2的表达。最后,敲低MafK还可以显著抑制NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平。结论抑制Mafk可以有效减轻缺氧/复氧对心肌细胞的损伤,其机制可能与调控p65乙酰化有关。 展开更多
关键词 心肌细胞 H9c2细胞株 缺氧/复氧 Maf转录因子 核转录因子κb p65
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siRNA介导NF-κB p65沉默联合5-Fu诱导胃癌细胞SGC7901凋亡
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作者 李怡君 王立 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第9期853-856,共4页
目的运用siRNA抑制胃癌细胞株SGC7901中NF-κB p65基因的表达,探讨其对细胞增殖和凋亡的影响,并分析该基因对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性的作用。方法将SGC7901细胞分为空白对照组、脂质体组、5-Fu组、siRNA组和联合组,除空白对照组... 目的运用siRNA抑制胃癌细胞株SGC7901中NF-κB p65基因的表达,探讨其对细胞增殖和凋亡的影响,并分析该基因对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性的作用。方法将SGC7901细胞分为空白对照组、脂质体组、5-Fu组、siRNA组和联合组,除空白对照组外,各组分别给予相应的药物。Western blot法检测各组细胞NF-κBp65蛋白的表达;Annexin V-PI法检测细胞凋亡;MTT法检测各组细胞的增殖水平。结果NF-κBp65蛋白在空白对照组和脂质体组中高表达,在5-Fu组、siRNA组和联合组中低表达,其中以联合组表达量最低;各组细胞早期凋亡率分别为1.40%±0.20%、2.36%±0.58%、6.68%±0.34%、6.60%±0.64%和21.62%±1.12%,其中以联合组最高;细胞的增殖活性随着siRNA浓度的增加和作用时间的延长而下降。结论siRNA能有效抑制NF-κBp65基因的表达,从而抑制SGC7901细胞增殖,促进其凋亡,并增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 胃癌 nf-κbp65 siRNA 5-氟尿嘧啶 细胞凋亡
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二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响 被引量:21
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作者 尚立芝 季书 +6 位作者 王国强 陈晓辉 谢文英 李耀洋 张光远 石龙涛 徐莉莉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期65-72,共8页
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及相关分子的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:将40只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组... 目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及相关分子的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:将40只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、二陈汤加味组和EVP4593(NF-κB抑制剂)组。以香烟烟雾联合气管滴注脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味组以10 g·kg-1灌胃(ig),EVP4593组皮下注射1 mg·kg-1,正常组、模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1),趋化因子(CXCL)-2,CXCL-3和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平,免疫组化(IHC)检测TLR4,MyD88,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)在大鼠肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味组TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA及其蛋白表达均显著减弱(P<0.05,P<0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路相关信号分子基因的表达,以及减少HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1的释放有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 二陈汤 Toll样受体4 核转录因子-κb p65 单核细胞趋化蛋白-1
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牛大力多糖对LPS诱导的RAW264.7细胞炎性因子释放的影响 被引量:19
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作者 齐耀群 刘若轩 +4 位作者 李常青 李丽明 郭洁文 王佳佳 陈滨 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期493-497,共5页
目的研究牛大力多糖对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响,并观察核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和抑制性卡巴蛋白-α(IκB-α)表达的变化。方法选用小鼠巨噬细胞RAW264.7,随机分为空白对照组,LPS模型组,牛... 目的研究牛大力多糖对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响,并观察核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和抑制性卡巴蛋白-α(IκB-α)表达的变化。方法选用小鼠巨噬细胞RAW264.7,随机分为空白对照组,LPS模型组,牛大力多糖低、中、高剂量组(10,100,1000 ng·m L^(-1)),加药孵育2 h后,再加入10μg·m L^(-1)LPS至培养板中继续培养10 h,ELISA法测定各组细胞炎性因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,Western Blot法检测IκB-α蛋白以及NF-κB p65蛋白的表达水平。结果与LPS模型组比较,牛大力多糖高、中、低剂量组均能不同程度地抑制LPS诱导的3种炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放(P<0.05,P<0.01),提高IκB-α蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低NF-κB p65蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),且牛大力多糖对上述指标的作用强度与剂量呈正相关,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论牛大力多糖可通过增加IκB-α蛋白和抑制NF-κB p65蛋白的表达,从而降低炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放,起到抗炎作用。 展开更多
关键词 牛大力多糖 RAW264.7细胞 脂多糖 核转录因子-κb 抑制性卡巴蛋白-α
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小续命汤联合超早期针刺督脉对于脑缺血再灌注模型大鼠自噬相关蛋白NF-κB p65的影响 被引量:7
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作者 吴海洋 王颖 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期30-35,共6页
目的:探讨小续命汤联合超早期针刺督脉对于脑缺血再灌注模型大鼠自噬相关蛋白核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的影响,研究自噬相关蛋白NF-κB p65与脑保护机制的关系,寻找针刺最佳干预时间点。方法:将152只成年SD雄性大鼠随机分为假手... 目的:探讨小续命汤联合超早期针刺督脉对于脑缺血再灌注模型大鼠自噬相关蛋白核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的影响,研究自噬相关蛋白NF-κB p65与脑保护机制的关系,寻找针刺最佳干预时间点。方法:将152只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、小续命汤高剂量组(药高组)、小续命汤低剂量组(药低组)、针刺组、小续命汤高剂量+针刺组(针高组)和小续命汤低剂量+针刺(针低组)7组。模型组、药高组、药低组、针刺组根据缺血再灌注30 min,2,4,6 h各分为4个亚组,每组6只。造模成功后,根据Zea Longa的神经功能评分,将符合标准大鼠收入相应组别。假手术组仅做颈动脉剥离;模型组仅造模不做任何治疗;小续命汤高低剂量组按照动物体表面积计算,分别给予60 g·kg-1·d-1和15 g·kg-1·d-1灌胃治疗,针刺治疗采用通督调神针刺。连续治疗14 d后进行神经功能评分;运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠脑组织中自噬相关蛋白NF-κB p65的表达。结果:与假手术组比较,模型组、药高组、药低组、针刺组、针高组和针低组各时间点神经功能缺损评分显著升高(P<0.01);与模型组比较,药高组、药低组、针刺组、针高组和针低组各时间点神经功能缺损评分显著降低(P<0.01);与假手术组比较,模型组、药高组、药低组、针刺组、针高组和针低组各时间点脑组织中NF-κB p65显著升高(P<0.01);与模型组比较,药高组、药低组、针刺组、针高组和针低组各时间点脑组织中NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05),其中以针高组最为显著(P<0.01)。结论:小续命汤联合超早期针刺督脉可以显著改善脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损情况;小续命汤联合超早期针刺督脉可以抑制脑缺血再灌注模型大鼠自噬相关蛋白NF-κB p65活性,保护脑功能;小续命汤联合超早期针刺督脉在6 h内各组脑保护效应没有显著差异。 展开更多
关键词 小续命汤 针刺 督脉 核转录因子-κb p65(nf-κb p65) 自噬 脑缺血再灌注 超早期
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桑叶水提物对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其机制
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作者 黄艳 张慧琳 +8 位作者 何昶昊 安永铖 付宛鑫 王梦璐 单子轶 杜雨航 解佳美 贾占红 赵保胜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期51-59,共9页
目的:观察桑叶水提物(MLE)对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57BLKS/JGpt-Leprdb/Leprdb(db/db)小鼠按空腹血糖(FBG)值随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组... 目的:观察桑叶水提物(MLE)对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57BLKS/JGpt-Leprdb/Leprdb(db/db)小鼠按空腹血糖(FBG)值随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6只C57BLKS/JGpt同窝野生型(m/m)小鼠作为正常组。各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均给予等体积去离子水,每日灌胃1次,连续给药8周。测定小鼠体质量、双侧肾脏绝对重量、FBG,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),苏木素-伊红染色、过碘酸雪夫染色观察肾脏组织病理变化,检测血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)含量,酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和尿微量白蛋白(U-mAlb)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、肾脏绝对重量、FBG、OGTT曲线下面积(AUC)显著升高(P<0.01),SCr、BUN、U-mAlb含量显著升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01),肾组织出现肾小球基底膜增厚,炎性细胞浸润明显,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠肾脏绝对重量明显降低(P<0.05,P<0.01);第4~8周二甲双胍组、MLE-L组、MLE-H组FBG明显降低(P<0.05,P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠AUC显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠AUC呈下降趋势,差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠SCr、BUN、U-mAlb含量显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠SCr、U-mAlb含量显著降低(P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠血清TNF-α、IL-6含量显著降低(P<0.01);各给药组小鼠肾组织病变均得到不同程度改善;MLE-H组小鼠肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水� 展开更多
关键词 桑叶水提物 2型糖尿病 糖尿病肾病 Toll样受体4(TLR4) 髓样分化因子88(MyD88) 核转录因子-κb p65(nf-κb p65)
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穴位埋线对溃疡性结肠炎的疗效评价及对NF-κB和5-LOX表达的影响 被引量:5
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作者 宗伟 孙燕 刘贵生 《四川中医》 2015年第10期156-160,共5页
目的:通过检测结肠黏膜NF-κB p65及5-LOX的表达情况,探讨穴位埋线对溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果。方法:选取活动期轻、中度UC患者60例,随机分为三组,即埋线组、拉嗪组和联合组,每组20例,另设20例健康体检者作为对照组,于治疗前后评估... 目的:通过检测结肠黏膜NF-κB p65及5-LOX的表达情况,探讨穴位埋线对溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果。方法:选取活动期轻、中度UC患者60例,随机分为三组,即埋线组、拉嗪组和联合组,每组20例,另设20例健康体检者作为对照组,于治疗前后评估临床症状及结肠镜下病变活动性,ELISA法测定血清IL-8和TNF-α血清水平。然后分别运用RT-PCR及免疫组化检测SP法检测结肠黏膜5-LOX和NF-κB p65的mRNA及其蛋白在各组治疗前后的表达情况。结果:治疗后三组临床症状和结肠镜下病变活动性较治疗前有明显改善(P<0.05),且联合组的临床症状和结肠镜下病变活动性与穴位埋线组和美沙拉嗪组相比改善较为明显(P<0.05)。而且治疗后三组的IL-8和TNF-α血清水平明显低于对照组和治疗前。此外治疗前,三组患者结肠黏膜5-LOX和NF-κB p65的mRNA及蛋白表达亦明显高于对照组(P<0.05),治疗6周后,5-LOX和NF-κB p65的mRNA及蛋白表达较治疗前有明显下降(P<0.05)。结论:穴位埋线疗法联合美沙拉嗪治疗活动期轻、中度UC的疗效较好,其机制可能是通过抑制5-LOX和NF-κB p65的表达而起到治疗作用。 展开更多
关键词 穴位埋线 溃疡性结肠炎 核因子κb p65 5-脂氧合酶
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骨髓间充质干细胞对多器官功能障碍综合征大鼠炎症的抑制作用及机制
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作者 尹燕涛 曹秋梅 马炳辰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期673-678,共6页
目的观察骨髓间充质干细胞(BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、BMSC组,每组10只。模型组和BMSC组大鼠腹腔注射7 mg/kg脂多糖(LPS)建立MODS模型。体外培养大鼠BMSC,取第4... 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、BMSC组,每组10只。模型组和BMSC组大鼠腹腔注射7 mg/kg脂多糖(LPS)建立MODS模型。体外培养大鼠BMSC,取第4代细胞用于实验,BMSC组大鼠尾静脉注射1×10^(6)个BMSC,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等量生理盐水。造模后72 h,血气分析仪检测血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2));ELISA检测大鼠血清总胆红素(TB)、白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、环磷酸腺苷(cAMP)的含量;HE染色观察肺、肝和肾组织病变情况;Western blot法检测大鼠肺、肝和肾组织中蛋白激酶A(PKA)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和BMSC组PaO_(2)显著降低,PaCO_(2)显著增高;TB、Cr、BUN、TNF-α和IL-6水平升高,ALB和cAMP水平降低,肺、肝、肾组织中PKA蛋白表达水平降低,NF-κB p65蛋白表达水平升高。与模型组比较,BMSC组PaO_(2)显著升高,PaCO显著降低,TB、Cr、BUN、TNF-α、IL-6水平降低,ALB和cAMP水平升高,肺、肝、肾组织中PKA蛋白表达水平升高,NF-κB p65蛋白表达水平降低。结论BMSC可减轻MODS大鼠器官功能损害,抑制炎症因子释放,与cAMP/PKA/NF-κB信号通路的表达水平改变有关。 展开更多
关键词 多器官功能障碍综合征(MODS) 骨髓间充质干细胞(bMSC) 炎症 环磷酸腺苷(cAMp) 蛋白激酶A(pKA) 核因子κb p65(nf-κb p65)
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Nuclear Factor kappa B p65 Expression in Mouse Cochlea
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作者 Jochen Schacht 《Journal of Otology》 2007年第1期30-35,共6页
Nuclear factor kappa B(NF-κB) is one of the best-characterized transcription factors playing important roles in many cellular responses to a large variety of stimuli,including inflammatory cytokines, phorbol esters, ... Nuclear factor kappa B(NF-κB) is one of the best-characterized transcription factors playing important roles in many cellular responses to a large variety of stimuli,including inflammatory cytokines, phorbol esters, growth factors, and bacterial and viral products. The aim of this study is to demonstrate NF-κB expression in the mouse cochlea and its enhancement in response to lipopolysaccharides(LPS) and kanamycin(KA) treatment. Methods KA treatment consisted of subcutaneous KA injections at 700 mg/kg twice a day with an eight-hour interval between the two injections for 3 or 7 days. For animals in the LPS treatment group, a single dose of 0.3 mg LPS dissolved in 0.2 ml sterile saline were injected into both bullae through the tympanic membrane and kept there for 3 hours. Animals in the control group received subcutaneous saline injection for 7 days. Following immmunohistochemichal processing with rabbit polyclonal anti-NF-κB p65 antibodies, cryosections of the cochlea were examined for expression of NF-κB p65 in various structures in the cochlea. Results NF-κB p65 expression, identified by presence of brown reaction products characteristic of DAB immunohistochemistry, was visible in the spiral ligament, spiral prominence, tectorial membrane(TM), spiral ganglion and nerve fibers. Relatively weak NF-κB p65 expression was also visualized in the organ of Corti. Within the organ of Corti, the inner hair cells(IHC), outer hair cells(OHC), inner pillar cells(IP), outer pillar cells (OP), Deiter’s cells(DC), and Boettcher’s cells exhibited stronger staining than the inner sulcus cells, Hensen’s cells(HC) and Claudius’cells. No NF-κB p65 expression was seen in the nucleus of the IHC and OHC. NF-κB p65 expression was increased in animals exposed to LPS or KA, demonstrating significant differences in the staining between control animals and LPS/KA-treated animals. NF-κB p65 expression was not significantly different between LPS treated and KA treated animals or between 3 and 7 days in KA-treated animals. C 展开更多
关键词 transcription factors nuclear factor kappa b p65(nf-κb p65) mouse cochlea IMMUNOHISTOCHEMISTY lipopolysaccharide(LpS)
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核因子-κB p65在小鼠耳蜗中的表达 被引量:1
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作者 孙建和 杨伟炎 +1 位作者 沙素华 Jochen Schacht 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2006年第4期289-291,303,T0003,共5页
目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法24只小鼠随机平均分为4组,其中2组分别连续3d和7d于皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),一组鼓室注射脂多糖(lipopolysac-charides LPS),另一组皮下注射等量生理... 目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法24只小鼠随机平均分为4组,其中2组分别连续3d和7d于皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),一组鼓室注射脂多糖(lipopolysac-charides LPS),另一组皮下注射等量生理盐水7d作为对照,用多克隆兔抗体NF-κB p65免疫组织化学等染色,观察NF-κB p65在小鼠耳蜗的表达。结果NF-κB p65主要定位在耳蜗的螺旋缘、盖膜、血管纹、螺旋韧带、螺旋神经节和神经纤维。整个耳蜗各回均可观察到免疫反应,而螺旋韧带、盖膜、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维均可观察到较强的NF-κB p65免疫反应,Corti器的免疫反应比上述结构要弱一些。Corti器的内、外毛细胞,内、外柱细胞,Deiter细胞和Claudious细胞均可观察到NF-κB p65的免疫反应,这些免疫反应在内沟细胞、Hensen细胞和Claudious细胞显示较弱,而在螺旋神经节较强,内、外毛细胞核未见免疫反应。省去一抗的对照染色未观察到NF-κB p65的阳性反应。用脂多糖和卡那霉素处理的小鼠耳蜗NF-κB p65的免疫反应与注射正常生理盐水的小鼠耳蜗有显著性差异,而注射脂多糖和卡那霉素3d和7d NF-κB p65的免疫反应无差异。结论注射脂多糖和卡那霉素可使NF-κB p65在耳蜗的表达增强。 展开更多
关键词 转录因子 核因子-κb p65小鼠耳蜗 免疫组织化学 脂多糖
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EGCG对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:1
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作者 曾贤慧 罗小玲 +2 位作者 沈筱芸 王江燕 冯雁 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期193-199,共7页
本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对BALB/c小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。取健康雄性Balb/c小鼠18只,随机分3组(n=6),分别为:对照组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和I/R+EGCG处理组(EGC... 本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对BALB/c小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。取健康雄性Balb/c小鼠18只,随机分3组(n=6),分别为:对照组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和I/R+EGCG处理组(EGCG组)。各组分别于再灌注末摘除眼球取血样,处死小鼠收集肝组织。测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;取缺血再灌注肝叶(左外叶肝)组织行HE染色后光镜下观察其病理形态学改变;免疫组织化学测定TLR4(Toll-like receptor4,TLR4)和NF-κB P65(nuclear transcription fator-kappa B P65)蛋白的表达量。结果发现,经EGCG预处理后,EGCG组小鼠血清AST、ALT的水平明显低于IR组(P<0.05),而显著高于Sham组(P<0.01)。HE染色结果显示,EGCG组左外叶肝组织损伤程度明显小于IR组,但较Sham组显著增大。免疫组化结果显示,EGCG组TLR4及NF-κB P65蛋白的阳性表达评分分别为(6.67±1.97分,5.67±1.51分)比I/R组(9.00±1.55分,8.33±2.25分)明显降低(P<0.05),较Sham组(3.00±0.98分,2.83±0.98分)显著升高(P<0.01)。设对照组基准值为1.00,real time-PCR结果示,I/R组左外叶肝组织中IL-1b和TNF-α的mRNA相对表达水平较EGCG组明显增高(P<0.05),同时EGCG组较Sham组显著增高(P<0.01)。研究表明,EGCG可抑制炎症反应,减少肝组织缺血再灌注损伤,其机制可能与EGCG调节TLR4/NF-κB P65信号通路及通路下游TNF-α、IL-6等炎症分子表达的变化有关。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 缺血再灌注 nf-κb p65 TLR4 bALb/C小鼠
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